2. Реакция гемагглютинации (ра).

В лунках планшета готовят 2-х кратно возрастающее разведение материала. Жидкость, в объеме 0,5 миллилитров, добавляя 0.25 миллилитров эритроцитов. Для контроля такую же смесь эритроцитов готовят в изотермическом растворе. Смеси культивируют в инкубаторе при температуре 37 градусов 30-60 мин. Результаты РГА по характеру агглютинации эритроцитов в +.

а). ++++ - эритроциты в виде звездочки в осадке.

б). +++ - осадок эритроцитов с просветом.

в). ++ - осадок эритроцитов с большим просветом.

г). + - хлопьевидный осадок эритроцитов.

д). - - эритроциты в осадке в виде пуговицы.

РГА является группоспецифической, но не дает возможность определить вид вируса. Для этого применяют реакцию торможения гемагглютинации.

3. Реакции торможения гемагглютинации (ртга)

Многие вирусы обладают способностью агглютинировать эритроциты строго определенных млекопитающих и птиц.

Вирусы гриппа и гепатита – эритроциты кур, морских свинок, человека.

Аденовирусы – эритроциты крыс и мышей и т.д.

Для обнаружения вирусов во взятом материале от больного применяют реакцию торможения гемагглютинации, т.е. реакцию противоположного типа (РГА)

РТГА также проводят на пластмассовых планшетах и чаще ее применяют для диагностики ОРВИ и гриппа с разными сыворотками. 4-х кратное нарастание титра подтверждает предполагаемый диагноз.

III. Иммунологические исследования (ифа).

Исследуется иммунологический статус организма.

В лаборатории работают в перчатках, масках, строго соблюдая правила безопасности.

Кровь для иммунологического исследования берётся, так же как и для серологического, но, необходимо сохранить лимфоциты.

Для сохранения лимфоцитов в теплое время года пробирки помещают в лед.

1. Иммуноферментативный анализ.

С помощью ИФА определяют антитела, относящиеся к разным классам (IgM, IgG и т.д.).

Определение различных классов иммуноглобулинов позволяет не только диагностировать болезнь, но и определить период течения инфекционного процесса. IgM появляются через 7-10 дней от начала заболевания, а IgG появляется в более поздние сроки, сохраняется длительно и обуславливают постинфекционный иммунитет.

С помощью ИФА можно различить многих возбудителей и определить характер течения многих инфекционных заболеваний (ВИЧ-инфекция, токсоплазмоз, герпетическая инфекция, микоплазмоз, ОРВИ и других).

ИФА – наиболее перспективных и доступный серологический метод диагностики практически всех инфекционных заболеваний.

С помощью иммунологических исследований определяется иммунологический статус при следующих инфекциях:

ВИЧ – инфекция;

Вирусов ОРВИ;

Вирусные гепатиты;

Описторхоз;

Герпесные инфекции;

Коревая инфекция;

Грибковые заболевания;

Хломедиаз:

Иммунологические исследования очень сложные в своём проведении и дорогостоящие. Чаще применяется реакция иммунноферментивного анализа (РИФА) и иммуноблотинга.

Реакция иммуноблотинга.

Также как и реакция РИФА применяется в основном для диагностики вирусных инфекций в крупных ЛПУ и НИИ.

IV. Аллергические методы исследования.

Аллергические методы лабораторной диагностики основаны на выявлении гиперсенсибилизации организма к определенным токсинам отдельных микроорганизмов при введении в организм небольших доз специфических аллергенов. Аллерген вводится в небольших количествах накожно и внутрикожно и очень редко на слизистую оболочку.

При наличии специфической аллергической реакции через некоторое время в месте введения появляется специфическое аллергическое воспаление в виде гиперемии с инфильтрацией. Реакция считается положительной, если участок воспаления через 24-48 часов более 1 сантиметра в диаметре. Чаще этот метод лабораторной диагностики применяют для диагностики туберкулёза, токсоплазмоза, бруцеллеза, туляремии, орнитоза и сибирской язвы.