Бактериологическое исследование синегнойнойной палочки.

Для выделения культуры бактерий Pseudomonas aeruginosa (синегноиная палочка) исследуемый материал засевают на питательный агар в чашки Петри с целью получения изолированных колонии. Посевы инкубируют при 37°С в течение суток.

Синегноиная палочка образует круглые плоские слизистые колонии с характерным сине-зеленым пигментом, который диффундирует в агар. При бактериоскопии нативных препаратов в «раздавленной» или «висячей» капле, приготовленных из колоний, обнаруживаются подвижные и слегка изогнутые палочки, в мазках, окрашенных по Граму, — грамотрицательные палочки. Для установления вида получают чистую культуру, которую идентифицируют по биохимическим признакам. Патогенные штаммы Pseudomonas aeruginosa образуют белковые токсины (экзотоксины): гистотоксин, обладающий цитотокси-ческим свойством, и лейкоцидин, лизирующий лейкоциты человека, которые могут быть обнаружены путем биопробы.

Бактериологический метод диагностики дизентерии (шигелл):

1-й день исследования: фекалии больного засевают на среду Плоскирева. (задерживает рост кишечной палочки, так как содержит соли желчных кислот)

Получают Лактозоотрицательные (бесцветные) колонии шигелл на агаре Плоскирева

2-й день исследования: на среде Плоскирева выявляют лак «-» колонии и выборочно ставят с ними реакцию агглютинации с комплексной (полирецепторной) дизентерийной сывороткой. При наличии положительного результата исследуемую культуру агглютинируют видовыми (групповыми) сыворотками: Sh. dysenteriae (группа А), Sh. flexneri (группа В), Sh. boydii (группа C), Sh. sonnei(группа D).

В зависимости от того, с какой видовой сывороткой произошла агглютинациия, определяют серовар внутри вида (группы) с помощью монорецепторных типовых сывороток (за исключением шигелл Зонне) и выдают залючение о виде и сероваре возбудителя

2. Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции

Менингококки обнаруживаются в носоглотке у бактерионосителей и больных, в СМЖ (ликвор) при эпидемическом цереброспинальном менингите.

Материал для исследования берут специальным тампоном из верхних отделов носоглотки. При доставке в лабораторию его предохраняют от охлаждения и высушивания, поскольку менингококк очень чувствителен к воздействию этих факторов.

Ликвор берут путем пункции спинномозгового канала в количестве 2—5 мл и делят на две части: одну центрифугируют и исследуют осадок, к другой добавляют полужидкую питательную среду и выдерживают при 37°С для накопления бактерий. Из исследуемого материала готовят мазки и производят посевы.

Бактериоскопическое исследование. Мазки из осадка ликвора окрашивают по Граму и микроскопируют. При наличии гноя в большинстве случаев обнаруживаются типичные грам- диплококки, имеющие характерное расположение — внутри лейкоцитов, что позволяет сделать окончательное заключение о менингококковой инфекции. При микроскопии мазков из носоглотки бактерионосителей наряду с менингококком обнаруживаются грам+ стафилококки и стрептококки, а также непатогенные нейссерий—бранхамелла и др. бактерии. Дифференцировать их по морфологической картине мазка не представляется возможным.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают петлей на чашки с питательным агаром, содержащим кровь, сыворотку крови или асцитическую жидкость, которые способствуют росту менингококка. Кроме того, используют данную среду с добавлением антибиотика ристомицина (150 ЕД/мл), который задерживает размножение грам+ кокков, содержащихся в исследуемом материале, и тем самым способствует выделению чистой культуры менингококка. Образование колоний менингококка на этих средах наблюдается через 48 ч после инкубации посевов при 37°С. В отличие от колоний других кокков колонии менингококка прозрачны, имеют голубоватый оттенок, ровные края и величину с булавочную головку. Такие колонии пересевают в пробирку со скошенным сывороточным агаром для получения чистой культуры.

Идентификацию чистой культуры, дифференциацию от сапрофитных нейссерий, обитающих в носоглотке, проводят по ряду признаков. Так, менингококк растет только в присутствии нативного белка, в то время как другие нейссерий размножаются на простых средах и образуют пигмент; на средах Гисса с добавлением сыворотки крови менингококк ферментирует до кислоты лактозу и мальтозу.

Фаготипирование менингококка проводят для эпидемиологического анализа. Определение фаготипа производят в реакции агглютинации в пробирках.

Гонококки – возбудители гонореи: воспалительного заболевания в мочеполовых путях

Микроскопический метод: при острой гонорее - обнаруживаются гонококки внутри фагоцитов!

при хронической гонорее – отсутствует данный признак!

Пояснение: