
- •Возбудитель туляремии
- •1. Морфологические и культуральные свойства возбудителя туляремии
- •3. Антигенное строение
- •4. Патогенность возбудителя туляремии
- •Вопрос 67. Лабораторная диагностика туляремии людей
- •1. Особенности лабораторной диагностики туляремии
- •2. Бактериоскопия
- •4. Проба с тулярином
- •5. Биологический метод
Возбудитель туляремии
1. Морфологические и культуральные свойства возбудителя туляремии
Для туляремии(Francisella tularensis) как одной из природно-очаговых зоонозных инфекций характерна триада биоценоза: возбудитель;резервуары возбудителя;переносчики – кровососущие насекомые.
Выделяют три подвида туляремийного микроба:
неарктический (американский);
среднеазиатский;
голарктический (европейско-азиатский).
Неарктический подвид бактерии в отличие от остальных характеризуется высокой патогенностью для человека и лабораторных животных.
Морфология: туляремийные бактерии имеют очень мелкие размеры – 0,3–0,5 мкм, способные проходить через некоторые бактериальные фильтры. При культивировании на искусственных питательных средах микроб туляремии обычно имеет формы очень мелкого кокка, а в органах животных чаще встречается в виде коккобактерий.
В культурах на питательных средах бактерии туляремии обнаруживают полиморфизм, особенно выраженный у американской разновидности. Микроб неподвижен, спор не образует, имеет небольшую капсулу. В культурах характерно образование бактериями слизи, легко обнаруживаемой при изготовлении мазков на стекле. Бактерии туляремии окрашиваются всеми красками, обычно применяемыми в лабораторной практике, но заметно бледнее, чем многие бактерии.
По Граму туляремийные бактерии окрашиваются отрицательно. Мазки-отпечатки из органов окрашиваются по Романовсокму-Гимзе, при этом туляремийные микробы отличаются от другой (посторонней) флоры более нежной фиолетовой окраской и более мелкими размерами.
Биология, культуральные свойства: микроб туляремии прихотлив в отношении выращивания на искусственных питательных средах. Он не растет на обычном мясопептонном агаре или бульоне. Микробы удается культивировать на желтковых средах при добавлении цистина и других питательных веществ, особенно крови. Температурный оптимум 36–37°. Строгие аэробы. Изолированные колонии удобно получать при посеве на чашки со средой Емельяновой (гидролизат рыбной муки, желатина, дрожжи, хлористый натрий, глюкоза, цистин, агар) или средой Френсиса – (мясо-пептонный агар с 1 %-ным пептоном, 0,5 %-ный хлористый натрий, цистин, глюкоза).
После стерилизации эти среды добавляют к 5—10 мл кроличьей дефибринированной крови. Колонии на этих средах – беловатого цвета с голубоватым оттенком, круглые, с ровным краем, выпуклые, гладкие, блестящие при разреженном посеве они достигают (через несколько дней) 1–2 мм и более в диаметре.
В жидких питательных средах туляремийный микроб размножается хуже, причем рост отмечается лишь на поверхности среды, что связанно с аэрофильностью бактерии. Хорошие результаты выращивания можно получить либо при добавлении к жидким средам коллоидов (куриного желтка, агара и т. д.), либо при аэрации среды. Способность сбраживать углеводы и спирты у микроба туляремии ограничена. Туляремийные микробы ферментируют до кислоты глюкозу, мальтозу, а в ряде случаев – левулезу и маннозу. Лактозу, сахарозу, маннит и ряд других веществ туляремийные бактерии не ферментируют.
2. Устойчивость к физическим и химическим факторам
Устойчивость к физическим и химическим факторам: во внешней среде возбудитель сохраняется длительное время, особенно при низких температурах: в зерне и соломе при температуре ниже 0 °C до 6 мес, в замерших трупах животных – до 8 мес. В естественных условиях обнаруживали возбудители туляремии в воде ручьев, колодцев, а также в соломе и других объектах, это имеет важное эпидемиологическое значение. Туляремийные бактерии нестойки к высоким температурам – кипячение немедленно убивает микробов, а нагревание до 60 °C обуславливает их гибель в течение 20 мин. Под действием прямых солнечных лучей туляремийные бактерии погибают через 20–30 мин., на рассеянном свету жизнеспособность их сохраняется до 3 дней.
Микроб туляремии не стоек к обычным дезинфицирующим веществам – лизолу, фенолу, хлору, сулеме. Особенно чувствительны бактерии к этиловому спирту и при его воздействии погибают менее чем за минуту.