Лабораторные работы для выполнения на практических занятиях

 

Раздел VI. Биохимия крови и печени.

 

Тема 6.3. Небелковые соединения плазмы крови. Кислотно-основное равновесие.

 

٭Количественное определение мочевой кислоты в моче

Принцип метода. Метод основан на способности мочевой кислоты в щелочной среде восстанавливать фосфорновольфрамовый реактив. Количество восстановленного фосфорновольфрамового реактива, окрашенного интенсивный синий цвет, можно определить титрованием раствором K₃[Fe(CN)₆], который при этом окисляется с образованием бесцветного продукта. Количество K₃[Fe(CN)₆], израсходованного на окисление, эквивалентно количеству мочевой кислоты.

Ход определения. 1. В опытную пробирку вносят 2 мл мочи, в стандартную – 2 мл стандартного раствора мочевой кислоты (0,5 мг/мл). Затем в обе пробирки добавляют по 1 мл раствора NaOH и по 1 мл фосфорновольфрамового реактива. Появляется синее окрашивание.

2. Раствор титруют до обесцвечивания раствором K₃[Fe(CN)₆].

3. Рассчитывают концентрацию мочевой кислоты в опытной пробе по стандартной. Пример расчета: на титрование опытной пробы пошло 3 мл раствора K₃[Fe(CN)₆], на титрование стандартной пробы – 2 мл. Содержание мочевой кислоты в стандартном растворе 0,5 мг/мл.

Составляем пропорцию:

1 мг мочевой кислоты - 2 мл K₃[Fe(CN)₆]

Х мг мочевой кислоты - 3 мл K₃[Fe(CN)₆]

Отсюда в 2 мл исследуемой мочи содержится мочевой кислоты

Затем рассчитываем количество мочевой кислоты в суточном количестве мочи (1,5-2 л). В норме в сутки выделяется 0,3 – 1,2 г мочевой кислоты.

Оформление работы. Записывают принцип метода, расчет, делают вывод.

Вопросы к итоговому занятию «биохимия крови».

 

1.           Химический состав сухой части сыворотки крови.

2.           Назовите пять методов разделения белков сыворотки крови. Перечислите электрофоретические (при разделении на бумаге) белковые фракции сыворотки крови (их процентное соотношение).

3.           Характеристика гаптоглобинов (место синтеза, молекулярная масса, концентрация, строение, разновидности, состав, электрофоретическая подвижность, функции).

4.           Характеристика церулоплазмина и С-реактивного белка (место синтеза, концентрация, молекулярная масса, строение, электрофоретическая подвижность, функция, клиническое значение определения).

5.           Характеристика α₂-макроглобулина и α₁-антитрипсина (место синтеза, концентрация, электрофоретическая подвижность, молекулярная масса, функции).

6.           Характеристика альбумина и α-фетопротеина сыворотки крови (место синтеза, концентрация, молекулярная масса, строение, электрофоретическая подвижность, функция, клиническое значение определения).

7.           На какие группы делятся ферменты крови? Назовите четыре основные цели сывороточной энзимодиагностики.

8.           Назовите разновидности гемоглобина плода (различия по строению и функции).

9.           Аномальные гемоглобины (причины возникновения, примеры, последствия возникновения).

10.      Как транспортируется билирубин в крови? Как называются фракции билирубина в крови? Почему?

11.      Напишите уравнение реакции синтеза d-аминолевулиновой кислоты. Назовите фермент, кофермент и принцип регуляции данной реакции.

12.      Строение гема (составные части, формула). Состав

13.      Составьте схему распада гемоглобина до образования прямого билирубина.

14.      Составьте схему распада гемоглобина до образования стерко- и уробилина.

15.      Гемолитическая желтуха (причины возникновения, биохимические показатели крови, мочи, кала).

16.      Обтурационная желтуха (причины возникновения, биохимические показатели крови, мочи, кала).

17.      Паренхиматозная желтуха (причины возникновения, биохимические показатели крови, мочи, кала).

18.      Нарушения кислотно-основного равновесия (по видам, механизму развития, степени компенсации).

19.      Напишите уравнений реакций, иллюстрирующие буферное действие гемоглобина. Газовый ацидоз (причины возникновения, механизм развития, изменение показателей кислотно-основного равновесия, компенсация).

20.      Напишите уравнений реакций взаимодействия белкового буфера с кислыми и основными продуктами.

21.      Метаболический алкалоз (причины возникновения, механизм развития, изменение показателей кислотно-основного равновесия, компенсация).

22.      Напишите уравнение взаимодействия бикарбонатного буфера с кислыми и основными продуктами.

23.      Газовый алкалоз (причины возникновения, механизм развития, компенсация).

24.      Напишите реакции взаимодействия фосфатного буфера с кислыми и основными продуктами.

25.      Метаболический ацидоз (причины возникновения, механизм развития, изменение показателей кислотно-основного равновесия, компенсация).