4 КУРС (Курс по выбору) / Определение антагонистической активности микроорганизмов методом перпендикулярных штрихов

Федеральное государственное автономное

образовательное учреждение

высшего образования

«СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»

Институт фундаментальной биологии и биотехнологии

Базовая кафедра биотехнологии

ОТЧЕТ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ РАБОТЕ

Определение антагонистической активности микроорганизмов методом перпендикулярных штрихов

Преподаватель _____________

Студент ______________

Красноярск 2019

Цель работы:

Определить антагонистическую активность микроорганизмов Xanthomonas, Planococcus, Fusarium moniliforme и Alternaria по отношению к Bacillus subtilis.

Суть метода:

При использовании метода перпендикулярных штрихов на поверхность агаризованной среды в чашке Петри засевают штрихом исследуемый микроб-антагонист, продуцирующий антибактериальное вещество. Посев делают по диаметру чашки, которую затем помещают в термостат при температуре, оптимальной для роста.

Продолжительность культивирования определяется скоростью роста антагониста. После завершения роста и диффузии продуцируемого вещества в агаризованную среду, перпендикулярно к выросшему штриху, подсевают штрихами тест-культуры, начиная от краев чашки. Чашки помещают в термостат на 48 часов.

Если изучаемый микроорганизм-антагонист образует диффундирующее в среду вещество, оказывающее антимикробное действие в отношении тест-культур, то рост последних будет начинаться на некотором расстоянии от роста самого антагониста.

Чем больше это расстояние, тем более чувствительна тест-культура к продуцируемому антибиотическому веществу. Нечувствительные микроорганизмы будут развиваться в непосредственной близости от штриха.

Рисунок 1 - Определение антагонистической активности микроорганизмов методом перпендикулярных штрихов (1, 2, 4, 5, 7 - рост нечувствительных, 3, 6 – рост чувствительных к антибактериальному веществу микроорганизма-антагониста (8) тесткультур)

Ход работы:

На поверхность агаризованной среды в чашки Петри засевали штрихом, исследуемый вид бактерий-антагонистов сенной палочки (Bacillus subtilis).

В первой эксперименте к сенной палочки перпендикулярно к штриху, подсевали штрихами тест-культуры бактерий Xahthomonas и Planococcus. Во втором эксперименте подсевали грибы Fusarium moniliforme и Alternaria.

Чашки поместили в термостат на 48 часов.

Результаты:

Рис. 2. Антагонистическая активность микроорганизмов:

1 – Planococcus; 2 – Xanthomonas; 3 – Alternaria; 4 – Fusarium moniliforme.

Вывод:

Bacillus subtilis оказывает нейтральное сдерживающее воздействие по отношению к Xanthomonas и Planococcus. Bacillus subtilis не подавляет рост грибов.