Качественная и количественная оценка хроматограмм.

Качественная оценка хроматограмм проводится по времени удерживания компонентов. Время удерживания – это время от момента ввода пробы до выхода максимума пика. При постоянных условиях анализа эта величина является постоянной.

Предварительно проводится калибровка прибора с использованием чистых веществ. Определяется время удерживания каждого компонента изучаемой смеси. Несколько соединений в смеси могут иметь близкое время удерживания, однако, каждое соединение имеет только одно определённое время.

Количественная оценка полученных хроматограмм может быть проведена по площадям или по высотам пиков. Площадь каждого пика хроматограммы пропорциональна концентрации соответствующего компонента.

Получают хроматограммы известных количеств известных соединений и строят калибровочный график, на одной из осей которого откладывают величину высоты пиков, а на другой – концентрацию введённого вещества.

Главным в определении степени разделения является разница между временем удерживания двух близко появляющихся компонентов. Математически степень разделения определяют в виде соотношения:

,

где, К – коэффициент разделения; D – разница между временем удерживания двух пиков; В₁ и В₂ – ширина основания двух соответствующих пиков.

В практической работе считается оптимальным, когда величина разделения больше или равна 1.

Чувствительность метода.

Одной из причин широкого распространения метода газовой хроматографии является его высокая чувствительность. Простейшие конструкции детектора по теплопроводности позволяют определять около 0,01% компонента смеси. Пламенно-ионизационный детектор даёт возможность легко определять миллионные доли компонента.

Определение бактериального загрязнения воздушной среды.

В зависимости от принципа улавливания микроорганизмов выделяют следующие методы бактериологического исследования воздуха:

1. Седиментационный

2. Фильтрационный

3. Основанный на принципе ударного действия воздушной струи.

Н

Рисунок 9. – Прибор Кротова

аиболее простым является седиментационный метод, который позволяет уловить самопроизвольно оседающую фракцию микробного аэрозоля. Посев производят на открытые, на больший или меньший срок, горизонтально поставленные чашки Петри с плотной питательной средой. После инкубации подсчитывают количество выросших колоний и определяют количество микроорганизмов в 2 м³ воздуха. Для расчета используют следующее соотношение: в течение 5 минут на мясо-пептонный агар площадью в 100 см² высеваются все микроорганизмы из 10 литров воздуха. Этот метод рекомендуется использовать в настоящее время только для получения сравнительных данных о чистоте воздуха помещений в различное время суток, для оценки эффективности санитарно-гигиенических мероприя­тий (вентиляция, влажная уборка и т.д.).

Фильтрационный метод посева воздуха заключается в просасывании определенного объёма воздуха через жидкую питательную среду. Для посева микроорганизмов используют бактериоуловитель Речменского и прибор ПОВ-1, действие которых основано на сорбции микробов в жидкой питательной среде, распыляющейся в струе исследуемого воздуха.

Одним из наиболее совершенных приборов, в котором используется принцип ударного действия воздушной струи, является прибор Кротова (Рисунок 9), проставляющий собой цилиндрический корпус, в основании которого установлен электромотор с центробежным вентилятором, а в верхней части размещен вращающийся диск. На этот диск устанавливается чашка Петри с питательной средой. Корпус прибора герметически закрывается крышкой с радиально расположенной клиновидной щелью. При работе прибора аспирируемый вентилятором воздух поступает через клиновидную щель и струя его ударяется об агар, в результате чего к нему прилипают частицы микробного аэрозоля. Враще­ние диска с чашкой Петри и клиновидная форма гарантируют равномерное распределение микробов по поверхности агара. Для пересчета величины бактериального загрязнения на 1 м³ воздуха регистрируют скорость просасывания воздуха. Зная время отбора пробы, определяют общее количество аспирированного воздуха.

Методика бактериологического исследования воздуха с помощью прибора Кротова.

1. Подключить прибор к сети.

2. Установить на диск открытую чашку Петри с питательной средой (при определении общей бактериальной обсемененности для посева используют 2% мясо-пептонный агар; при определении стафилококков – желточный агар Чистовича; стрептококков – сахарно-кровяной агар с генциановым синим (среда Гаро).

3. Закрыть прибор с чашкой и включить электромотор.

4. С помощью регулятора установить нужную скорость всасывания воздуха (около 15 л в 1 мин.).

5. Прососав необходимое количество воздуха (для определения общего количества колоний при среднем загрязнении воздуха пропускают около 50 л; при отборе проб для выделения стрептококков и стафилококков на селективных средах объем аспирированного воздуха увеличивается до 250 л и более) прибор отключают. Чашку Петри инкубируют в термостате при 37^ОС в течение 24 ч.

6. Количество выросших колоний пересчитывают на 1 м³.

Воздухообмен в помещении осуществляется за счет естественной и искусственной вентиляции.

Естественная вентиляция осуществляется за счет ветрового и теплового напора наружного воздуха. Она подразделяется на:

1. неорганизованную, неуправляемую (через неплотности в оконных и дверных проёмах);

2. организованную, неуправляемую (через форточки, фрамуги);

3. организованную, управляемую (посредством аэрации).

Искусственная вентиляция, механическая с использованием механического побудителя движения воздуха:

1. вытяжная вентиляция – предназначена для удаления загрязненного воздуха из помещений;

2. приточная – существует для подачи в помещение свежего наружного воздуха;

3. приточно-вытяжная – одновременно обеспечивает поступление наружного воздуха и удаление загрязненного воздуха помещений;

4. кондиционирование – поддерживает заданные физические, химические параметры воздуха помещений.

Гигиеническая оценка естественной вентиляции производится с помощью коэффициента аэрации.

Коэффициент аэрации – отношение площади форточек или фрамуг к площади пола в помещении. Норма для детских, образовательных учреждений 1:50.

Гигиеническая оценка как естественной, так и искусственной вентиляции осуществляется по величине объема и кратности воздухообмена. Различают необходимые и фактические величины объема и кратности воздухообмена.

1. Необходимый объем вентиляции – это количество свежего воздуха, которое надо подать в помещение за час, чтобы содержание СО₂ не превышало допустимый уровень – 0,1%.

Расчет необходимого объема вентиляции производят по формуле:

,

где, L – объём вентиляции, м³/час; К – количество СО₂, выдыхаемое человеком за час (22,6 л – при легкой физической работе, 30 л – тяжелой физической работе); п – число людей в помещении; Р – максимально допустимое содержание С0₂ в помещении (в жилых и общественных помещениях – 1,0 л/м³, что соответствует 0,1%); P1 – содержание СО₂ в атмосферном воздухе (0,4 л/м³, что соответствует 0,04 %).

Количество СО₂, выделяемое детьми различного возраста в течение одного часа:

• дошкольник – 4,0 литра;

• младший школьник – 8-10 литров;

• старший школьник – 10-12 литров.

При физической работе количество выделяемого диоксида углерода увеличивается в 2-3 раза.

Необходимая кратность воздухообмена – это число, показывающее сколько раз в течение часа воздух в помещении должен смениться, чтобы содержание СО₂ не было выше допустимого уровня. Вычисляют необходимую кратность путем деления необходимого объема вентиляции на кубатуру помещения (м³).

2. Фактические величины объема воздухообмена определяют путем умножения площади вентиляционного отверстия в м² (а) на скорость движения воздуха в м/сек (b) и время проветривания в сек (с), кратности – при делении объема воздухообмена на кубатуру помещения (V).

,

где, К – кратность воздухообмена; V – объем помещения, м³.

Скорость движения воздуха в отверстиях вентиляционных каналов определяют с помощью крыльчатого анемометра.