2. Тесты для оценки иммунного статуса.

Современные методы определения иммунного статуса организма человека включает ряд тестов для дифференцированной оценки Т- и В- систем иммунитета. Оценка клеточного иммунитета (Т-системы) проводится путем определения:1) количества Т-лимфоцитов в крови методом спонтанного розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана (Е-розетки); 2) функциональной активности Т-лимфоцитов в реакии бласттрансформации лимфоцитов in vitro под влиянием митогенов или антигена либо по уровню продукции лимфоцитами гуморальных медиаторов клеточного иммунитета в тестах подавления миграции макрофагов, а также при постановке кожных проб гиперчувствительности замедленного типа для оценки возможной предварительной сенсебилизации организма к данному антигену( аллергену). Оценка гуморального иммунитета (В-системы) проводится путем определения количества В-лимфоцитов в крови реакцией иммунофлюоресценции с антисывороткой против иммуноглобулинов человека путем выявления на В-лимфоцитах рецепторов для комплемента – с помощью теста розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами, несущими на себе комплекс: антиэритроцитарные антитела+комплемент. Функциональная активность В-лимфоцитов оценивается косвенно по уровням сывороточных иммуноглобулинов различных классов:А,G, М.

3. Радиоиммунный анализ.

Высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген-антитело с применением антигенов или антител, меченых радионуклидом. После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике( бета- или гамма-излучение):интенсивность излучения прямопропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител. При твердофазном варианте РИА один из компонентов реакции (антиген или антитела) сорбирован на твердом носителе. Другой вариант метода – конкурентный РИА: искомый антиген и меченый радионуклидом антиген конкурируют друг с другом за связывание ограниченного количества антител иммунной сыворотки. Этот вариант используют для определения количества антигена в исследуемом материале. РИА применяют для выявления антигенов микробов, определения гормонов, ферментов, лекарственных веществ и иммуноглобулинов.

4. Лабораторная диагностика бактерионосительства при брюшном тифе.

Для выявления бактерионосительства при брюшном тифе проводят исследование желчи и испражнений. Косвенным указанием на бактерионосительство может служить также обнаружение Vi-антител и более длительное сохранение их повышенного титра. Для выявления бактерионосительства широко используют реакцию пассивной Vi-гемагглютинации, с помощью которой определяют Vi-антитела в сыворотке крови людей. В качестве антигена используют эритроцитарный Vi-диагностикум, который представляет собой взвесь эритроцитов человека первой группы, обработанных формалином и сенсебилизированных Vi-антигеном брюшнотифозных микробов. Испытуемую сыворотку разводят от 1:10 до 1:1280. при положительной оеакции эритроциты покрывают дно пробирки в виде диска с зазубренными краями, а надосадочная жидкость остается прозрачной. При отрицательной реакции, также как и контроле, эритроциты осаждаются на дне пробирки и имеют вид диска с ровными краями («пуговки»). Диагностическое значение имеет титр пассивной Vi-гемагглютинации, начиная с 1:40 и выше. Всех лиц, сыворотки которых дают положительный результат в РПГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом, рассматривают как подозрительных на носительство брюшнотифозных бактерий и подвергают многократному бактериологическому обследованию.