Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Л.Д. №1 20.02.12..docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.04.2025
Размер:
419.36 Кб
Скачать

3. Реакции связывания комплемента. (рск).

Сложная двухэтапная реакция. Используют 5 ингредиентов, составляющих 2 системы.

а) антиген, антитело, комплемент

б) эритроциты барана, сенсибилизированные гемолитической сывороткой содержащей специфическое к ним антитело. Общее правило постановки реакции:

Исследуемая сыворотка подогревается на водяной бане до 50 градусов в течение 30 минут для активации собственного комплемента и разводится, начиная с 1:5 и т.д.

Антигеном является культуры бактерий, их токсины, вирусы и вируссодержащие материалы

Комплемент - сыворотка морских свинок (сейчас применяют сухой комплемент)

Гемолитическая система состоим из смешанных в равном объеме гемолитической сыворотки в тройном тигре и 3% взвеси эритроцитов барана по осадку.

Реакцию ставят в пробирке, в объеме 2,5 миллилитров, из каждого ингредиента, добавляя рабочую дозу, содержащую 0,5 мл.

В первую пробирку вносят сыворотку антиген и комплемент (первая система) Во вторую - сыворотку, комплемент и изотонический раствор. Вторая и третья пробирки - контрольные. Пробирки ставят в термостат на I час при температуре 37 градусов. Одновременно готовят гемолитическую систему, смешивая поровну гемолитическую сыворотку в тройном титре и 3% взвесь эритроцитов барана, которые добавляют по I мл во все три пробирки, после извлечения штатива из термостата. Затем их вновь ставят в термостат на 1 час.

Реакцию отмечают в +.

а). - реакция отрицательная, полный, гемолиз эритроцитов, жидкость интенсивно окрашена.

б). + -слабоположительная реакция, жидкость равномерно окрашена, на дне пробирки значительное количество эритроцитов.

в). ++ положительная реакция, жидкость интенсивно окрашена, на дне пробирки незначительное количество эритроцитов.

г). +++ положительная реакция, жидкость интенсивно окрашена, на дне пробирки не большое количество эритроцитов.

д). ++++ резко положительная реакция, жидкость прозрачная, эритроциты повреждены все.

РСК, несмотря на её сложность, очень чувствительная специфическая реакция и широко применяется для диагностики вирусных, микоплазмозных, риккетсиозных инфекций, а также цитомегалии, токсоплазмоза, бруцеллеза, гонореи и сифилиса.

4. Реакция торможения гемагглютинации

Метод основан на способности некоторых вирусов (грипп и др.) вызывать агглютинацию эритроцитов. Сущностью реакции является феномен предотвращения гемагглютинации эритроцитов вирусами под действием иммунной сыворотки.

5. Реакции лизиса (растворения)

Антиген – лизис обладает способностью растворять соответствующие микробные клетки. Лизисы способны на это только в присутствии комплемента.

6. Радиоиммунологический метод (рим).

Метод высокочувствителен, основан на применении меченных радиоактивным йодом антигенов. Чаще используют метод, при котором, меченые антигены адсорбированы на твердом носителе (твердофазовый вариант). Сущность метода заключается в определении количестве связанного антителами сыворотки крови пациента, меченного радиоактивным йодом антигена.

Метод довольно сложен в проведении, требует специального оборудования, подготовленных кадров и чаще применяются для диагностики вирусных гепатитов в крупных центрах и НИИ.