Хід роботи

Принцип методу. Сечова кислота відновлює фосфатвольфраматний реактив з утворенням сполуки блакитного кольору, оптична густина якої за довжини хвилі 640 нм є пропорційною концентрації сечової кислоти в сироватці крові.

Хід виконання роботи. У центрифужнуі пробірки вміщують по 0,5 мл сироватки крові або сечі, розведеної у 10 раз, та 4 мл дистильованої води. Вміст пробірок перемішують і додають 0,25 мл розчину сульфатної кислоти та 0,25 мл розчину натрій вольфрамату. Вміст пробірок перемішують і через 5 хв центрифугують протягом 10 хв із швидкістю 3000 об/хв. Проводять визначення вмісту сечової кислоти за Табл.:

Табл. Визначення вмісту сечової кислоти в сироватці крові

Реактиви	Контрольна проба, мл	Стандартна проба, мл	Дослідна проба, мл
Надосадова рідина	–	–	2
Стандартний розчин сечової кислоти	–	2	–
Вода дистильована	2	–	–
Розчин натрій карбонату	1	1	1
Фосфатвольфрамовий реактив	0.5	0,5	0,5

Вміст пробірок переміщують, через 30 хв визначають оптичну густину стандартної та дослідної проб за довжини хвилі 640 нм (590-700 нм, червоний світлофільтр) проти контрольної проби у кюветі завтовшки 10 мм. Забарвлення є стабільним протягом 30 хв.

Розрахунок вмісту сечової кислоти проводять за формулою:

С = (Dд×30×А) / Dс,

де С – вміст сечової кислоти у дослідній пробі, кмоль/л;

Dд – оптична густина дослідної проби;

Dс – оптична густина стандартної проби;

30 – вміст сечової кислоти у стандартному розчині. Кмоль/л;

А – величина розведення (А=10 для сироватки крові або 100 для сечі).

Завдання для самостійної підготовки

1. Жінка звернулася до лікаря зі скаргами на біль у суглобах кисті й стопи. Суглоби збільшенні, мають вигляд потовщених вузлів. У сироватці крові пацієнтки виявлено збільшений вміст уратів – солей сечової кислоти. Які біохімічні зміни є причиною виникнення даної патології? Як вона називається?

2. Вміст сечової кислоти у добовій сечі людини становить 3,2 г. Які можливі причини цього стану і як він називається?

3. Новонароджені в період вигодовування не отримують нуклеїнових кислот з молоком, але вони інтенсивно ростуть, в їхньому організмі збільшується кількість клітин, синтез білків, що потребують іРНК, тРНК, рРНК, ДНК. За рахунок яких сполук синтезуються нуклеїнові ткислоти новонароджених?

4. У двох препаратах ДНК вміст аденіну становить відповідно 25 і 12% від загального вмісту азотистих основ. Обчисліть відносний вміст тиміну, цитозину і гуаніну в цих препаратах ДНК.

5. Тетрацикліни, антибіотики широкого спектра дії, є інгібіторами синтезу білків на 70S-рибосомах прокаріотів, не впливаючи на 80S-рибосоми еукаріотів. Рибосоми мітохондрій евкаріотів за структурою подібні до рибосом прокаріотів (70S). Використовуючи ці дані, поясніть токсичний ефект дії тетрациклінів на організми еукаріотів.