Задачи по частной микробиологии

Стафилококки (гнойные инфекции, пищевые интоксикации, стафилоносительство)

Эпидемиология

Источник инфекции - больной человек, бактерионосители, больное животное. Стафилококки,являясь постоянными обитателями кожи и слизистых, могут вызвать аутоинфекцию. Микроорганизмы этой группы могут вызывать внутрибольничную ин­фекцию. Путь передачи - контактно-бытовой, воздушно-капельный, алиментарный.

Патогенез

Стафилококки проникают в любые органы и ткани. Это свойство связано с нали­чием у них факторов патогенности - экзотоксина и ферментов агрессии. Экзотоксин пантропен и состоит из множества фракций, обладающих органотропностью. Фрак­ции экзотоксина: гемотоксин, лейкотоксин, некротоксин, нейротоксин, летальный токсин, энтеротоксин, эксфолиативные токсины, экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока и т.д. Стафилококк имеет весь набор ферментов агрессии - гиалуронидазу, плазмокоагулазу, лецитиназу, фибринолизин и другие.

Клиника

Стафилококки проникают в организм через повреждения кожи и слизитых обо­лочек, вызывая самые разнообразные заболевания - от банальной угревой сыпи до тяжелейшего перитонита, эндокардита, сепсиса и септикопиемии, менингита, пнев­монии, при которых летальность достигает до 80%.Стафилококки играют ведущую роль в гнойной хирургии. Инфицирование стафилококками пищевых продуктов - час­тая причина пищевых отравлений (пищевых интоксикаций).

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал зависит от клинических проявлений инфекции. Это могут быть кровь, спинномозговая жидкость, мокрота, гнойное отделяемое пораженного органа, рвотные массы.

1. Микроскопический метод - определяет род. В мазках из исследуемого матери­ала - грамположительные бактерии шаровидной формы в виде гроздьев винограда.

2. Бактериологический метод - ведущий, служит для определения вида стафило­кокка. Исследуемый материал засевают на элективные среды - желточно-солевой агар (ЖСА) с целью выделения чистой культуры. Кровь и спинномозговую жидкость предварительно обогащают на 1% сахарном бульоне. В бульоне возбудитель дает равномерное помутнение, на агаре - гладкие, пигментированные колонии с ровными краями. Идентификацию стафилококка проводят по факторам патогенности: лецитиназная активность определяется на ЖСА (вокруг колоний отмечается перламутровая зона помутнения среды); гемолитическая активность определяется путем посева культуры стафилококка на кровяной агар; плазмокоагулаза определяется посевом в цитратную плазму; биохимическая активность - посевом в пестрый ряд. По патоген­ности выделяют три вида стафилококка (см. таблицу). Для обнаружения типа энтеротоксина используют реакцию преципитации в геле (РП).

Таблица дифференциальной диагностики видов стафилококков

Дифференциальный признак	Staphylococcus aureus		Staphylococcus epidermidis	Staphylococcus saprophyticus
Плазмкоагулаза	+		-	-
Гемолизин	+		-	-
Лецитиназа		+	-		-
Сбраживание маннита		+	-		+
Сбраживание глюкозы		+	+		-
Экзотоксин		+	-		-
Преимущественное место локализации		Пантропен	Кожа и слизис­тые		Слизистые .

С целью определения источника инфекции проводят фаготипирование с помо­щью типового стафилококкового бактериофага.

3. Серологический метод - реакция пассивной гемагглютинации (РПГА), иммуно- ферментная реакция (ИФА) для определения специфических антител в сыворотке кро­ви больного к тейхоевой кислоте, содержащейся в клеточной стенке стафилококка.

4. Биологический метод - биопроба на котятах (пероральное введение фильтрата бульонной культуры стафилококка) для обнаружения энтеротоксина. Токсины вызы­вают у котят рвоту и понос.

5. Аллергический метод не применяется.

Лечение и специфическая профилактика. Этиотропная терапия назначается с учетом антибиотикочувствительности. Для лечения используют главным образом В-лактамные антибиотики, макролиды, полипептидные антибиотики. Специфическая иммунотерапия применяется при тяжелых и хронических стафило­кокковых инфекциях - в виде противостафилококкового человеческого иммуногло­булина, антистафилококковой плазмы.

Специфическая плановая профилактика - стафилококковый анатоксин. Показана беременным женщинам перед родами. Иммунитет кратковременный.

менингококки (менингит, менингококцемия)

Менингит - инфекционное респираторное заболевание с гнойно-воспалительными проявлениями мозговых оболочек спинного и головного мозга. Возбудитель - Neisseria meningitidis относится к семейству Neisseriaceae.

Эпидемиология

Источник инфекции - больной человек либо бактерионоситель. Инфекция - антропонозная. Путь передачи инфекции - воздушно-капельный. Входные ворота - сли­зистая носоглотки. Во внешней среде неустойчив.

Патогенез

С помощью пилей и белков наружной мембраны возбудитель осуществляет ад­гезию и колонизацию эпителия носоглотки, где происходит его первичное размножение. Из носоглотки возбудитель проникает в лимфатические сосуды и в кровь, а затем в центральную нервную систему, где оседает на мягких мозговых оболочках и, интенсивно размножаясь, вызывает их воспаление. При гибели возбудителя выделя­ется эндотоксин, обладающий пирогенным, некротическим и летальным действием. Главный фактор патогенности - капсула, защищающая менингококк от фагоцитоза.

Клиника

Инкубационный период 2-4 дня. Менингококки могут вызывать следующие кли­нические формы болезни: назофарингит (наиболее легкая форма); менингококцемия (менингококковый сепсис); эпидемический цереброспинальный менингит. Клиничес­кие проявления - головная боль, сыпь, симптомы интоксикации. После перенесенно­го заболевания формируется прочный длительный антимикробный иммунитет.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал - ликвор, кровь. Ликвор перед исследованием центри­фугируют.

1. Микроскопический метод - ведущий. Из осадка спинномозговой жидкости го­товят 2 мазка. Один красят по методу Грама, другой - щелочной синькой. При окраске по методу Грама в мазке - грамотрицательные диплококки бобовидной формы. При простом методе окраски - диплококки внутри лейкоцитов (незавершенный фагоци­тоз).

Для определения серотипа менингококка ставится реакция преципитации надосадочной жидкости с преципитирующей антименингококковой сывороткой. По О- антигену у возбудителя различают 13 серотипов. Основные - А, В,Д,\А/-135, Y

2. Бактериологический метод. Посев исследуемого материала (осадок спинно­мозговой жидкости) осуществляют на кровяной агар, где возбудитель дает не­жные, прозрачные колонии, размером 2-3 мм. Полученные колонии микроскопируют по методу Грама (в мазках из колоний грамотрицательные диплококки). Серотип ме­нингококка определяют в реакции агглютинации чистой культуры с агглютинирующей антименингококковой сывороткой. Биохимическая идентификация - разлагает глю­козу и мальтозу до кислоты.

Иммунолюминесцентная микроскопия (прямой метод) - для экспресс - индика­ции антигена менингококка в исследуемом материале.

Метод встречного иммуноэлектрофореза используют для экспресс - индикации возбудителя в исследуемом материале

3. Серологический метод на 5-6 день заболевания: реакция непрямой или пас­сивной гемагглютинации (РНГА), иммуноферментная реакция (ИФА) с парными сы­воротками.

4. Аллергический метод не применяется.

5. Биологический метод не применяется.

Особенности лабораторной диагностики менингококкового носительства

Исследуемый материал - слизь из носоглотки.

К числу нормальных обитателей носоглотки относятся следующие нейссерии:

Moraxella catarrhalis, Neisseria flavescens, Neisseria sicca, Branchamella.

В связи с этим возникает необходимость их дифференциации.

Neisseria meningitidis: в отличие от остальных разлагает глюкозу и мальтозу до кислоты, растет только на белковых средах (кровяной агар). Сероидентификация возбудителя - в реакции агглютинации (РА) со специфической сывороткой, соответс­твующих серотипов.

Лечение и специфическая профилактика.

Для специфической профилактики - вакцина менингококковая типа А. Для специ­фической терапии и экстренной профилактики применяют нормальный человеческий иммуноглобулин. Для этиотропной терапии - сульфаниламидные препараты и анти­биотики (пенициллин, рифампицин).

гонококки (гонорея)

Гонорея - инфекционное венерическое заболевание с воспалительными прояв­лениями в мочеполовых путях и конъюнктиве глаза (у новорожденных). Возбудитель - Neisseria gonorrhoeae относится к семейству Neisseriaceae.

Эпидемиология

Источник инфекции - больной человек. Инфекция - антропонозная. Путь переда­чи - контактно-половой. Входные ворота - слизистая уретры, цервикального канала, глаз, прямой кишки. Во внешней среде неустойчив.

Патогенез

Основной фактор патогенности - пили, с помощью которых гонококк осуществля­ет адгезию и колонизацию цилиндрического эпителия слизистой мочеполового трак­та. Возбудитель всегда остается на месте входных ворот. При его гибели высвобож­дается эндотоксин, распространяется по протяжению. Редко, но может проникать в кровь и поражать суставы, вызывая гонорейный артрит. Поражение конъюнктивы глаз называют гонобленнореей.

Клиника

Инкубационный период от 3 до 4 дней до 3-4 недель. Типичным симптомом ост­рой гонореи является воспаление уретры и шейки матки, сопровождающееся обиль­ными гнойными выделениями. Различают гонорейную инфекцию нижних отделов мочеполового тракта (уретрит, цервицит) и верхних (эндометрит, эпидидимит, воспа­лительные заболевания тазовых органов). Перенесенное заболевание не оставляет иммунитета к повторному заражению.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал - гнойное отделяемое из уретры, цервикального канала, прямой кишки, отделяемое конъюнктивы глаза, сыворотка крови.

1. Микроскопический метод - ведущий при острой гонорее. Из исследуемого ма­териала готовят 2 мазка. Один красят по методу Грама, другой - щелочной синькой. При простом способе окраски - диплококки бобовидной формы внутри лейкоцитов (незавершенный фагоцитоз), по Граму – грамотрицательные. .При хронической гоно­рее микроскопический метод используют после провокации. Биологическая провока­ция - это стимуляция специфических и неспецифических факторов иммунного ответа в виде фагоцитоза и гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), ее используют перед началом лечения хронической формы инфекции. Для этого больному внутри­мышечно по схеме вводят гоновакцину. Провокация может быть также механической (бужирование уретры) и алиментарной (прием острых продуктов).

Иммунолюминесцентная микроскопия (прямая) - для сероидентификации возбу­дителя в исследуемом материале.

2. Бактериологический метод - посев исследуемого материала на асцит-агар. Рост характеризуется абсолютно прозрачными колониями в виде капель росы. Био­химическая идентификация - разлагает только глюкозу до кислоты.

3. Серологический метод - при хронической гонорее. В сыворотке крови опреде­ляют специфические антитела с помощью реакции связывания комплемента (РСК) (по автору реакция Борде-Жангу) и реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РИГА).

4. Биологический метод не применяется.

5. Аллергический метод - при хронической гонорее. Ставится кожно-аллергическая проба. Аллергеном служит гоновакцина (взвесь гонококков, убитых нагреванием).

6. Метод молекулярной биологии - цепная полимеразная реакция (ПЦР).

Лечение и специфическая профилактика.

Специфическая профилактика не разработана. Для неспецифической профилак­тики гонобленнореи у новорожденных используют введение им в конъюнктивальный мешок сульфацила натрия или 2 капли 3% масляного раствора пенициллина.

Этиотропная терапия острой и хронической гонореи проводится антибиотиками пенициллинового, тетрациклинового ряда.

кишечная палочка (кишечные инфекции, ПТИ)

Наибольший интерес из кишечно-тифозной группы бактерий представляют три основных рода: Esherichia, Salmonella, Shigella, которые являются возбудителями кишечных инфекции (коли-инфекция, брюшной тиф, паратифы, сальмонеллезы, ди­зентерия). Все бактерии этой группы имеют одинаковые морфологические и культуральные свойства: это грамотрицательные палочки, спор и капсул не образуют, саль­монеллы и эшерихии подвижные, шигеллы неподвижные, в МПБ дают равномерное помутнение, на пластинчатом МПА - бесцветные, полупрозрачные, округлые колонии с фестончатыми (сальмонеллы и эшерихии) и ровными (шигеллы) краями. Первичное распознавание бактерий кишечно-тифозной группы осуществляют на дифференци­ально-диагностических средах с содержанием лактозы - это среды Эндо, Левина, Плоскирева, Ресселя. Эшерихии разлагают лактозу до кислоты и газа, сальмонеллы и шигеллы не действуют на этот углевод.

Среда Эндо содержит лактозу, фуксин (индикатор), который в щелочной среде приобретает розовый цвет, а в кислой - красный. Эшерихии на среде Эндо дают ма­линового цвета колонии, сальмонеллы и шигеллы - бесцветные.

Среда Левина содержит лактозу и индикатор - эозинметиленовую синь, который в щелочной среде приобретает сиреневый цвет, а в кислой - темно-синий. Эшерихии на среде Левина дают темно-синие колонии, сальмонеллы и шигеллы - бесцветные. Среды Эндо и Левина используют для выделения чистой культуры эшерихий.

Среда Плоскирева (бактоагар Ж) содержит лактозу с индикатором - нейтраль­ный красный( краситель) и дополнительные компоненты: соли желчных кислот, по­давляющие рост эшерихий и бриллиантовый зеленый, подавляющий рост грампо- ложительной микрофлоры. Среда Плоскирева используется для выделения чистой культуры сальмонелл и шигелл, которые дают на этой среде бесцветные колонии. Эшерихии на среде Плоскирева дают красного цвета колонии.

Среда Ресселя содержит 1% лактозы, 0,1% глюкозы, индикатор Андреде. Среду готовят в виде скошенного агара, нижняя часть ее в виде столбика, а верхняя - в виде скошенной поверхности. Посев чистой культуры бактерий производят на скошенную поверхность и уколом в столбик среды. Эшерихии, ферментирующие оба углевода (глюкоза и лактоза), изменяют цвет всей среды. Сальмонеллы и шигеллы, ферменти­рующие один углевод (глюкоза), изменяют цвет столбика и скошенная поверхность среды Ресселя. Разрывы столбика среды свидетельствуют о газообразовании.

Коли-инфекция (эшерихиоз)

Блок информации

Острая кишечная инфекция, вызываемая патогенными вариантами кишечной па­лочки (E.coli), протекающая с синдромом гастроэнтерита и гастроколита.

E.coli имеет три антигена: соматический О-антиген (термостабильный), капсульный К-антиген (термолабильный), жгутиковый Н-антиген (термолабильный). Капсульный К-антиген неоднороден, имеет три фракции -A,B,L. По О-антигену эшерихии делятся на О-группы. Внутри каждой О-группы бактерии различаются по Н- и К-антигену. Патогенные варианты кишечной палочки содержат ОК(В)-антиген. Принято подразделять патогенные для человека кишечные палочки на четыре группы: энтеропатогенные (ЭПКП), энтероинвазивные (ЭИКП), энтеротоксигенные (ЭТКП) и энтеро-геморрагические (ЭГКП) кишечные палочки.

Эпидемиология

Источник инфекции - больные, бактерионосители. Пути передачи инфекции - алиментарный (фекально-оральный), иногда контактно-бытовой. Факторы передачи - молочные продукты, вода. Входные ворота - слизистая жкт.

Патогенез

Инкубационный период не более трех дней. В этот период возбудитель проникает с пищей в жкт, где разрушается с выделением и накоплением эндотоксина. ЭПКП и ЭТКП вызывают интоксикацию, лихорадку, слабость, тошноту, рвоту и т.д. ЭИКП вызывает дизентериеподобную коли-инфекцию, размножается внутри эпителиаль­ных клеток с продукцией эндотоксина, с последующим разрушением и отторжением эпителиальных клеток, формированием поверхностных микроязв. ЭГКП вызывают геморрагический колит с тяжелыми осложнениями в виде тромбоцитопенической пурпуры.

Клиника

Клинически - слизисто-кровянистый стул. ЭПКП (возбудитель коли-энтеритов), ЭТКП (возбудитель холероподобных заболеваний) размножаются на поверхности эпителиальных клеток. Патологический процесс при коли-энтеритах (ЭПКП) связан с действием эндотоксина, а ЭТКП (холероподобные заболевания) образует еще и энтеротоксин.

Постинфекционный иммунитет группоспецифический, слабонапряженный.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал - испражнения, рвотные массы остатки пищевых продук­тов.

1. Микроскопический метод - не применяется, так род определить невозможно.

2. Бактериологический метод: Первый день - испражнения, рвотные массы засе­вают на среды Эндо и Левина.

Второй день - исследуют крупные изолированные колонии малинового цвета на среде Эндо и темно-синие на среде Левина. С каждой чашки исследуют не ме­нее 10 колоний в реакции агглютинации с комплексной ОК(В)-коли сывороткой для выявления патогенных вариантов кишечной палочки. Агглютинирующую колонию накапливают на среде Ресселя. Третий день - отмечают изменение всего столбика цвета среды Ресселя. Для определения серотипа ставится реакция агглютинации с типовыми ОК(В)-коли сыворотками. При наличии агглютинации с одной из сывороток ставят развернутую реакцию агглютинации с этой же сывороткой.С живой культурой для установления В-антигена и с культурой, прогретой в течение 2 ч при 1000°С, для установления О-антигена.

3. Серологический метод - не применяется.

4. Аллергический метод - не применяется.

5. Биологический метод - не применяется.

Лечение и профилактика

Специфическая профилактика коли-инфекций не разработана. Этиотропная те­рапия - ампициллин, норфлоксацин, амоксициллин.

шигеллы (дизентерия)

Дизентерия - острая кишечная инфекция, характеризующаяся язвенным пора­жением слизистой оболочки толстого кишечника и явлениями общей интоксикации организма. Возбудители дизентерии относятся к семейству Enterobacteriaceae, роду Shigella. В соответствии с антигенной структурой О-АГ и биохимическими свойства­ми выделяют 4 вида возбудителей дизентерии: S.dysenteriae, S.flexneri, S.boydii и S.sonnei.

Эпидемиология

Источник инфекции - больные люди, бактерионосители. Путь передачи инфек­ции - фекально-оральный. Факторы передачи инфекции - вода и пищевые продукты (молоко и молочные продукты). При тесном общении с больным человеком возможен контактно-бытовой путь передачи инфекции. Входные ворота - слизистая желудоч­но-кишечного тракта.

Патогенез

Инкубационный период в среднем 2-5 дней. Возбудитель через ротовую полость проникает в кишечник и поражает слизистую оболочку нисходящего отдела толстого кишечника (сигмовидная и прямая кишка). Поражение слизистой кишечника носит циклический характер: адгезия, колонизация, внедрение шигелл в цитоплазму энтероцитов, их внутриклеточное размножение, разрушение и отторжение эпителиальных клеток, выход возбудителя в просвет кишечника. Вслед за этим начинается очеред­ной цикл. В результате повторяющихся циклов на слизистой кишечника образуются язвы, вследствие чего в испражнениях появляется кровь, слизисто-гнойные комочки, полиморфно-ядерные лейкоциты.

Клиника

Клиника дизентерии во многом определяется тем, какой тип токсинов в большей степени продуцируется возбудителем: цитотоксины разрушают энтероциты, энтеротоксин вызывает диарею, эндотоксины обусловливают общую интоксикацию. На­иболее типичными клиническими проявлениями дизентерии являются понос, частые позывы, тенезмы (болезненные спазмы прямой кишки) и общая интоксикация. Пос­тинфекционный иммунитет носит кратковременный типоспецифический характер, прочного перекрестного иммунитета не возникает.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал - испражнения, сыворотка крови.

1. Микроскопический метод - имеет ориентировочное значение. Морфологичес­ки шигеллы представляют собой грамотрицательные палочки с закругленными кон­цами, неподвижны, спор и капсул не образуют.

2. Бактериологический метод (ведущий): Первый день - посев исследуемого ма­териала (испражнения) на дифференциальные плотные питательные среды Плоскирева и Левина. Посевы выдерживают в термостате при 37°С в течение суток. Забор исследуемого материала следует производить до начала лечения.

Второй день. На среде Левина и Плоскирева, отмечают бесцветные колонии ши- гелл, не разлагающие лактозы. Бактерии из бесцветных колоний исследуют в окра­шенных по Граму мазках на чистоту и в «висячей капле» на подвижность, пересевают на скошенный агар и среду Ресселя. Посевы ставят в термостат при 37°С на 24 часа.

Третий день. Проверяют чистоту культуры со скошенного агара в мазках по Граму. Отмечают характер роста на среде Ресселя: шигеллы, разлагающие только глюкозу, двухцветное окрашивание. Идентификация возбудителя проводится в реакции аг­глютинации на стекле при помощи видовых дизентерийных агглютинирующих сыво­роток. Биохимическая идентификация осуществляется путем посева возбудителей в пестрый ряд, содержащий среды Гисса с глюкозой, лактозой, и маннитом. Все 4 вида возбудителей дизентерии расщепляют глюкозу до кислоты. Кроме того, S.flexneri рас­щепляет манит, a S.sonnei - лактозу( только через двое суток) и манит до кислоты.

Если по каким-либо причинам возбудителя выделить не удается (например, за­бор исследуемого материала осуществлен после приема больным антибиотиков, при хронической дизентерии), прибегают к вспомогательным методам, основанным на косвенном подтверждении возбудителя в испражнениях: реакция кольцепреципитации с гаптеном и реакция нарастания титра фага.

3. Серологический метод - реакция непрямой (РИГА) дает положительные ре­зультаты на 5-й день болезни. Специфические антитела определяются в диагности­ческом титре 1:200.Реакция агглютинации (РА) ставится на 7-8-й день заболевания и считается положительной, если специфические антитела определяются при разве­дении сыворотки больного не менее 1:200 (диагностический титр).

4. Биологический метод - кератоконъюнктивальная проба на морских свинках с целью установления принадлежности выделенной культуры к роду шигелл (у морских свинок развивается кератит и коньюнктивит).

5. Аллергический метод - кожно-аплергическая проба Цуверкалова с дизентерином при хронической дизентерии.

Лечение и профилактика дизентерии.

Этиотропная терапия - Антибиотики левомицетинового ряда. Фторхинолоны. цефалоспорины 3 поколения.

Специфическая терапия - применение поливалентного дизентерийного бактери­офага.

Специфическая профилактика дизентерии не разработана.

сальмонеллы (сальмонеллезы, брюшной тиф, паратифы)

Сальмонеллез - острая кишечная инфекция, характеризующаяся преиму­щественным поражением слизистой желудочно-кишечного тракта. Возбудители сальмонеллеза относятся к семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella. Насчи­тывается более 2200 видов сальмонелл. Наиболее частые возбудители сальмонеллезов: S.typhimurium, S.enteritidis, S.choleraesuis, S.heidelberg, S.anatum, S.newsport, S. derby.

Эпидемиология

Источник инфекции - больные люди и животные (крупный рогатый скот, свиньи, овцы, лошади, водоплавающие птицы), бактерионосители. Путь передачи инфекции - алиментарный (пищевой и водный). Факторы передачи инфекции - пищевые про­дукты (мясо инфицированных животных или птиц, их яйца). Инфицирование мяса может происходить при жизни самого животного во время его болезни, при разде­лке туш животных - бактерионосителей (обсеменение мяса содержимым кишечника при его ранении), в процессе транспортировки, хранения, неправильной кулинарной обработки. При тесном общении с больным человеком или животными возможен контактно-бытовой путь передачи инфекции.

Входные ворота - слизистая желудочно-кишечного тракта. Сальмонеллы отно­сительно устойчивы к различным факторам внешней среды: к солению, копчению и действию кислот. Для разрушения бактерий требуется качественно проводимая тер­мическая обработка. Так, для полной инактивации сальмонелл, находящихся в куске мяса массой 400 г, необходимо варить его не менее 2,5 часа.

Патогенез

Инкубационный период в среднем 12-24 часа. За этот период сальмонеллы из ротовой полости проникают в ЖКТ, достигают тонкого кишечника. Преодолев эпите­лиальный барьер тонкой кишки, проникают в толщу тканей, захватываются макрофа­гами, где не только размножаются, но и частично погибают с освобождением эндо­ токсина. Эндотоксин поражает нервно-сосудистый аппарат кишечника и повышает проницаемость клеточных мембран, что способствует дальнейшему распростране­нию сальмонелл по лимфатическим путям и занесению их в мезентериальные лим­фатические узлы. Эндотоксин оказывает как местное действие, так и способствует развитию симптомов общей интоксикации организма. Инфекционный процесс на этой стадии заболевания может завершиться (локализованная форма). При тяжелом течении возможна кратковременная бактериемия.

Генерализованная форма сальмонеллеза возникает при глубоком нарушении ба­рьерной функции лимфатического аппарата кишечника и сопровождается длитель­ной бактериемией, в результате чего сальмонеллы заносятся в различные внутренние органы, вызывают в них формирование вторичных гнойных очагов (септикопиемия).

Повышение секреции жидкости в кишечнике связано с активацией аденилатциклазы и гуанилатциклазы энтероцитов сальмонеллезным энтеротоксином и последу­ющим нарастанием внутриклеточной концентрации биологически активных веществ (цАМФ, цГМФ и др.). Это ведет за собой поступление в просвет кишечника большого количества жидкости, калия, натрия и хлоридов.

Клиника

У больных развиваются рвота и понос, интоксикация организма. Появившиеся симптомы больные четко связывают с приемом недоброкачественной пищи. Часто появляются симптомы обезвоживания организма. Постинфекционный иммунитет при сальмонеллезе малонапряженный и кратковременный.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал - рвотные массы, промывные воды желудка, испражне­ния, желчь, кровь.

1. Микроскопический метод - имеет ориентировочное значение. Морфологичес­ки сальмонеллы представляют собой грамотрицательные палочки с закругленными концами, подвижны, перитрихи, спор и капсул не образуют.

2. Бактериологический метод:

Первый день - посев исследуемого материала (рвотные массы, промывные воды желудка, испражнения, желчь) на плотные дифференциальные питательные среды Левина, Плоскирева, висмут-сульфит агар. Если исследуемым материалом является кровь, то посев производят на жидкие питательные среды: 10% желчный бульон или среду Раппорт. Посевы выдерживают в термостате при 37°С в течение суток. Забор исследуемого материала следует производить до начала лечения.

Второй день. На среде Левина и Плоскирева, отмечают бесцветные колонии саль­монелл, не разлагающие лактозы. Бактерии из бесцветных колоний и из жидких пита­тельных сред исследуют в окрашенных по Граму мазках на чистоту и в «висячей кап­ле» на подвижность, пересевают на скошенный агар и среду Ресселя. Посевы ставят в термостат при 37°С на 24 часа.

Третий день. Проверяют чистоту культуры со скошенного агара в мазках по Гра­му. Отмечают характер роста на среде Ресселя: сальмонеллы, разлагающие только глюкозу, дают двухцветное изменение столбика среды. Идентификация возбудителя проводится в реакции агглютинации на стекле со смесью монорецепторных группо­вых сальмонеллезных 0 -сывороток с целью определения серогруппы выделенной сальмонеллы. При положительном результате по таблице Кауфмана - Уайта опреде­ляют, какие виды сальмонелл относятся к данной группе. Затем ставят реакцию аг­глютинации на стекле с видовыми монорецепторными сальмонелллезными Н-сыворотками, относящимися к данной группе (см. таблицу в учебнике).

3. Серологический метод - реакция непрямо гемагглютинации( РИГА) дает поло­жительные результаты на 5-й день болезни. Специфические антитела определяются в диагностическом титре 1:200. Реакцию агглютинации (РА) ставится на 7-8-й день за­болевания и считается положительной, если специфические антитела определяются при разведении сыворотки больного не менее 1:200 (диагностический титр).

4. Биологический метод не применяется.

5. Аллергический метод - не применяется.

Сальмонеллезы (пищевые токсикоинфекции) необходимо дифференцировать с пищевыми интоксикациями, причиной которых является экзотоксин, выделяемый та­кими микроорганизмами, как стафилококк, палочка ботулизма, палочка перфрингенс тип F (см таблицу).

Таблица дифференциальной диагностики пищевых токсикоинфекций и пи щевых интоксикаций

Дифференциальный признак	Пишевые токсикоинфек­ции	Пищевые интоксикации
1	2	3
1.Возбудитель	Обладает слабой пато- генностью (имеет слабый эндотоксин). Это нормаль­ные обитатели кишечника человека и животных: ки­шечная палочка, протей, энтерококк, сальмонеллы.	Возбудитель выделяет экзо­токсин, не разрушающийся пищеварительными фермен­тами. Это: палочка ботулизма, стафилококк, палочка перф­рингенс тип F.
2.Условия развития заболевания	Возбудитель предвари­тельно размножается в пи­щевом продукте.	Возбудитель предварительно размножается в пищевом про­дукте с выделением и накоп­лением экзотоксина.
З.Виды пищевых продуктов	Мясо здоровых и больных животных при разделке туш и ранении кишечника обсеменяется его содер­жимым (кишечная палочка, энтерококк, сальмонеллы). Овощи и фрукты длительнохранившиеся (часто ин­фицированы протеем).	1 .Консервы домашнего приго­товления: мясные для палочек перфрингенс типа F, рыбные (особенно осетровые), овощ­ные (чаще грибные) для па­лочки ботулизма. 2.Продукты, содержащие са­хар, масло, молоко для стафи­лококка (крем, торты, мороже­ное, молоко, кефир и т.д.).
4. Патогенез	Возбудитель в большом количестве с пищевым продуктом поступает в же­лудок, где разрушается с выделением эндотоксина, который раздражает сли­зистую желудка и кишеч­ника, нарушая ее проница­емость, проникает в кровь, вызывая бактериемию.	Экзотоксин (энтеротоксин стафилококка и палочки пер­фрингенс типа R энтероток­син и нейротоксин палочки ботулизма) в большом коли­честве с пищевым продуктом поступает в желудок, раздра­жая слизистую желудка и ки­шечника. Нейротоксин палоч­ки ботулизма поражает ядра черепномозговых нервов.
5.Клиника.	Инкубационный период 6- 8 час. Это время требуется для накопления эндоток­сина. Характерные клини­ческие признаки: лихорад­ка - не менее 38°С, рвота, жидкий стул.	Инкубационный период 1-2 часа для стафилококка и па­лочки перфрингенс типа F; 2-4 дня для палочки ботулиз­ма. Характерные клинические признаки: температура тела нормальная или субфебрильная (не более 38°С), рвота, жидкий стул. Для ботулизма характерна еще клиника по­ражения черепно-мозговых нервов: шум в ушах, двоение в глазах, нарушение глотания, речи и т.д.
6.Методы лабора­торной диагности­ки.	Микроскопический - ори­ентировочный. Бактериологический - ве­дущий. Серологический - не при­меняется. Аллергический - не приме­няется. Биологический - не при­меняется.	Микроскопический Бактериологический и Серологический - не приме­няется Аллергический - не применяетя Биологический - биопробы на животных с целью обнаруже­ния и идентификации экзототоксина.
7.Исследуемый ма­териал.	Пищевые продукты, рвот­ные массы, промывные воды желудка, кровь.	Пищевые продукты, рвотные массы, промывные воды же­лудка.
8.Питательные сре­ды.	Среда Плоскирева, Вис­мут-сульфит-агар для вы­деления сальмонелл. Среда Эндо, Левина для выделения кишечной па­лочки. ЖСА для выделения ста­филококка. Посев по Шукевичу для вы­деления протея.	ЖСА для выделения стафило­кокка. Среда Китта -Тароцци для вы­деления палочки ботулизма перфрингенс типа F.
9.Специфическая те­рапия.	Нет.	Антитоксические сыворотки.

Лечение и профилактика сальмонеллеза.

Этиотропная терапия -антибиотики левомицетинового ряда, бета-лактамы (ампициллин),аминогликозиды ( канамицин, гентамицин), цефалоспорины ( цепорин).

Специфическая терапия заключается в применении поливалентного сальмонеллезного бактериофага.

Специфическая профилактика сальмонеллеза не разработана.

Брюшной тиф - острое инфекционное заболевание, сопровождающееся бакте­риемией, специфическим поражением лимфатического аппарата тонкого кишечника и явлениями общей интоксикации. Интоксикация проявляется сильной головной бо­лью, помрачнением сознания, бредом (тиф). Возбудители брюшного тифа относятся к семейству Enterobacteriaceae, роду Salmonella, который включает в себя большую группу бактерий, но только три из них (S.typhi, S.paratyphi А и S.paratyphi В) вызыва­ют заболевание у человека с клинической картиной брюшного тифа.

Эпидемиология

Источник инфекции брюшного тифа и паратифа А - больные люди и бактерионо­сители; паратифа Б - кроме человека, животные и птицы. Путь передачи инфекции - фекально-оральный. Факторы передачи инфекции - пищевые продукты (особенно молоко), вода. Входные ворота - слизистая желудочно-кишечного тракта.

Патогенез

Инкубационный период в среднем 2 недели. Патогенез и клиническая картина брюшного тифа и паратифов очень сходны. В развитии болезни выделяют несколько стадий.

1 стадия - пищеварительно-дигестивная. Это начало инкубационного периода. Длится 6-8 часов (это время от момента попадания возбудителя в ротовую полость до достижения им тонкого кишечника).

2 стадия - инвазии. Возбудитель внедряется в лимфоидный аппарат тонкого ки­шечника (пейеровы бляшки и солитарные фолликулы), размножается в нем с развити­ем воспалительного процесса. Эта стадия длится 2 недели (инкубационный период). В инкубационный период происходит сенсибилизация организма и лимфатического аппарата кишечника. В конце инкубационного периода, за два дня до заболевания, появляются продромальные симптомы: недомогание, боли в животе, субфебрильная температура.

3 стадия - бактериемии. Возбудитель в большом количестве через воспаленный лимфоидный аппарат тонкого кишечника проникает в кровь. Под действием бактери­цидных свойств крови идет массовый распад бактерий с выделением эндотоксина, что сопровождается повышением температуры. Это начало заболевания. Стадия бак­териемии длится 1 неделю.

4 стадия - паренхиматозной диффузии. Током крови возбудитель разносится по организму и оседает в паренхиматозных органах (костный мозг, селезенка, легкие, кожа, почки, печень). В большом количестве возбудитель накапливается в желчных ходах печени и в желчном пузыре, где он находит благоприятные условия для своего размножения. Эта стадия длится 1 неделю и соответствует 2-й неделе заболевания (разгар болезни).

5 стадия - выделительно - аллергическая. Из желчного пузыря возбудитель опять поступает в тонкий кишечник, откуда часть его выделяется с испражнениями, а часть вновь внедряется в лимфоидный аппарат кишечника. Вторичное внедрение в уже сенсибилизированный лимфоидный аппарат вызывает в нем гиперергическую реак­цию в виде некроза и язв. (ГЗТ) Выделение возбудителя из организма может также происходить с мочой, потом и молоком кормящей матери. Эта стадия длится 1 неде­лю и соответствует 3-й неделе заболевания.

6 стадия - выздоровление. Клинически этот период характеризуется очищением язв от некротических масс и заживлением. Это происходит на 5-6-й неделе заболева­ния. Постинфекционный иммунитет - клеточный и гуморальный.

Лабораторная диагностика.

Исследуемый материал зависит от стадии патогенеза. Таблица

Стадия патоге­неза	Период клиничес­ких проявлений	Исследуемый ма­териал	Метод исследова­ния
I. Пищеварительно- дигестивная	Инкубационный период	-	-
II. Инвазии	Инкубационный период	-	-
III. Бактериемии	Первая неделя	Кровь из вены 5-10 мл	Гемокультура
IV. Паренхиматоз­ной диффузии	Вторая неделя	Кровь из вены 20 мл Желчь Моча Сыворотка крови	Гемокультура Биликультура Уринокультура РИГА
V. Выделительно - аллергическая	Третья неделя	Желчь Испражнения Моча Сыворотка крови	Биликультура Копрокультура Уринокультура РИГА, РА Видаля
VI. Выздоровление	Четвертая неделя - 2 мес.	Желчь Испражнения Сыворотка крови	Биликультура Копрокультура РИГА, РА Видаля
VII. Носительство	Более 2 мес.	Сыворотка крови	Биликультура
	Р-я Vl-гемагглюти	Желчь	Копрокультура
	нации	Испражнения	Кожно-аллерги­ческая проба с Vl- тифином

1. Микроскопический метод - имеет ориентировочное значение. Морфологичес­ки сальмонеллы представляют собой грамотрицательные палочки с закругленными концами, подвижны, перитрихи, спор и капсул не образуют.

2. Бактериологический метод:

Первый день - посев исследуемого материала: кровь на жидкие питательные сре­ды - 10% желчный бульон или среду Раппорт; желчь, мочу, испражнения на плотные питательные среды Левина, Плоскирева, висмут-сульфит агар. Посевы выдерживают в термостате при 37 С а течение суток.

Второй день. На среде Левина и Плоскирева, отмечают бесцветные колонии сальмонелл, не разлагающие лактозы. На висмут-сульфит агаре сальмонеллы тифа и паратифа Б дают черного цвета колонии (за счет образования сероводорода). Бак­терии с элективных и из жидких питательных сред исследуют в окрашенных по Граму мазках на чистоту и в «висячей капле» на подвижность, пересевают на скошенный агар и среду Ресселя. Посевы ставят в термостат при 37 С на 24 часа.

Третий день. Проверяют чистоту культуры со скошенного агара в мазках по методу Граму. Отмечают характер роста на среде Ресселя: сальмонеллы, разлагающие только глюкозу, дают двухцветное окрашивание среды) изменяется цвет поверхности среды и по ходу укола). Идентификация возбудителя проводится в реакции агглютинации на стекле с адсорбированными сыворотками S.typhi, S.paratyphi А и S.paratyphi В. Биохи­мическая идентификация осуществляется путем посева возбудителей в пестрый ряд, содержащий среды Гисса с глюкозой, лактозой, мальтозой, маннитом, сахарозой. S.typhi разлагает углеводы (глюкозу, мальтозу, маннит) до кислоты, a S.paratyphi А и S.paratyphi В до кислоты и газа.

3. Серологический метод - реакция непрямой гемагглютинации (РИГА) дает по­ложительные результаты на 5-й день болезни. Специфические антитела определя­ются в диагностическом титре 1:200. РА Видаля ставится на 7-8-й день заболевания с брюшнотифозными О- и Н- диагностикумами и паратифозными А и Б диагностику- мами. Если титр О-антител превышает титр Н-антител - это Видаль инфекционный; Если титр Н-антител превышает титр О-антител - это Видаль анамнестический; если Н-антитела не определяются - это Видаль поствакцинальный. Для реакции Видаля с паратифозными А и Б диагностикумами диагностический титр 1:200.

4. Биологический метод не применяется.

5. Аллергический метод - кожно-аллергическая проба с Vl-тифином для диагнос­тики брюшнотифозного носительства.

Лечение и профилактика брюшного тифа.

Этиотропная терапия - антибиотики левомицетин, ампициллин, тетрациклины, канамицин, гентамицин, цепорин.

Специфическая терапия - применение поливалентного брюшнотифозного бакте­риофага.

Специфическая профилактика - разработано три типа вакцин - убитая (эффкт до 70%) живая аттенуированная, вакцина из Vi -Ar S typhi, химическая сорбированная брюшно-тифозная вакцина TABte.

синегнойная палочка (гнойные инфекции)

Род Pseudomonas семейства Pseudomonadaceae отдела Gracilicutes объединяет аэробные прямые или изогнутые палочки. Псевдомо­нады подвижны (исключая P. mallei), имеют жгутики, располо­женные полярно; хемоорганотрофы, оксидаза-положительны. Мно­гие виды свободноживущие, но их относят к растительным и живот­ным патогенам. Медицинское значение имеют P. aeruginosa, P. mallei и P. pseudomallei.