
Билет №1
1.Заслуги Л.Пастера, Р.Коха, И.Мечникова, Д. Ивановского и др. в развитии микробиологии.
Луи Пастер открыл природу брожения, анаэробиоз; опроверг теорию самозарождения; обосновал принцип стерилизации; разработал принцип вакцинации и способы получения вакцин.
Роберт Кох предложил окраску бактерий, микрофотосъемку, способ получения чистых культур, триаду Генле-Коха.
Мечников обосновал учение о фагоцитозе и фагоцитах. Родоначальник геронтологии и учение о дисбактериозах.
Ивановский впервые открыл вирусы и стал основоположником вирусологии.
Тимаков-труды по L-формам бактерий.
Выгодчиков-крупный ученый в области стафилококковых инфекций.
2. Характеристика классов иммуноглобулинов.
Процентное содержание:
Jg G 80 % Основные функции:
Jg A 12 % Jg G-вторичный иммунный ответ
Jg M 8 % Jg A-JgAS местный иммунитет слизистых оболочек
Jg D 0,3 % Jg M-первичный иммунный ответ
Jg Е 0,003 % Jg D-Ag-распознающий рецептор зрелых B-лимфоцитов
Jg Е-анафилаксия
Jg G
Молекулярная масса-150 000
Коэффициент седиментации-7 S
Проходит через плаценту
Скорость синтеза 33,0 мг/кг за 1 день
Период полураспада-23 дня
Термоустойчив
Нейтрализует токсин
Вызывает агглютинацию, бактериолиз, опсонизацию
Фиксирует и активирует комплемент по классическому пути
Jg A
Молекулярная масса-160 000
Коэффициент седиментации 7-14 S
Не проходит через плаценту
Сывороточный и секреторный
Скорость синтеза-24 мг/кг за 1 день
Период полураспада-5,8 дней
Термоустойчив
Фиксирует и активирует комплемент по альтернативному пути
Jg M
Молекулярная масса-950 000
Коэффициент седиментации-19 S
Не проходят через плаценту
Первыми синтезируются в организме
Скорость синтеза-6,7 мг/кг за 1 день
Период полураспада-5,1 дней
Термоустойчив
Нейтрализует токсины
Вызывает агглютинацию, бактериолиз, опсонизацию
Фиксируют и активируют комплемент по классическому пути
Основной рецептор для АГ на поверхности зрелых B-клеток
Jg D
Молекулярная масса-175 000
Коэффициент седиментации-7 S
Не проходит через плаценту
Скорость синтеза-0,4 мг/кг за 1 день
Период полураспада-2,8 дня
Активирует комплемент по альтернативному пути
Основной рецептор для АГ на поверхности зрелых B-клеток
Jg Е
Молекулярная масса-190 000
Коэффициент седиментации-8 S
Не проходит через плаценту
Скорость синтеза-0,016 мг/кг за 1 день
Период полураспада-2,5 дней
Обладает высокой цитофильностью
Участвует в развитии ГНТ
3. РА на стекле.
Ставят, если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного. Применяют диагностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т.е. проводят серотипирование возбудителя. Проводят на предметном стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора NaCl. При появлении в капле с сывороткой и микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую РА в пробирках.
4. Лабораторная диагностика стафилококкового сепсиса.
Включает бактериологический и серологический методы.
Бактериологический-исследуемый материал сеют на ЖСА, кровь предварительно засевают в сахарный бульон. У культуры, выросшей на ЖСА, определяют наличие пигмента, лецитовителазы, морфологию клеток, наличие каталазы, наличие плазмокоагулазы и ДНКазы. У штаммов S. aureus, выделенных при пищевой стафилококковой интоксикации, определяют наличие энтеротоксинов в биологических и иммунологических тестах.
Серологический-применяют в случаях хронической инфекции. Определяют титр анти-α-токсина в сыворотке крови больных реакций торможения гемолиза.
5. Таксономическое положение и характеристика респираторных вирусов.
ОРВИ:
C. Paramyxoviridae
П/с Paramyxoviridae
Р. Respirovirus (ВПГЧ-1,-3)
Р. Rubulavirus (ВГПЧ-2,-4а,-4в)
П/с Pneumoviridae
Р. Pneumovirus (RS-вирус)
Крупные оболоченные вирусы, спиральный тип симметрии, нуклеокапсид закручен в спираль, однонитевая несегментированная минус РНК, репликация целиком осуществляется в цитоплазме, могут формировать цитоплазматические включения. Для пневмовируса характерно образование синцития, 2 серотипа, гликопротеины G и F.
С. Coronaviridae
P. Coronavirus (более 10 видов)
Сложноорганизованные размером 100-150 нм, спиральный тип симметрии, практически не культивируются, 4 серогруппы, однонитевая несегментированная плюс РНК, гликопротеины Е2-пепломер и Е1-трансмембранный.
С. Reoviridae
P. Orthoreovirus (3 серотипа)
С. Picornoviridae
P. Rhinovirus (2 вида, 100 сероваров)
Р. Enterovirus (вирусы Коксаки, ЕСНО)
Безоболочечные вирусы, содержат однонитевую плюс РНК, мелкие просто организованные вирусы. Диаметр вируса 30 нм, вирион состоит из икосаэдрического капсида, окружающего инфекционную однонитевую плюс РНК с протеином VPg.
С. Adenoviridae
P. Mastadenovirus (80 видов)
Простые ДНК-овые вирионы, 252 капсомера, от 12 вершин икосаэдра-фибры (нити). Внешняя оболочка отсутствует.
Билет №2
1. Значение медицинской микробиологии в практической деятельности врача-педиатра.
Педиатры должны быть хорошо подготовлены по проблемам иммунологии репродукции, т.к. многие и тяжелые болезни возникают в результате иммунологического конфликта между матерью и плодом на всех этапах репродукции.
2. Понятие об антигенах и гаптенах, их свойства.
Антиген-биополимер органической природы, генетически чужеродный для макроорганизма, который при попадании в макроорганизм распознается его иммунной системой и вызывает иммунные реакции, направленные на его устранение.
Св-ва антигенов:
Антигенность
Специфичность
Иммуногенность
Гаптены-низкомолекулярные вещества, не обладающие антигенными свойствами и приобретающие их в соединении с белками.
3. Применение реакции флоккуляции.
Появление опалесценции или хлопьевидной массы в пробирке при реакции токсин-антитоксин или анатоксин-антитоксин.
Применяют для определения активности антитоксической сыворотки или анатоксина.
4. Таксономическое положение и характеристика патогенных стафилококков.
Неподвижные Гр+ кокки. Характерно расположение микробных клеток «виноградными гроздьями» в чистой культуре. Являются факультативными анаэробами, не образуют спор или капсул. Некоторые стафилококки синтезируют характерные пигменты. Широко распространены в почве, воздухе, представители нормальной микрофлоры человека и животных. Патогенные стафилококки продуцируют эндо- и экзотоксины, ферменты, нарушающие жизнедеятельность клеток. Известна достаточно высокая чувствительность стафилококков к водным растворам солей серебра и его электролитическим растворам.
St. aureus
St. epidermidis
St. saprophyticus
St. haemolyticus
5. Лабораторная диагностика кори.
Исследуют смыв с носоглотки, соскобы с элементов сыпи, кровь, мочу. Вирус кори можно обнаружить в патологическом материале и в заражённых культурах клеток с помощью РИФ, РТГА и реакции нейтрализации. Характерно наличие многоядерных клеток и антигенов возбудителя в них. Для серологической диагностики применяют РСК, РТГА и реакцию нейтрализации.
Билет №3.
1. Значение работ Р. Коха в развитии микробиологии.
Предложил окраску бактерий, микрофотосъемку, способ получения чистых культур, триаду Генле-Коха. В 1900 году открыл ГЗТ.
2. Типы аллергических реакций по Джеллу и Кумбсу.
Реакции 1-го типа (анафилактические)
Анафилаксия может проявляться в виде местной (на коже и слизистых) или системной (анафилактический шок) реакции. Анафилактическая реакция может протекать в любом органе. Чаще у человека поражаются артериолы и бронхи. К анафилактическим реакциям человека, которые вызываются JgE, относятся приступы бронхиальной астмы, сенная лихорадка, крапивница, реакции на укусы ос и пчел.
Реакции 2-го типа (гуморальные цитотоксические)
Опосредованы антителами к поверхностным антигенам клетки или к вторично связанным с клеточной поверхностью антигенам. Наибольшее значение для клиники имеют те гуморальные цитотоксические реакции, которые затрагивают эритроциты.
Реакции 3-го типа (иммунокомплексные)
Опосредованы иммунными комплексами, которые образуются при преципитации в небольшом избытке антигена. Относится реакция Артюса, аллергический альвеолит.
Реакции 4-го типа (опосредованные Т-лимфоцитами)
Часто контактную аллергию вызывают синтетические моющие средства, соединения хрома, никеля, ртути, многие консерванты и медикаменты.
3. Получение и титрование агглютинирующих сывороток.
Агглютинирующие сыворотки содержат антитела-агглютинины, используются в реакциях агглютинации с целью сероидентификации возбудителя. Готовят сыворотки из крови кроликов, баранов, ослов, лошадей, иммунизируя их корпускулярными антигенами. Наиболее свободными от неспецифических антител являются сыворотки кроликов. Лучшие результаты получаются при применении для иммунизации взвесей из живых или убитых микробов. Иммунизацию проводят путем введения антигена в краевую ушную вену кролика, начиная с 500 млн микробных тел в 1 мл и увеличивая дозу вдвое при последующих введениях. Для получения полноценных сывороток обычно бывает достаточно 3-4 инъекций с интервалами в 5 дней. На 5-7 день после 3-й иммунизации берется проба крови и проверяется титр сыворотки. Титром агглютинирующей сыворотки считается наибольшее ее разведение, способное вызвать видимую агглютинацию (склеивание) бактерий.
4. Лабораторная диагностика стрептококкового сепсиса.
Включает бактериологический и серологический методы. Бактериологический: для выделения чистой культуры материал, взятый тампоном, погружают в полужидкий агар на дно пробирки, содержащей каплю крови барана. После инкубации в течение 3-4 ч при 37 ˚С производят высев на кровяной агар. Изучают культуральные свойства, микроскопируют мазки из колоний, окрашенных по Граму. Посевы производят на сахарный бульон, бульон с повышенной концентрацией NaCl, желчный бульон и др. Определяют температурные границы роста (10-45 ˚С), изучают б/х активность, определяют серогруппы и серовар, определяют антибиотикограмму. Учет результатов.
Серологический метод: опредкляют наличие в крови стрептококкового АГ в РСК и специфических стрептококковых антител к токсинам (стрептолизину О или стрептодорназе). Антистрептолизин О определяют в реакции нейтрализации. Серологическое исследование позволяет выявить носителей.
5. Таксономическое положение и характеристика вируса клещевого энцефалита.
Семейство Flaviviridae, род Flavivirus
Имеет пять генотипов, обладает четкой антигенной консервативностью. В организме переносчиков сохраняет свою жизнедеятельность от -150 ˚С до +30 ˚С. Проявляет высокую резистентность к действию кислых значений pH, что важно при алиментарном пути заражения. Вирус обладает висцеротропностью и нейротропностью. К вирусу чувствительны белые мыши, обезьяны, бараны. После перенесенного заболевания остается стойкий иммунитет.
Билет №4.
1. Методы исследования морфологии бактерий.
Микроскопический метод-световой, фазово-контрастный, флюоресцентный, электронный
Культуральный метод-бактериологический, вирусологический
Биологический-заражение лабораторных животных
Молекулярно-гентический метод-ПЦР-полимеразная цепная рекция
Серологический метод-выявление антигенов микроорганизмов или антител к ним
Специальными методами являются методы окраски по Граму и Цилю-Нильсену.
2. Структура Jg.
Домен-свернутый в глобулу участок полипептидной цепи. Примерно 110 а/к остатков, стабилизирован внутренней дисульфидной связью, домены соединены друг с другом линейными фрагментами.
Паратоп-имеет антигенсвязывающий центр и активный центр.
3. Непрямой метод Кунса.
Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген-антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела, выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб+антимикробные кроличьи антитела+антикроличьи антитела, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном микроскопе.
4. Таксономическое положение и характеристика стрептококков.
Семейство Streptococcaceae, род Streptococcus.
Сферические или овоидные клетки размером 0,5-2,0 мкм; в мазках располагаются парами или короткими цепочками, неподвижны, спор не образуют, Гр+, некоторые виды имеют капсулу. Способны образовывать L-формы. Клеточная стенка состоит из трех слоев. Являются факультативными анаэробами. Растут на сложных питательных средах с добавлением крови, сыворотки, углеводов. Растут в интервале температур 25-45 ˚С, оптимум 37 ˚С. Антигенная структура сложная. Факторы патогенности: микрокапсула, компоненты клеточной стенки, ферменты агрессии и токсины. Являются представителями нормофлоры организма человека и животных.
5. Лабораторная диагностика герпетической инфекции.
Используют содержимое герпетических везикул, слюну, соскобы с роговой оболочки глаз, кровь, спинномозговую жидкость и мозг при летальном исходе. В окрашенных мазках наблюдают гигантские многоядерные клетки (синцитий), клетки с увеличенной цитоплазмой и внутриядерными включениями Каудри.
Для выделения вируса исследуемым материалом заражают человеческие эмбриональные фибробласты. Рост в культуре клеток идет быстро, и через 24 часа становится видимым ЦПЭ. Проявляется округлением клеток с последующим прогрессирующим поражением всей культуры клеток. Выделенный вирус идентифицируют в РИФ и ИФА с использованием моноклональных антител.
Серодиагностику проводят с помощью РСК, РИФ, ИФА и реакции нейтрализации по нарастанию титра антител больного. При экспресс-диагностике в мазках-отпечатках из высыпаний, окрашенных по Романовскому-Гимзе, выявляются гигантские многоядерные клетки с внутриядерными включениями. Для идентификации вируса используют также амплификацию генов вирусной ДНК в реакции ПЦР.
Билет №5.
1. Структура и функции клеточной стенки у Firmicutes.
Firmicutes-эубактерии с толстой клеточной стенкой, Гр+.
В клеточной стенке содержится небольшое количество полисахаридов, липидов, белков. Основным компонентом клеточной стенки является многослойный пептидогликан (40-90 % массы клеточной стенки). С пептидогликаном бактерий связаны тейхоевые кислоты. Форму и прочность бактериям придает жесткая волокнистая структура многослойного пептидогликана. Способность Гр+ бактерий при окраске по Граму удерживать генциановый фиолетовый в комплексе с йодом связана со свойством многослойного пептидогликана взаимодействовать с красителем. Последующая обработка мазка бактерий спиртом вызывает суживание пор в пептидогликане и тем самым задерживает краситель в клеточной стенке.
2. Механизм анафилактического шока.
Антиген + Jg E
↓
Клетки-мишени 1-го порядка (тучные клетки, базофил, лимфоцит, тромбоцит)
↓
Выброс медиаторов
↓
Клетки-мишени 2-го порядка
(гладкие мышцы сосудов, бронхов, миокард, миометрий, экзокринные железы)
↓
1.Местные проявления
(отек, крапивница, гиперемия, некроз, гиперсаливация)
2.Системные проявления
(шок, бронхоспазм, ДВС-синдром, активация миометрия кишечника)
3. Цели и техника постановки развернутой реакции агглютинации.
Ставят для определения у больного антител.
К разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов) и через несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т.е. образовался осадок.
Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диагностикумов (О- и Н- антигенов) со специфическими антителами. Реакция агглютинации с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие термолабильный жгутиковый Н-антиген)-крупнохлопчатая и протекает быстрее.
4. Таксономическое положение и характеристика возбудителей газовой гангрены.
Относятся к роду Clostridium.
Clostridium perfringens
Крупные, Гр+, неподвижные клетки. Короткие палочки с обрубленными под прямым углом концами. Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. В организме образуют капсулы. Споры крупные, овальные, расположены центрально. Клетка практически не деформируется. На плотных питательных средах С. Perfringens типа А образует S- и R- колонии. Имеет 6 сероваров (A, B, C, D, E, F). Расщепляет с образованием кислоты и газа глюкозу, ксилозу, галактозу, сахарозу, мальтозу, лактозу, крахмал, гликоген.
Clostridium novyi
Крупные или слегка изогнутые подвижные Гр+ палочки, перитрихи, имеют 20-25 жгутиков. Обладают выраженным полиморфизмом, некоторые штаммы образуют короткие цепочки или нити. Споры овальные, расположены субтерминально. Являются облигатными анаэробами. Вырабатывают 8 токсинов, определяющих патогенность. Устойчивы к нагреванию, выживают при кипячении в течение 1-2 ч.
Clostridium histolyticum
Гр+ палочка, в мазках часто образует пары или цепочки. Очень подвижна в молодых культурах. Строгий анаэроб. В аэробных условиях растет плохо и не образует спор. В анаэробных условиях на КА образует прозрачные выпуклые колонии, окруженные тонкой зоной гемолиза. Экологическая ниша-почва.
Clostridium septicum
Полиморфные подвижные палочки, в тканях способны образовывать нити длиной до 500 мкм. В культурах клетки могут быть яйцевидные, веретеновидные, образуют цепочки.
При контакте с кислородом теряют подвижность. Через 24 ч культивирования образуют субтерминальные споры. Строгие анаэробы, растут при давлении 8-15 мм рт. ст. Ферментируют некоторые углеводы, не разлагают сахарозу. Экологическая ниша-почва.
5. Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции.
Вирусологические и серологические исследования включают методы определения антигенов и антител ВИЧ. Для этого используют ИФА, ИБ, ПЦР.
ВИЧ-антитела появляются через 2-4 недели после инфицирования и определяются на всех стадиях ВИЧ-инфекции и при СПИДе. Для определения ВИЧ-антител разработано множество тест-систем. Используют ПЦР, способную выявлять ВИЧ-инфекцию в инкубационном и раннем клиническом периоде. Клинический и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими исследованиями, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.
Билет №6.
1. Структура и функции цитоплазматической мембраны.
Состоит из бислоя липидов в комплексе с белками. Липиды: фосфолипиды, холестерин, липопротеины, гликолипиды.
Каждая молекула фосфолипида имеет полярную гидрофильную головку и неполярный гидрофобный хвост. При этом молекулы ориентированы так, что головки обращены кнаружи и внутрь клетки, а неполярные хвосты-внутрь самой мембраны. Этим достигается избирательная проницаемость для веществ, поступающих в клетку.
Выделяют периферические белки (они расположены только по внутренней или наружной поверхности мембраны), интегральные (они прочно встроены в мембрану, погружены в нее, способны менять свое положение в зависимости от состояния клетки).
Функции:
-барьерная (отграничение внутреннего содержимого клетки)
-структурная
-защитная
-регуляторная
-адгезивная
-рецепторная
-электрогенная (изменение электрического потенциала поверхности клеток за счет перераспределения ионов К и Na)
2. Типы В-зависимых аллергических реакций.
А-глобулиновые реакции, вызываемые секреторным глобулином А (аллергические риниты, бронхиты)
G-глобулиновые реакции (феномен Артюса, сывороточная болезнь, анафилактический шок у кролика, цитотоксические реакции)
E-глобулиновые реакции (анафилаксия у человека, морской свинки, мышей)
М-глобулиновые реакции
3. Характеристика ингредиентов РСК.
Исследуемая сыворотка-перед постановкой реакции прогревается на водяной бане 30 минут для инактивации ее собственного комплемента и разводится, начиная с 1:5.
Антиген-могут быть культуры бактерий, вирусы и вирус-содержащие материалы, тканевые липиды.
Комплемент-сыворотка морских свинок, полученная в день опыта. В настоящее время используется производственный сухой комплемент.
Гемолитическая система-состоит из смешанных в равных объемах гемолитической сыворотки и 3 % взвеси эритроцитов барана по осадку. Для сенсибилизации эритроцитов гемолизинами, смесь выдерживают в термостате при 37 ˚С в течение 30 минут.
4. Лабораторная диагностика аспорогенной анаэробной инфекции.
Печальный вопрос, его я не знаю…
5. Таксономическое положение и характеристика ВИЧ.
Семейство Retroviridae, род Lentivirus.
РНК-содержащий вирус, вирусная частица сферической формы, оболочка вируса состоит из двойного слоя липидов. Сердцевина вируса имеет конусовидную форму. Жизненный цикл ВИЧ состоит из 4 стадий (1-адсорбция и проникновение вируса путем эндоцитоза в клетку; 2-высвобождение вирусной РНК, синтез ДНК-провируса и интеграция провируса с геномом клетки хозяина; 3-синтез РНК вируса, трансляция и формирование вирусных белков; 4-сборка, созревание и высвобождение путем почкования вновь образованных вирионов).
Культивируются на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека с присутствием ИЛ-2.
Билет №7.
1. Структура и функции клеточной стенки у Gracillicutes.
Gracillicutes-эубактерии с тонкой клеточной стенкой, Гр-
В состав клеточной стенки входит наружная мембрана, связанная посредством липопротеина с подлежащим слоем пептидогликана. Наружная мембрана при электронной микроскопии ультратонких срезов бактерий имеет вид волнообразной трехслойной структуры, сходной с внутренней мембраной, которую называют цитоплазматической. Основным компонентом этих мембран является бимолекулярный (двойной) слой липидов.
2. Понятие об иммунологической толерантности.
Явление, противоположное иммунному ответу и иммунологической памяти. Проявляется она отсутствием специфического продуктивного иммунного ответа организма на антиген в связи с неспособностью его распознавания. Иммунологическую толерантность вызывают толерогены. Иммунологическая толерантность направлена к строго определенным антигенам.
3. Ингредиенты гемолитической системы в РСК, назначение.
Гемолитическая система состоит из смешанных в равных объемах гемолитической сыворотки и 3 % взвеси эритроцитов барана. Для сенсибилизации эритроцитов гемолизинами смесь выдерживают в термостате при 37 ˚С в течение 30 минут.
4. Таксономическое положение и характеристика Clostridium tetani, специфическое лечение и профилактика столбняка.
Семейство Clostridium
Род Clostridium tetani
Гр+ палочки с закругленными концами, располагаются одиночно или цепочками, подвижны (20 и более жгутиков). Споры круглые, реже овальные, расположены терминально. Являются облигатными анаэробами, высокая чувствительность к кислороду. Низкая б/х активность. Способны продуцировать тетаноспазмин и тетанолизин.
Лечение: направлено на нейтрализацию столбнячного токсина антитоксином. Применяют противостолбнячную лошадиную сыворотку в дозе 50-100 тыс. МЕ или донорский противостолбнячный иммуноглобулин в дозе 900 МЕ.
Профилактика: при травмах обязательна хирургическая обработка раны. Для специфической профилактики проводится плановая или экстренная иммунизация. Первичную вакцинацию проводят детям в 3-месячном возрасте (курс включает 3 инъекции АКДС с интервалом 20-40 суток. Экстренная профилактика проводится при травмах, ожогах и обморожениях, укусах животных путем введения ранее привитым одного столбнячного анатоксина (0,5 мл). Непривитым вводят 1 мл столбнячного анатоксина и 250 МЕ донорского иммуноглобулина.
5. Серодиагностика гриппа.
Диагноз ставят при четырехкратном увеличении титра антител в парных сыворотках от больного, полученных с интервалом в 10-14 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА, РБН вирусов.
Метод часто используют для ретроспективной диагностики.
Билет №8.
1. Плазмиды бактериальной клетки.
Плазмиды-это двуцепочечные ДНК-молекулы, которые существуют в клетках независимо от генома.
Иногда плазмиды могут встраиваться в состав генома клетки-хозяина. Такие плазмиды называются эписомами. Плазмиды могут быть линейными или кольцевыми, но чаще встречаются кольцевые. ДНК-плазмида может кодировать от 2-3 до 90 генов. Транскрипция и трансляция генетического материала плазмид осуществляется молекулярным аппаратом клетки-хозяина. Плазмиды передаются от клетки к клетке в ходе клеточного деления и при конъюгации.
2. Цитотоксические аллергические реакции (II тип).
Опосредованы антителами к поверхностным антигенам клетки или к вторично связанным с клеточной поверхностью антигенам. Решающую роль в этом случае играют антитела, способные активировать комплемент JgG1-3, JgM.
3. Титрование комплемента для РСК.
Титрование начинают с приготовления гемолитической системы, которая состоит из равных объемов 3% взвеси отмытых эритроцитов барана и гемолитической сыворотки в разведении, соответствующем тройному ее титру. После тщательно смешивают эритроциты с гемолитической сывороткой, смесь ставят в термостат при 37 ˚С на 30 минут. Готовят разведения комплемента, начиная с исходного 1:10. В ряд пробирок разливают микропипеткой различные дозы разведенного комплемента с интервалом 0,01 мл. Объем жидкости в каждой пробирке доводится до 0,6 мл физиологическим раствором, а затем добавляют по 0,4 мл гемолитической системы. Пробирки тщательно встряхивают и ставят в термостат на 30 минут, учитывают результаты.
4. Таксономическое положение и характеристика клебсиелл.
Не образуют спор, неподвижные палочки, располагаются единично, парами или короткой цепочкой. Хорошо растут на простых питательных средах. Обладают выраженной б/х активностью. Имеют соматические О-антигены и более 80 вариантов капсульных К-антигенов. Устойчивы к факторам окружающей среды, погибают при 65 ˚С через 60 минут в растворах обычных дезинфицирующих веществ.
5. Лабораторная диагностика ОРВИ.
Обнаружение АГ в респираторном эпителии (РИФ)
Выделение вируса: отделяемое носа, зева, конъюнктивы→культура клеток→РСК→РН, РТГА
Выявление нарастания титра антител (РСК, РТГА, РН)