Ход работы

В ступку помещают 10 г дрожжей, добавляют 10 мл 0.1 н раствора гидроксида натрия, 2 г песка и растирают 5 мин. Затем центрифугируют 15 мин при 3000 об/мин. Соблюдать все правила работы с центрифугой! Фильтруют. К 10 каплям над осадочной жидкости приливают 20 капель ледяной уксусной кислоты и 10 капель раствора перманганата калия так, чтобы розовое окрашивание не исчезало в течении 10 мин. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Через 10 мин удаляют избыток перманганата калия добавлением 4-5 капель раствора перекиси водорода и приливают 0.005 н раствор гидроксида натрия (приблизительно 5 мл) до рН 4.0 – 4.5. При ультрафиолетовом облучении фолиевой кислоты в щелочном растворе в флюороскопе наблюдается голубая флюоресценция.

Работа 11. Разделение смеси водорастворимых витаминов методом тонкослойной хроматографии

Материалы для исследования: раствор смеси витаминов: В₁, В₂, В₅, В₆, С в 50% растворе этанола.

Оборудование: хроматографическая камера, силуфоловые пластинки, капилляры, УФ лампа.

Реактивы: 1) подвижная фаза 1 (бензол – этанол - уксусная кислота - ацетон, 70:20:5:5),2) подвижная фаза 2 (бензол – этанол - уксусная кислота – ацетон, 55:35:5:5)

Ход работы

В угол силуфоловой пластинки на расстоянии 2 см от каждой стороны наносят раствор смеси витаминов. Проводят двухмерную хроматографию. Для первого направления используют подвижную фазу 1, затем подсушивают и проводят разделение в перпендикулярном направлении подвижной фазой 2. Затем пластины высушивают и выявляют пятна в УФ свете. Для выявления витаминов используют значения R_f с подвижной фазой 1: В₁ – 0.00, В₆ – 0.17, В₂ – 0.48, В₅ – 0.53, С – 0.68; с подвижной фазой 2: В₁ – 0.00, В₆ – 0.60, В₂ – 0.16, В₅ – 0.22, С – 0.44.

Работа 12. Количественное определение витамина Р (рутина) в черном и зеленом чае

Количественное определение рутина основано на его способности окисляться перманганатом калия. В качестве индикатора применяется индигокармин, который вступает в реакцию с перманганатом калия, после того как окисляется весь рутин. Экспериментально установлено, что 1 мл 0.05 н. раствора перманганата калия окисляет 3.2 мкг (0.00506 мкмоль) рутина. В черном чае содержится 300-500 мг/кг (474-790 мкмоль/кг) рутина, в зеленом — несколько больше.

Материал для исследования: различные сорта черного и зеленого чая.

Оборудование: весы, разновесы, 4 конические колбы на 50 мл, пинцет, мерный цилиндр, бюретки для титрования.

Реактивы: 1) 0,05 н. раствор KMnO₄, 3) индикатор индигокармин;

Ход работы

К 0,1 г черного и зеленого чая приливают по 50 мл горячей дистил­лированной воды и проводят экстрагирование (перевод одного или нескольких компонентов из твердого пористого тала в жидкую фазу с помощью избирательного растворителя) в течение 5 мин. Отмерива­ют в конические колбочки по 10 мл экстракта, добавляют по 10 мл дистиллированной воды и 10 капель индигокармина. Титруют раствором перманганата калия до появления устойчивой желтой окраски. Расчеты производят по формуле

3,2(0,00506)·а·50·1000

Х = -------------------------------- (мкг(мкмоль)/кг)

10·0,1

где 3,2(0,00506) — количество рутина (мкг, мкмоль), соответствую­щее 1 мл 0,05 н. раствора перманганата калия; а — количество 0,05 н. раствора перманганата калия, израсходованное на титрование, мл; 10 — количество вытяжки, взятое для титрования, мл; 50 — общий объем экстракта, мл; 0,1 — масса сухого вещества, мг; 1000— коэффици­ент пересчета на 1 кг сухого вещества.

Работа 13. Количественное определение витами­на С методом йодометрического титро­вания

Аскорбиновая кислота является сильным восстано­вителем и может быть определена йодометрически при определенном значении рН раствора (например рН = 7). При титровании йодом аскорбиновая кислота окисляет­ся, образуя дегидроаскорбиновую кислоту.

Материал для исследования: капуста, картофель, лимон, яблоко;

Оборудование: 4 конические колбы на 50—100 мл, бюретка для титрования, терка, ступка с пестиком, фильтр, воронка для фильтрования, вата, толченое стекло или песок;

Реактивы: 2% раствор НС1, 0,5% раствор крахмала, 0,003 н. раство­р I₂