
- •Лабораторные работы
- •По курсу
- •Биологическая химия
- •Учебно-методическое пособие
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы.
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Ход работы
- •Приложение Способы выражения содержания растворенного вещества в растворе
- •Правило смешения
Ход работы
Провести качественные реакции на витамины А, С, Е, D, Р, В1, В6, В12.
Опыт 1. Качественные реакции на витамин А.
Реакция на витамин А с концентрированной серной кислотой. В сухую пробирку вносят 1 каплю раствора витамина А и 5 капель раствора хлороформа, перемешивают и добавляют 1 каплю концентрированной серной кислоты. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.
Реакция на витамин А с хлорным железом. В сухую пробирку вносят 1 каплю витамина А и 5 капель раствора хлороформа. Перемешивают, добавляют 3 капли хлорида железа. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.
Опыт 2. Качественные реакции на витамин D.
В сухую пробирку вносят 2 капли витамина D, 10 капель раствора хлороформа и 1—2 капли анилинового реактива, осторожно нагревают при постоянном помешивании. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.
Опыт 3. Качественная реакция на викасол.
К 5 каплям раствора викасола добавляют равное количество раствора цистеина и 1 каплю раствора едкого натра. Отмечают результат реакции.
Опыт 4. Качественные реакции на витамин Е.
Реакция с азотной кислотой. В сухую пробирку вносят 6 капель витамина Е, добавляют несколько крупинок сахарозы. Осторожно по стенке пробирки прибавляют 10 капель концентрированной азотной кислоты. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.
Реакция с хлорным железом. В сухую пробирку вносят 0,5 мл витамина Е, затем 0,5 мл раствора хлорного железа (III) и тщательно перемешивают содержимое пробирки. Отмечают результат реакции.
Опыт 5. Качественные реакции на витамин С.
Реакция с железосинеродистым калием K4[Fe(CN)6]. В две пробирки вносят по 1 капле раствора NaOH и по 1 капле раствора железосинеродистого калия. В одну пробирку добавляют 5 капель раствора витамина С, в другую — столько же воды. Перемешивают, добавляют по 3 капли раствора соляной кислоты и по 1 капле раствора хлорного железа. В пробирке с витамином С образуется осадок берлинской лазури, в контрольной пробирке наблюдается бурое окрашивание, обусловленное образованием железосинеродистой соли окиси железа.
Реакция с метиленовым синим. В две пробирки вносят по 1 капле раствора метиленового синего, по 1 капле раствора соды. В одну из них добавляют несколько капель раствора аскорбиновой кислоты, в другую — 1 мл воды. В пробирке с аскорбиновой кислотой происходит обесцвечивание метиленового синего (при нагревании).
Реакция с раствором Люголя. В две пробирки вносят по 10 капель дистиллированной воды и по 2 капли раствора Люголя. В одну пробирку прибавляют 10 капель дистиллированной воды, в другую -10 капель раствора аскорбиновой кислоты. В пробирке с аскорбиновой кислотой раствор Люголя обесцвечивается в результате восстановления йода до йодистоводородной кислоты.
Опыт 6. Качественные реакции на витамин Р.
Реакция с хлоридом железа. Хлорид железа образует с рутином комплексное соединение, окрашенное в изумрудно-зеленый цвет. К 12 мл насыщенного водного раствора рутина прибавляют несколько капель раствора хлорида железа. Отмечают результат реакции.
Реакция с концентрированной серной кислотой. Концентрированная серная кислота образует с флавонами и флавоноидами оксониевые соли, растворы которых имеют ярко-желтую окраску. На границе двух жидкостей возникает окрашенное в желтый цвет кольцо. К 1 —2 мл насыщенного водного раствора рутина осторожно по стенке пробирки добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.
Реакция с феллинговой жидкостью. При кислотном гидролизе рутина отщепляется молекула рутинозы, которая далее распадается на глюкозу и рамнозу, обладающими восстанавливающими свойствами. К 0,5 г рутина добавляют 5 мл раствора соляной кислоты. Смесь доводят до кипения, кипятят в течение 1 мин, затем отфильтровывают. К полученному фильтрату приливают 3 мл раствора едкого натра и 3 мл феллинговой жидкости, нагревают до кипения. Отмечают результат реакции.
Опыт 7. Качественная реакция на витамин В1.
Диазореакция. В щелочной среде витамин В1 с диазореактивом образует сложное комплексное соединение оранжевого цвета, которое образуется на границе двух жидкостей в виде кольца. К диазореактиву добавляют еще 1—2 капли раствора витамина В1. Затем по стенке, наклонив пробирку, осторожно добавляют 5—7 капель раствора Na2CO3. Отмечают результат реакции.
Опыт 8. Качественная реакция на витамин В2.
Реакция восстановления витамина В2. Окисленная форма витамина В2 представляет собой желтое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на витамин В2 основана на его способности легко восстанавливаться; при этом раствор витамина В2, имеющий желтую окраску, приобретает сначала розовый цвет (за счет образования промежуточных соединений), а затем обесцвечивается (восстановленная форма витамина В2 бесцветна). В пробирку наливают 10 капель раствора витамина В2, добавляют 5 капель концентрированной соляной кислоты и опускают зернышко металлического цинка. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Начинается выделение пузырьков водорода, жидкость постепенно розовеет, затем обесцвечивается. Сравнивают обе формы витамина В2 по флюоресценции, поместив пробирку у флюороскопа.
Опыт 9 . Качественные реакции на витамин В6.
Реакция с хлоридом железа. Витамин В6 при взаимодействии с раствором хлорида железа (III) образует комплексную соль типа фенолята железа красного цвета. К 5 каплям раствора витамина В6 приливают равное количество раствора хлорного железа и перемешивают. Отмечают результат реакции.
Флюоресценция витамина В6. В пробирку вносят 10 капель раствора витамина. Поместив пробирку у флюороскопа, наблюдают голубую флюоресценцию.
Опыт 10. Качественная реакция на витамин В12.
При взаимодействии ионов кобальта с тиомочевиной при нагревании образуется роданид кобальта (II) зеленого цвета. Содержимое одной ампулы витамина В12 переливают в пробирку, добавляют 3 капли концентрированной серной кислоты и производят сжигание до обесцвечивания в вытяжном шкафу! По окончании минерализации осторожно добавляют в пробирку сначала 10 капель воды, затем 10 капель раствора NaOH. Воду и щелочь добавляют осторожно при помешивании. На беззольный фильтр наносят 2—3 капли раствора тиомочевины и высушивают над плиткой. После этого наносят на фильтр 1—2 капли полученного минерализата и снова нагревают над плиткой. На фильтре, чаще по краю пятна, появляется зеленое окрашивание, свидетельствующее о наличии кобальта.
Работа 10. Выделение и обнаружение фолиевой кислоты из дрожжей
Материалы для исследования: прессованные дрожжи
Оборудование: ступка с пестиком, песок, центрифуга, штатив с пробирками, химический стаканчик, стеклянная палочка, лакмусовая бумага, флюороскоп, фильтр, воронка для фильтрования.
Реактивы: 1) 0.1 н и 0.005 н растворы NaOH, 2) ледяная уксусная кислота, 3)0.4% KMnO4, 4) 3% раствор Н2О2