Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Методичка по биохимии(для студ).DOC
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.04.2025
Размер:
475.14 Кб
Скачать

Ход работы

Провести качественные реакции на витамины А, С, Е, D, Р, В1, В6, В12.

Опыт 1. Качественные реакции на витамин А.

Реакция на витамин А с концентрированной серной кислотой. В су­хую пробирку вносят 1 каплю раствора витамина А и 5 капель раствора хлороформа, перемешивают и добавляют 1 каплю концентрирован­ной серной кислоты. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.

Реакция на витамин А с хлорным железом. В сухую пробирку вно­сят 1 каплю витамина А и 5 капель раствора хлороформа. Перемешива­ют, добавляют 3 капли хлорида железа. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.

Опыт 2. Качественные реакции на витамин D.

В сухую пробирку вносят 2 капли витамина D, 10 капель раствора хлорофор­ма и 1—2 капли анилинового реактива, осторожно нагревают при постоянном помешивании. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.

Опыт 3. Качественная реакция на викасол.

К 5 каплям раствора викасола добавляют равное количество рас­твора цистеина и 1 каплю раствора едкого натра. Отмечают результат реакции.

Опыт 4. Качественные реакции на витамин Е.

Реакция с азотной кислотой. В сухую пробирку вносят 6 капель ви­тамина Е, добавляют несколько крупинок сахарозы. Осторожно по стенке пробирки прибавляют 10 капель концентрированной азотной кислоты. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.

Реакция с хлорным железом. В сухую пробирку вносят 0,5 мл ви­тамина Е, затем 0,5 мл раствора хлорного железа (III) и тщательно перемешивают содержимое пробирки. Отмечают результат реакции.

Опыт 5. Качественные реакции на витамин С.

Реакция с железосинеродистым калием K4[Fe(CN)6]. В две пробирки вносят по 1 капле раствора NaOH и по 1 капле раствора железосинеродистого калия. В одну пробирку добавляют 5 капель раствора вита­мина С, в другую — столько же воды. Перемешивают, добавляют по 3 капли раствора соляной кислоты и по 1 капле раствора хлор­ного железа. В пробирке с витамином С образуется осадок берлинской лазури, в контрольной пробирке наблюдается бурое окрашивание, обусловленное образованием железосинеродистой соли окиси железа.

Реакция с метиленовым синим. В две пробирки вносят по 1 кап­ле раствора метиленового синего, по 1 капле раствора соды. В одну из них добавляют несколько капель раствора аскорбино­вой кислоты, в другую — 1 мл воды. В пробирке с аскорбиновой кислотой происходит обесцвечивание метиленового синего (при нагревании).

Реакция с раствором Люголя. В две пробирки вносят по 10 капель дистиллированной воды и по 2 капли раствора Люголя. В одну про­бирку прибавляют 10 капель дистиллированной воды, в другую -10 капель раствора аскорбиновой кислоты. В пробирке с аскорбино­вой кислотой раствор Люголя обесцвечивается в результате восста­новления йода до йодистоводородной кислоты.

Опыт 6. Качественные реакции на витамин Р.

Реакция с хлоридом железа. Хлорид железа образует с рутином комплексное соединение, окрашенное в изумрудно-зеленый цвет. К 12 мл насыщенного водного раствора рутина прибавляют не­сколько капель раствора хлорида железа. Отмечают результат реакции.

Реакция с концентрированной серной кислотой. Концентрирован­ная серная кислота образует с флавонами и флавоноидами оксониевые соли, растворы которых имеют ярко-желтую окраску. На границе двух жидкостей возникает окрашенное в желтый цвет кольцо. К 1 —2 мл насыщенного водного раствора рутина осторожно по стен­ке пробирки добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Отмечают результат реакции.

Реакция с феллинговой жидкостью. При кислотном гидролизе рутина отщепляется молекула рутинозы, которая далее распадает­ся на глюкозу и рамнозу, обладающими восстанавливающими свой­ствами. К 0,5 г рутина добавляют 5 мл раствора соляной кислоты. Смесь доводят до кипения, кипятят в течение 1 мин, затем отфильт­ровывают. К полученному фильтрату приливают 3 мл раствора едкого натра и 3 мл феллинговой жидкости, нагревают до кипения. Отмечают результат реакции.

Опыт 7. Качественная реакция на витамин В1.

Диазореакция. В щелочной среде витамин В1 с диазореактивом обра­зует сложное комплексное соединение оранжевого цвета, которое образуется на границе двух жидкостей в виде кольца. К диазореактиву добавляют еще 1—2 капли раствора витамина В1. Затем по стенке, наклонив пробирку, осторожно добавляют 5—7 капель раствора Na2CO3. Отмечают результат реакции.

Опыт 8. Качественная реакция на витамин В2.

Реакция восстановления витамина В2. Окисленная форма витамина В2 представляет собой желтое флюоресцирующее в ультрафиолетовых лучах вещество. Реакция на витамин В2 основана на его способности легко восстанавливаться; при этом раствор витамина В2, имеющий желтую окраску, приобре­тает сначала розовый цвет (за счет образования промежуточных со­единений), а затем обесцвечивается (восстановленная форма витамина В2 бесцветна). В пробирку наливают 10 капель раствора витамина В2, добавля­ют 5 капель концентрированной соляной кислоты и опускают зер­нышко металлического цинка. Реакцию проводить в вытяжном шкафу! Начинается выделение пузырьков во­дорода, жидкость постепенно розовеет, затем обесцвечивается. Сравнивают обе формы витамина В2 по флюоресценции, поместив пробирку у флюороскопа.

Опыт 9 . Качественные реакции на витамин В6.

Реакция с хлоридом железа. Витамин В6 при взаимодействии с раствором хлорида железа (III) образует комплексную соль типа фено­лята железа красного цвета. К 5 каплям раствора витамина В6 приливают равное количе­ство раствора хлорного железа и перемешивают. Отмечают результат реакции.

Флюоресценция витамина В6. В пробирку вносят 10 капель рас­твора витамина. Поместив пробирку у флюороскопа, наблюдают го­лубую флюоресценцию.

Опыт 10. Качественная реакция на витамин В12.

При взаимодействии ионов кобальта с тиомочевиной при нагре­вании образуется роданид кобальта (II) зеленого цвета. Содержимое одной ампулы витамина В12 переливают в пробир­ку, добавляют 3 капли концентрированной серной кислоты и произ­водят сжигание до обесцвечивания в вытяжном шкафу! По оконча­нии минерализации осторожно добавляют в пробирку сначала 10 ка­пель воды, затем 10 капель раствора NaOH. Воду и щелочь добав­ляют осторожно при помешивании. На беззольный фильтр наносят 2—3 капли раствора тиомочевины и высушивают над плиткой. После этого наносят на фильтр 1—2 капли полученного минерализата и сно­ва нагревают над плиткой. На фильтре, чаще по краю пятна, появля­ется зеленое окрашивание, свидетельствующее о наличии кобальта.

Работа 10. Выделение и обнаружение фолиевой кислоты из дрожжей

Материалы для исследования: прессованные дрожжи

Оборудование: ступка с пестиком, песок, центрифуга, штатив с пробирками, химический стаканчик, стеклянная палочка, лакмусовая бумага, флюороскоп, фильтр, воронка для фильтрования.

Реактивы: 1) 0.1 н и 0.005 н растворы NaOH, 2) ледяная уксусная кислота, 3)0.4% KMnO4, 4) 3% раствор Н2О2