Методы определения количества гемоглобина:
Фотометрический (основан на соединении гемоглобина с железом). В норме в гемоглобине содержится 0,34% железа.
Газоаналитический (по количеству поглощенного газа или связанного кислорода). Известно, что 1 г Hb присоединяет 1,36 мл кислорода.
Колориметрический (по сравнению с цветом стандарта) — метод по Сали.
Спектрофотометрический (основан на измерении экстинции (поглощения) кислорода. Наиболее точный из общепринятых методов.
Группы крови
Описаны Ландштайнером (1901) и Янским (1903), которые определили наличие агглютиногенов и агглютининов.
Агглютинины - специфические антитела, растворенные в плазме и тканевой жидкости.
Агглютиногены (гемагглютиногены) — специфические комплексы, обладающие антигенными свойствами. Расположены в эритроцитах, лейкоцитах и тромбоцитах.
В крови каждого человека содержится индивидуальный набор агглютиногенов. В настоящее время их известно около 400 видов. Из них можно составить от 3 млн. до 500 млрд. комбинаций. Наибольшее значение имеют системы АВ0 и Rh.
У людей имеется 4 комбинации агглютиногенов и агглютининов системы АВ0, которые обозначаются соответственно: I — 0 (); II — А (); III — В (); IV — АВ (0). Распространенность этих групп различна. В среднем на Земле: I гр. — 40-50%, II гр. — 30-40%, III гр. — 10-20%, IV гр. — 5%.
В крови одного человека содержатся разноименные гемагглютинины. При встрече одноименных гемагглютининов происходит реакция агглютинации.
Rh-агглютиноген открыт в 1940 году у маккак resus и имеет 6 разновидностей: D, C, E, d, c, e. У 85% людей присутствует агглютиноген D, обладающий наиболее выраженными антигенными свойствами - Rh+. У 15% - другие разновидности - Rh- или rh. В отличие от системы АВ0 Rh-агглютинины появляются только после контакта с Rh-агглютиногенами (т.е. после сенсибилизации). Например, при повторном переливании Rh-несовместимой крови. Rh-фактор играет большую роль в развитии Rh-конфликта при беременности Rh(-) матери Rh(+) плодом. В кровь матери попадают эритроциты плода (особенно в конце беременности), что приводит к выработке анти-Rh-агглютининов против эритроцитов плода. Т.к. титр таких антител в крови матери возрастает относительно медленно (несколько месяцев), то при первой беременности серьезных осложнений не возникает. Однако, при повторной беременности титр антител может достичь высокого уровня и агглютинины, проникая через плаценту, разрушают эритроциты плода, что приводит к его гибели и выкидышу, мертворождению или рождению ребенка с врожденной анемией с тяжелой гемолитической желтухой. Агглютиногены определяют видовые свойства крови и применяются для определения родства людей, т.к. группа крови постоянна и групповые свойства передаются по наследству.
Определение групп крови осуществляется несколькими методами:
стандартных сывороток;
метод цоликлонов (с 1987 года)
Цоликлоны — антитела анти-А и анти-В, полученные от мышей. Т.к. цоликлоны не являются продуктами клеток человека, то исключено заражение препаратов вирусами гепатита и СПИДа. Время наступления реакции агглютинации и ее выраженность выше, чем у сывороток. Если агглютинация с цоликлоном анти-А - значит есть агглютиноген А и соответственно анти-В - есть агглютиноген В. Если агглютинации нет - нет агглютиногенов.
Определение группы крови и Rh фактора необходимо для переливания крови.