протокол 9 укр
.docТема заняття № 9. Дослідження альтернативних шляхів перетворення глюкози. Метаболізм галактози та фруктози. Цукровий діабет.
Цілі заняття:
-
Пояснювати послідовність ферментативних реакцій та значення пентозофосфатного шляху окислення глюкози.
-
Аналізувати метаболічні шляхи перетворення фруктози і галактози в організмі людини.
-
Проаналізувати основні джерела та шляхи використання глюкози крові.
-
Пояснювати роль гормонів в підтримці постійного рівня глюкози в крові.
-
Пояснювати порушення метаболізму вуглеводів при цукровому діабеті.
Теоретичні питання
1. Пентозофосфатний шлях окислення глюкози:
• схема реакцій окислювальної та неокислювальної стадії ПФШ;
• роль ферментів та коферментів в проходженні реакцій ПФШ;
• сумарне рівняння реакцій ПФШ;
• біологічне значення ПФШ.
2. Ферментативні реакції перетворення фруктози в організмі людини.Сорбітоловий шлях.
3. Спадкові ензимопатії обміну фруктози.
4. Ферментативні реакції перетворення галактози в організмі людини.
5. Спадкові ензимопатії обміну галактози.
6. Схема біохімічних процесів, що забезпечують постійний рівень глюкози в крові.
7. Гормони – регулятори обміну глюкози в організмі. Механізми впливу гормонів на рівень глікемії. Характеристика гіпер-, гіпоглікемії та глюкозурії.
5. Методи визначення вмісту глюкози в крові.
6. Цукровий діабет 1 (інсулінзалежний) та 2 типу (інсуліннезалежний).
7. Біохімічна характеристика та діагностичні критерії цукрового діабету.
8. Використання глюкозотолерантних тестів обміну вуглеводів в організмі людини.
9. Значення визначення вмісту сіалових кислот в крові для діагностики
Практична робота
Завдання 1. Кількісне визначення вмісту глюкози в крові методом В.К.Городецького.
Принцип роботи. Нормальний рівень глюкози в крові забезпечується за рахунок динамічної рівноваги між фізіологічними та біохімічними процесами, що поставляють глюкозу в кров, та відповідними процесами, що зменшують її кількість в плазмі крові за рахунок надходження в клітини внутрішніх органів. В регуляції рівня глюкози в крові приймають участь наступні гормони: інсулін, глюкагон, адреналін, глюкокортикоїди та соматотропні.
Для визначення вмісту глюкози в крові використовується реакція, яка заснована на властивості глюкози окислюватись глюкозооксидазою в глюконову кислоту. Пероксид водню, що утворився розщеплюється пероксидазою і відбувається окислення ортотолуідину. Кількість окисленого барвника прямо пропорційна концентрації глюкози в крові.
Хід роботи. До 1,0мл безбілкового фільтрату крові додають 1,5мл робочого розчину, який містить препарати глюкозооксидози, пероксидази та о-толуідину та 1,5мл ацетатного буферу.
Спостерігають розвиток синього забарвлення. Результати заносять до таблиці:
Вміст пробірок |
Інтенсивність забарвлення з реактивом на глюкозу |
Висновки |
Безбілковий фільтрат крові здорової людини |
|
|
Безбілковий фільтрат крові хворого на цукровий діабет |
|
|
Клініко-діагностичне значення.
В теперішній час досконалим методом визначення глюкози в крові є глюкооксидазний метод за В.К. Городецьким.
У здорової людини вміст глюкози в крові складає від 3.3 до 5.5ммоль/л.
Гіперглікемія спостерігається за наступних станів: цукровий діабет, захворювання печінки та підшлункової залози, підвищення функції щитоподібної залози, кори і мозкового шару наднирників, гіпофіза; механічному та токсичному ураженні ЦНС, травмах та пухлинах мозку, епілепсії, отруєнні окисом вуглецю, стрихніном, сильні емоції і психічні збудження.
Після значного надходження вуглеводів з їжею спостерігають аліментарну гіперглікемію, яка триває 2-3 години.
Гіпоглікемія зустрічається при передозуванні інсуліну під час лікування цукрового діабету, недостатній функції щитоподібної залози, надниркових залоз, гіпофіза; гіперфункції острівків Ларгенганса підшлункової залози (аденоми, гіперплазії, гіпертрофії), довготривалій перерві між прийняттям їжі та при голодуванні.