III. Биологические методы

Биологическими методами называют методы заражения лабораторных животных. Воспроизведение заболевания у животных является абсолютным показателем патогенности микроорганизмов. Для исследования биологических свойств паразитов используются только наиболее чувствительные к ним животные (при туберкулёзе - морские свинки, при пневмококковой инфекции и сибирской язве - белые мыши, при стрептококковой инфекции - кролики и т.д.).

Метод заражения лабораторных животных чаще применяется при вирусных инфекциях. Место введения биологического материала выбирают с учётом тропизма (сродства) исследуемого вируса к определённым тканям животного и человека (нейротропные - вводят в мозг, пневмотропные - в трахею и т.д.)

После заражения животных размножение паразитов в них устанавливают:

1. По клинической картине;

2. По патофизиологическому изменению в организме животного;

3. По нахождению микроорганизмов в организме животного;.

4. По нахождению антител в сыворотки крови животного:

В некоторых случаях лабораторных животных используют для выделения чистой культуры возбудителей, при введении сильно загрязненного материала, различными патогенными микроорганизмами. После смерти животного из его организма выделяют чистую культуру. С помощью лабораторных животных можно также определить вирулентность выделенного патогенного штамма микроорганизмов.

Косвенные методы лабораторной диагностики.

I. Выявления специфических антител, с помощью известных диагностических антигенов.

II. Выявления антигенов возбудителей с помощью диагностических сывороток содержащих известные антитела.

III. Выявление иммунологического статуса.

IV. Аллергические методы диагностики.

С помощью известных диагностических антител или антигенов можно найти возбудителей болезней, в любом биологическом материале.

Серологическими называют такие методы (реакции) для которых используется сыворотка крови больного содержащая антитела или токсины микроорганизмов и специальные диагностики, в которых содержатся токсины известных микроорганизмов или уже известные иммуноглобулины.

Впервые серологические методы лабораторной диагностики были предложены в 1886 году французом Видалем для диагностики брюшного тифа.(РА). Реакция была основана на обнаружении специфических О и Н антител в сыворотке крови больного брюшным тифом.

В настоящий момент применяют более чувствительные методы серологического исследования, позволяющие обнаружить в крови антител в 10 раз меньше содержания. Эти реакции дают положительный результат в 82%.

При длительно текущих болезнях для более достоверного получения данных применяют метод «парных сывороток», то есть одну и ту же реакцию проводят дважды и сравнивают полученные результаты.

Важнейшее место в диагностике занимает иммуннофлюоресцентный метод. Этот метод позволяет выявить возбудителя в исследуемом материале без выделения его в питательной культуре.

Окончательный диагноз ставится только на основании бактериологических и серологических исследований.

Общие закономерности серологических реакций:

1. Реакции ставят вне организма человека

2.Реакции проявляются при иммунологическом соответствии

антигена и антитело в соответствующих оптимальных условиях температуры и кислотности среды

Иммунные диагностические сыворотки получают от крупных животных, путем многократного заражения или введения токсинов.

К диагностическим сывороткам относятся:

1. Агглютинирующие бактерии;

2. Прецепитирующие бактерии;

3. Гемолизирующие бактерии;

4. Антивирусные сыворотки;

5. Антитоксические сыворотки;

6. Люминесцентные сыворотки;

7. Флюорохромные сыворотки;

К диагностическим антигенам относятся взвеси живых и убитых микроорганизмов и их токсины.