- •Содержание
- •Биологическое определение экологических аномалий [2]
- •Лабораторная работа № 1 «Биотестирование токсичности субстрактов по проросткам различных растений-индикаторов»
- •1.1 Выращивание растений на испытуемом субстрате Оборудование и материалы
- •А. Испытание твердых субстратов (почва, измельченный торф)
- •Б. Испытание воды и других жидких субстратов (вытяжка из почвы, осадки, растворы гербицидов и др.)
- •1.2 Метод полива проростков тест-растений испытуемой загрязненной водой
- •1.3 Метод накапывания испытуемой воды (или растворов) между семядолями
- •Лабораторная работа № 2 «Биотестирование растворенных токсических веществ по росту отрезков колеоптилей пшеницы»
- •Ход работы Предварительная работа
- •Практическая работа
- •Лабораторная работа № 3 Биотестирование летучих токсических веществ, воды, вытяжки из почвы, пестицидов по прорастанию семян
- •Методика выполнения работы
- •Лабораторная работа № 4
- •Методика выполнения работы
- •Лабораторная работа № 5 «Качественное определение легко- и средне-растворимых форм химических элементов в почвах городских улиц»
- •Почвы Новороссийска
- •Лабораторная работа № 5 «Качественное определение легко- и средне-растворимых форм химических элементов в почвах городских улиц»
- •Ход работы
- •Характеристика осадка
- •Характеристика осадка
- •Характеристика осадка
- •Лабораторная работа № 6 «Загрязнение пищевых продуктов нитратами и их определение в различных овощных культурах в зависимости от вида, сорта, органа, ткани»
- •Ход работы
- •Приготовление реактивов
- •Список литературы
- •Приложение
Ход работы
За несколько дней до занятия студентам дается задание принести различные овощи, купленные в магазине или с собственного участка. Овощи следует вымыть и обсушить.
В один из пузырьков наливают 10 мл исходного раствора NaNО3, соответствующего по концентрации максимальному содержанию нитратов в овощах (см. табл. 1) – 3000 мг на кг. Следует отметить, что в отдельных органах растений встречаются и значительно большие концентрации.
Готовят серию калибровочных растворов путем разбавления пополам предыдущего (например, к 3 мл исходного раствора прибавляется 3 мл дистиллированной воды, взбалтывается и т. д.) Получают серию растворов с разным содержанием нитратов: 3000 , 1500, 750,375,188, 94, 47, 23 мг/кг.
Под предметное стекло подкладывается лист белой бумаги, на стекло капают две капли изучаемого раствора и две такие же капли дифениламина в трехкратной повторности. Описывают реакцию согласно следующей градации, которую можно использовать как для калибровочных растворов, так и для двух типов анализов (по Церлинг, 1965).
Таблица 2 – Определение содержания нитратов в сельскохозяйственной продукции
Баллы |
Характер окраски |
Содержание нитратов, мг/кг |
6 |
Сок или срез окрашиваются быстро и интенсивно в иссиня-черный цвет. Окраска устойчива и не пропадает |
>3000 |
5 |
Сок или срез окрашиваются в темно-синий цвет. Окраска сохраняется некоторое время |
3000 |
4 |
Сок или срез окрашиваются в синий цвет. Окраска проявляется не сразу |
1000 |
3 |
Окраска светло-синяя, исчезает через 2 – 3 минуты |
500 |
2 |
Окраска быстро исчезает, окрашиваются главным образом проводящие пучки |
250 |
1 |
Следы голубой, быстро исчезающей окраски |
100 |
0 |
Нет ни голубой, ни синей окраски. На целых растениях возможно порозовение |
0 |
Следует отметить, что основой для определения содержания нитратов в соке должны быть собственные исследования, а не вышеприведенная таблица, т. к. окраска может варьировать в зависимости от качества реактивов, срока их годности, температуры в помещении и др.
Овощи и плоды расчленяют на части: зона, примыкающая к плодоножке, кожура, периферийная часть, серединная часть, кочерыжка (у капусты), жилки, лист без жилок. Вырезанные части мелко режут ножом и быстро растирают в ступке, сок отжимают через 2 – 3 слоя марли. 2 капли сока капают на чистое предметное стекло, положенное на белую бумагу, добавляют 2 капли дифениламина. Быстро описывают все наблюдаемые реакции согласно схеме. Повторность опыта 3-кратная. В случае сомнений в содержании нитратов в той или иной части овощной продукции капают рядом калибровочный раствор с известной концентрацией вещества и повторяют реакцию с дифениламином.
Анализ начинают с сока капусты и картофеля, затем помещают эти овощи в термостойкий химический стакан с кипящей дистиллированной водой и кипятят 10–15 мин, после чего анализируют и отварные овощи, и отвар. За время варки делают анализ различных частей других овощей и плодов (не менее четырех видов за занятие). Записывают в общую таблицу на доске и в частную – в тетради.
Схема записи
Содержание нитратов в различных овощах и плодах
Исследуемое растение |
Часть |
Баллы |
Содержание нитратов в мг/кг |
Картофель свежий |
а) под кожурой |
|
|
б) серединная часть |
|
|
|
Картофель отварной |
а) под кожурой |
|
|
б) серединная часть |
|
|
|
Капуста |
а) жилки |
|
|
б) кочерыжка |
|
|
|
в) лист |
|
|
|
Капуста отварная |
а) жилки |
|
|
б) кочерыжка |
|
|
|
в) лист |
|
|
|
Отвар |
|
|
|
|
|
|
|
Б. Определение нитратов в целых растениях
Отрезают у свежих растений части в виде толстых срезов: куски стеблей, черешков, плодов. Кладут их на полоску восковой бумаги. Капают на различные части среза по несколько капель 1 %-ного раствора дифениламина в серной кислоте, отмечают окрашивание согласно вышеприведенной шкалы. При этом в случае малых концентраций нитратов в продукции и при отсутствии синей окраски может наступить порозовение ткани, вследствие ее обугливания от H2SO4 в реактиве дифениламина.
Указанный метод дает возможность оценить и сравнить разные ткани овощных и других растений прямо в поле. Он проверен и хорошо действует на хлебных злаках, картофеле, корнеплодах, овощах, бобовых, многолетних травах для оценки обеспеченности различных сельхозкультур азотом. Показано, что нитраты исчезают в фазе цветения, но их много в период вегетативного роста, который и должен быть использован для оценки. Нитраты сразу утилизируются (не проявляются в анализах) в меристемах, в почках, бутонах и цветках различных сельхозкультур.
В. Определение нитратов методом ионоселективных электродов
На 10 г свежеразмолотых плодов или овощей наливают 50 мл 1 %-ного раствора алюмокалиевых квасцов. Анализ проводят в стаканчиках на 100 мл, взбалтывают 3 – 5 мин. Определяют ионоселективными электродами на нитрат-ион с использованием потенциометра (рН-метра). Калибровку делают по КNО3.
