
- •Бийский технологический институт (филиал)
- •Микробиологическая лаборатория и её оборудование
- •1 Программа лабораторного занятия
- •2 Устройство микробиологической лаборатории
- •3 Подготовка микробиологической лаборатории к работе и правила работы в ней
- •3.1 Обработка помещений микробиологической лаборатории
- •3.2 Правила по технике безопасности при работе в микробиологической лаборатории
- •4 Оборудование и принадлежности микробиологической лаборатории
- •4.1 Аппаратура для выращивания микроорганизмов,
- •4.2 Посуда и инструменты, применяемые в микробиологической лаборатории
- •4.3 Микроскопы и методы микроскопии
- •4.3.1 Устройство светового микроскопа
- •4.3.2 Основные технические характеристики микроскопа
- •4.3.3 Основные правила работы с микроскопом
- •4.3.4 Различные методы микроскопии
- •Контрольные вопросы
- •Литература
- •Содержание
4 Оборудование и принадлежности микробиологической лаборатории
4.1 Аппаратура для выращивания микроорганизмов,
стерилизации и других микробиологических целей
Термостат – прибор для поддержания постоянства температуры применяют для выращивания культур микроорганизмов. Он представляет собой шкаф (рисунок 1), в котором поддерживается в течение длительного времени определенная температура. Оптимальная температура для размножения многих микроорганизмов 37 ºС. Термостаты бывают суховоздушными и водяными.
Сушильный шкаф (печь Пастера) используют для стерилизации сухим жаром посуды, инвентаря и сухих материалов, например крахмала, мела (рисунок 2). Стерилизуемый материал предварительно заворачивают в бумагу и помещают в шкаф так, чтобы он не касался стенок. Стерилизацию проводят при температуре 160 ºС в течение двух часов. Поднимать температуру выше 180 ºС не рекомендуется: ватные пробки и бумага начинают разрушаться (буреют, становятся ломкими). Простерилизованный материал вынимают после отключения и охлаждения шкафа, лучше, когда температура в шкафу сравняется с комнатной.
Прибор для счета колоний (рисунок 3) полуавтоматический счетчик, снабженный электропером с пружинным устройством, предназначенный для счета колоний бактерий в чашках Петри. Чашку Петри с колониями бактерий устанавливают вверх дном на растровое стекло. Легкий нажим электропера на участке дна чашки Петри, соответствующем положению колонии, оставляет на стекле метку. При этом держатель поднимается вверх, цепь замыкается, и показания счетчика увеличиваются на единицу. Отсчет количества колоний бактерий производится путем вычисления разности показаний импульсного счетчика до начала отсчета и после его окончания.
Автоклав (рисунок 4) – толстостенный аппарат, предназначенный для стерилизации посуды и питательных сред паром под давлением. Это герметичный котел с двойными металлическими стенками и крышкой. Пространство между стенками (водопаровая камера) заполняется водой. Внутренняя часть (стерилизационная камера) снабжена манометром, предохранительными клапанами и краном для спуска воды и пара. Для создания герметичности автоклав плотно закрывается крышкой с резиновой прокладкой. Применяют для стерилизации питательных сред под давлением от 0,5 до 1,0 МПа в течение 20…30 минут.
1 – корпус; 2 – термометр; 1 – крышка; 2 – корпус;
3 – дверца; 4 – потенциометр; 3 – редуктор; 4 – блок управления;
5 – тумблер; 6 – лампа; 5 – маркировка; 6 – термометр
7 – вентиляционные отверстия
Рисунок 1 – Термостат Рисунок 2 Сушильный шкаф
1 – столик для чашки Петри; 2 – перо с пружинным устройством;
3 – показатель счетчика; 4 – тумблер для включения импульсного счетчика; 5 – тумблер для включения лампы освещения счетчика
Рисунок 3 Прибор для счёта колоний микроорганизмов
а
б
1 – стерилизационная камера; 2 – кран для выхода воздуха;
3 – манометр; 4 – предохранительный клапан;
5 – водопаровая камера; 6 – воронка для заполнения автоклава водой;
7 – отверстия для поступления пара в стерилизационную камеру;
8 – крышка; 9 – подставка для размещения стерилизуемых материалов
Рисунок 4 – Горизонтальный (а) и вертикальный (схема) (б) автоклавы
1 – крышка; 2 – дно
Рисунок 5 Чашка Петри
Холодильники используются в микробиологических лабораториях для хранения культур микроорганизмов, питательных сред, сывороток и прочих биологически активных препаратов при температуре около 4 ºС. Для сохранения биопрепаратов при температуре ниже 0 ºС используются низкотемпературные холодильники, в которых поддерживается температура минус 20 ºС и ниже.
Аппарат Коха применяют для стерилизации питательных сред, разрушающихся при температуре выше 100 ºС. Он представляет собой металлический полый цилиндр с двойным дном и конусообразной крышкой, которая имеет отверстие для выхода пара. Аппарат покрыт теплоизолирующим материалом (асбестом или линолеумом). Сосуды с питательными средами ставят на подставку с отверстиями, находящуюся внутри аппарата неплотно, чтобы обеспечить возможность наибольшего контакта их с паром. Обработка стерилизуемого материала в аппарате Коха производится в течение трех дней по 30 минут ежедневно. В перерывах между стерилизацией среду помещают на двадцать четыре часа в термостат при 28…30 ºС.
Центрифуги применяются для осаждения микроорганизмов и других клеток, для разделения неоднородных жидкостей (эмульсии, суспензии). В основе метода центрифугирования лежит принцип отделения крупных частиц с большей плотностью при низких скоростях. При повышении скорости центрифуг можно осадить все более мелкие частицы.
Микроанаэростат аппарат для выращивания микроорганизмов в анаэробных условиях.