- •Біотехнологія
- •Клітинна інженерія
- •Культури клітин
- •Характеристика будови клітин. Клітинний цикл.
- •1955 Рік Ігл описав середовища Ігла до складу якого входять компоненти необхідні для існування клітин тварин в умовах in vitro
- •Моноклональні антитіла
- •Клонування
- •Біотехнологія одержання антибіотиків
- •Генна інженерія
- •Біотехнологія одержання гормонів Одержання інсуліну.
- •Одержання соматотропіну.
- •Біотехнологія одержання інтерферонів
- •Біотехнологія одержання вакцин нового покоління
- •1990 Рік - початок розробок. У 1992-1993 роках доведено, що введення чужорідної днк в організм тварини сприяє формуванню імунітету
- •Біотехнологічне виробництво незамінних амінокислот
- •1. Мікробіологічний синтез
- •2. Хімічний синтез:
- •3. Виробництво амінокислот з білкових гідролізатів:
- •Бітехнологічне виробництво білка
- •1. Отримання мікробного білка на вуглеводній сировині:
- •2. Отримання мікробного білка на нищих спиртах:
- •3. Отримання мікробного білка на вуглеводневій сировині:
- •Бітехнологічне виробництво ферментних препаратів
- •Бітехнологічне виробництво вітамінів
Одержання соматотропіну.
Отримання соматотропіну з природного матеріалу
З гіпофізу однієї людини можна отримати 4-6 мг гормону.
При лікуванні однієї дитини вагою 10-20 кг для введення соматотропіну в дозі 6-10 мг/кг ваги 3 рази на тиждень на протязі 4-5 років треба отримати соматотропін від 15 000 трупів.
У 1981 році в США отримали соматотропін з 60 000 трупів, в Англії – 70 000.
Недоліки методу отримання з природного матеріалу:
Обмеженість сировини.
Можливе зараження матеріалу вірусами.
Можливе утворення в організмі пацієнта антитіл до отриманого препарату.
Виробництво соматотропіну на основі технології рекомбінантних ДНК (Kabi Vitrum з Genentech Inc.)
1) Виділення м-РНК. 2) Синтез к-ДНК. 3) Синтез другого ланцюга ДНК. 4) При введення такого гену в E.coli синтез соматотропіну не відбувався. 5) Ген розрізали на дві частини (кодують 1-23 і 24-191 амінокислотні залишки). 6) З’єднали дві частини і вмонтували в E.coli штам К12, яка синтезувала соматотропін.
Біотехнологія одержання інтерферонів
У 1957 році Alick Issacs (шотландець) та Jean Lindenmann (швейцарець) встановили, що при інфікування ембріону курки вірусом грипу, клітини продукують білки, що руйнують вірус та пригнічують розвиток інших вірусів в ембріонах. Білки назвали інтерферонами, через їх здатність перешкоджати (interfere with) реплікації вірусів.
Інтерферони це білки, що продукуються клітинами імунної системи хребетних у відповідь на віруси, паразити чи пухлинні клітини.
І. є частиною неспецифічної імунної системи і виробляються на перших етапах інфікування вірусом до відповіді специфічної імунної системи.
І. зв’язуються із рецепторами на поверхні клітин, та індукують транскрипцію окремих генів, чим надають клітинам антивірусний статус.
Типи інтерферонів:
Тип І. Не виробляються нормальними клітинами, а лише тими, що інфіковані вірусами. Спричинюють продукцію інтерферонів ДНК, одно- та дволанцюгова РНК, ліпополісахариди:
Інтерферон α (лейкоцитарний) виробляється лейкоцитами, що інфіковані вірусами;
Інтерферон β (фібробластний) виробляється фібробластами, що інфіковані вірусами, або епітеліальними клітинами, що інфіковані вірусами;
Інтерферон ω.
Тип ІІ. Виробляються у відповідь на антигени (включаючи і антигени вірусів) чи мітогени:
Інтерферон γ (імунний) виробляється лімфоцитами.
Тип ІІІ.
CRF2-4 та CRF2-12.
У 1980 році отримали інтерферон α 2а, який за допомогою технології рекомбінантних ДНК виробили дріжджі Reiferon Retard
Загальний продаж препаратів інтерферонів 5 000 000 000 $
Використання інтерферонів:
Інтерферони α і β для лікування вірусних інфекцій (α – гострий та хронічний гепатит С та хронічний гепатит В).
Інтерферон γ при потребі активації макрофагів (лейшманіоз, токсоплазмоз).
Інтерферони мають антипроліферативний ефект, тому їх використовують при лікування меланоми, лейкемії, лімфоми, СНІД залежної саркоми Kaposi’s.
Препарати інтерферону:
Rebif, liquid form of Interferon beta 1a; Avonex, lyophilized form of Interferon beta 1a; Cinnovex, загальна form of Interferon beta 1a (Avonex); Betaseron, Interferon beta 1b; Roferon A. нормальний Interferon-alpha2a; Intron-A, нормальний Interferon-alpha2b; PEGASYS, Pegylated Interferon alpha 2a; Berlex, Interferon beta 1b; PegIntron, Pegylated Interferon alpha 2b; Reiferon Etard , pegylated Interferon alpha 2a.
