Занятие IV-V. Водообмен клетки

Работа 6. Определение водного потенциала клеток по изменению концентрации растворов

Цель работы: определить водный потенциал клеток исследуемых растений (указать каких!)

Материалы и оборудование: (сделать выборку из хода работы).

Ход работы:

1. Смешивая соответствующие количества 1 М раствора сахарозы и диет, воды, приготовить в больших пробирках по 10 мл растворов сахарозы следующих концентраций: 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6 и 0,7 М. Для приготовления растворов использовать бюретки!

2. Тщательно перемешать встряхиванием содержимое пробирок и отобрать пипеткой по 1 мл растворов в маленькие пробирки.

3. Вырезать пробочным сверлом диски из листьев недалеко от средней жилки, не захватывая по возможности крупных жилок. Перемешать диски!

4. Разложить по 5 дисков в маленькие пробирки. Пробирки закрыть пробками! Выдержать диски в растворах 30-40 минут, время от времени встряхивая пробирки и следя за тем, чтобы диски были все время погружены в растворы.

1. По истечении указанного времени вынуть пробы из растворов препаровальной иглой.

2. Определить показатель преломления растворов в больших пробирках рефрактометрически.

5. Определить показатель преломления растворов в маленьких пробирках после удаления проб из растворов.

6. Выразить графически зависимость показателя преломления от концентрации раствора в больших и маленьких пробирках. Сравнивая показатели преломления, растворов (исходных и после пребывания в них дисков), найти раствор, концентрация которого не изменилась при выдерживании в нем растительных проб. В этом случае водный потенциал клетки равен водному (осмотическому) потенциалу раствора (не происходит ни всасывания, ни отнятия воды).

7. Рассчитать (или найти по справочным таблицам) осмотический потенциал раствора, концентрация которого не изменилась после пребывания в нем ткани.

ψ_в.кл. = ψ _в.р-ра = ψ _s.р-ра

8. Объяснить причины изменений концентрации растворов в пробирках с пробами тканей. Чему равен водный потенциал клеток исследуемой растительной ткани?

Таблица 1

Приготовление растворов сахарозы заданной концентрации

№ пробирки	Концентрация раствора, М	Количество исходных растворов, мл
пробирки	раствора, М	1 М сахароза	диет, вода
1	1,0	10	0
2	0,9	9	1
3	0,8	8	2
4	0,7	7	3
5	0,6	6	4
6	0,5	5	5
7	0,4	4	6
8	0,3	3	7
9	0,2	2	8
10	0,1	1	9
11	0	0	10