Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторные по токсикологии.doc
Скачиваний:
2
Добавлен:
01.04.2025
Размер:
4.42 Mб
Скачать

Б. Испытание воды и других жидких субстратов (вытяжка из почвы, осадки, растворы гербицидов и др.)

Вода может использоваться в том виде, в котором она содержится в водоеме или сконцентрирована упариванием (тогда результаты получаются особенно четкими), а сточная вода предприятий может быть разбавлена.

Воду наливают в кювету, в крышке которой просверливают от­верстия чуть меньше испытуемых семян. Крышка должна слегка касаться воды.

В отверстия вставляют проросшие ростки так, чтобы их корни достигали воды, и выращивают до длины 6–10 см. Контролем слу­жит отстоянная и очищенная водопроводная вода (пропущенная через фильтр для очистки питьевой воды).

Если опыты проводят в жаркую погоду, то испытуемую воду разумнее прокипятить во избежание заражения ее микрофлорой, а над ростками соорудить на каркасе неплотное пленочное по­крытие. Это даст возможность оставлять ростки без присмотра на выходные дни. По мере использования ростками воды ее сле­дует доливать. После того, как ростки вырастут, их вынимают из воды, обсушивают фильтровальной бумагой, определяют длину и массу отдельно надземной части и корневой системы. Резуль­таты обрабатывают статистически, выражают в процентах по от­ношению к контролю, принятому за 100 %. Строят диаграммы биотестовых испытаний.

Таким же образом можно испытать растворенные в воде токси­ческие вещества (например, смывы гербицидов с полей вместе с почвой).

1.2 Метод полива проростков тест-растений испытуемой загрязненной водой

Оборудование, материалы:

1) стаканчики;

2) кюветы;

3) фильтровальная бумага;

4) промы­тый и прокаленный песок;

5) проростки тест-растений: пшеницы, овса и др.

В стаканчики загружают одинаковое количество промытого и прокаленного песка, в который высаживают по 10 одинаковых проростков тест-растений. Песок поливают сверху одинаковым ко­личеством испытуемой воды. Повторность – трехкратная. Конт­роль – полив отстоянной и очищенной водопроводной водой.

После достижения ростками высоты 8–10 см их выкапывают, обсушивают фильтровальной бумагой, разделяют бритвой на части (стебель, корни), измеряют и взвешивают. Данные обрабатывают статистически, выражают в процентах к контролю.

1.3 Метод накапывания испытуемой воды (или растворов) между семядолями

Оборудование, материалы:

1) водяная баня;

2) стаканчики;

3) песок или гумусная почва;

4) трубочки для полива;

5) семена двудольных тест-растений: ре­диса, салата и т.п.

Загрязненные природные или сточные воды концентрируют упариванием в 10 раз, хранят в холодильнике. Можно также испы­тать вытяжку из почвы, водные растворы токсических веществ той или иной концентрации (например, солей тяжелых металлов), пес­тицидов и др.

Стаканчики наполняют одинаковым количеством промытого и про­каленного песка или почвы, вставляют стеклянную трубочку до дна, через которую производят полив отстоянной водопроводной водой.

18–20 штук всхожих семян высевают на небольшую глубину. После того, как ростки взойдут и раскроются семядоли в стаканчи­ках оставляют по 10 одинаковых растений, остальные выщипывают пинцетом. Все стаканчики ставят в ящичек из фанеры или картона с бортиками, на 5 см превышающими ростки в стаканчиках.

У микропипеток в 1 мл (можно использовать микропипетки для взятия крови) вытягивают кончик, нагревая его в пламени спиртовки и используя для оттягивания пинцет. Затем затачивают кончик на тонкозернистом брусочке, чтобы образовалось отверстие, дающее небольшую каплю. Накапывают по 1 капле испытуемого вещества между семядолями, прикрывают ящичек пленкой, не сдвигая стаканчики с места. Операцию повторяют 2–3 раза через 1–2 дня (до появления третьего настоящего листа). Контроль – накапывание дистиллированной водой.

Полив субстрата для выращивания производят одинаковым ко­личеством воды через трубочку, используя воронку из фольги.

Через 2–3–4 недели осторожно выкапывают проростки, промы­вают, обсушивают фильтровальной бумагой, измеряют и взвешива­ют отдельно надземную часть и корни. Данные обрабатывают статистически, выражают в процентах к контролю.