Запитання для контролю знань

1. Які барвники використовують для фарбування бактерій?

2. Яка методика приготування мазка із культури бактерій, вирощених на щільному поживному середовищі?

3. Пояснити суть забарвлення бактерій за методом Грама.

ЛАБОРАТОРНА РОБОТА №3

Методи зафарбовування кислотостійких бактерій

Мета роботи: ознайомитись із призначенням спеціальних методів зафарбовування. Оволодіти навиками зафарбовування препаратів кислотостійких бактерій.

Обладнання і матеріали: культура азотобактера та лейконостока, фуксин Циля, бактеріологічні петлі, предметні скельця, фільтрувальний папір, стерильна дистильована вода, фізіологічний розчин, мікроскопи.

Методичні вказівки

Кислотостійкі бактерії містять у своєму тілі жиро-воскові речовини і звичайними фарбами фарбуються дуже погано. Для їх фарбування використовують концентровані розчини фарб і підігрівання. Сприйнявши ту чи іншу фарбу, вони не знебарвлюються навіть при дії на них міцних розчинів кислот (сірчаної, соляної) та спирту. Цю властивість кислотостійких бактерій використовують для їх ідентифікації.

Із патогенних бактерій кислотостійкими є наступні: туберкульозна паличка, бактерії паратуберкульозного ентериту великої рогатої худоби, а також ряд сапрофітних мікробів, яких знаходять у молоці, маслі та ін. продуктах тваринного походження та в ґрунті.

Основним способом зафарбовування кислотостійких мікробів є метод Циль-Нільсена.

Завдання

1. Приготувати на предметних скельцях мазки із культур, що утворюють капсули.

2. Зафарбувати мазок за методом Циль-Нільсена.

3. Провести мікроскопію отриманого мазка.

4. Замалювати бактерії, що утворюють капсули.

5. Замалювати спороутворюючі бактерії.

Хід виконання роботи

Приготувати і зафіксувати мазок, як вказано в роботі №2. на такий зафіксований мазок накладають смужку фільтрувального паперу і наливають розчин карболового фуксину Циля. Предметне скло із мазком і нанесеною фарбою підігрівають на полум’ї спиртівки до початку випаровування і фарбу залишають на препараті без підігріву ще 2-3 хв. Після цього папірець знімають, фарбу зливають, препарат промивають водою 3-5 с., знебарвлюють 5%-ним розчином сірчаної кислоти, промивають 5 - 10 с. спиртом, а потім водою. Дофарбовують метиленовим синім 1 - 2 хв., промивають водою, підсушують і мікроскопують. Кислотостійкі мікроби зафарбовуються у червоний колір, а фон мазка, в тому числі і кислотостійких мікробів – у синій.

Запитання для контролю знань

1. Які методи фарбування спор бактерій ви знаєте і в чому полягає їх суть?

2. Яка методика фарбування кислотостійких бактерій за Циль-Нільсеном?

3. Чому актуальне виявлення кислотостійких бактерій у жирах тваринного походження?

4. Які ви знаєте кислотостійкі патогенні бактерії?

ЛАБОРАТОРНА РОБОТА №4

Морфологія актиноміцетів, мікроскопічних грибів, дріжджів

Мета роботи: ознайомитись із морфологією грибів та технікою їх мікроскопічного дослідження.

Обладнання і матеріали: культури мікроскопічних грибів (мукор, риз опус, аспергіллус, пеніциліум, молочна пліснява, кладоспоріум та ін.), пробірки із суспензією дріжджів та дріжджі, які вирощені на гіпсових блоках, предметні та покривні скельця, препарувальні голки, суміш етанол:гліцерин = 1:1, мікроскопи.