15.Ферментативный гидролиз нуклеиновых кислотДнКазы, рнКазы, рестриктазы.

Более точные сведения о типе межнуклеотидной связи в РНК, как и в случае ДНК, были получены с помощью ферментативного гидролиза.При обработке препаратов ДНК фосфодиэстеразой  (ФДЭ) змеиного яда полимер практически полностью гидролизуется до дезоксинуклеозид-5'-фосфатовЭти данные свидетельствуют об участии 5'-гидроксильных групп всех четырех дезоксинуклеозидов, входящих в состав ДНК, в образовании межнуклеотидной связи. Аналогично, но до 3'-фосфатов дезоксинуклеозидов расщепляется ДНК в присутствии ФДЭ, выделенной из микрококков или из селезенки.,ДНКаза - Сокр. дезоксирибонуклеазы. Любой фермент, который катализирует расщепление фосфорноэфирных связей в цепи ДНК ДНКаза 1, секретируемая поджелудочной железой, является эндонуклеазой, расщепляющей ДНК на короткие фрагменты. Многие другие эндонуклеазы и экзонуклеазы участвуют в процессах репарации и репликации ДНК.Рибонуклеазы (РНКазы)— ферменты—нуклеазы, катализирующие деградацию РНК. Рибонуклеазы различных классов обнаружены во всех живых организмах. Это указывает на тот факт, что расщепление РНК является древним и очень важным процессом. Рибонуклеазы играют важную роль в созревании молекул РНК всех типов, и особенно мРНК и некодирующих РНК. Система деградации РНК также является первым этапом защиты против РНК-содержащих вирусов, а также более тонких клеточных систем иммунитета, например, РНК-интерференции. Эндонуклеазы рестрикции, рестриктазы (от лат. restrictio — ограничение) — группа ферментов, относящихся к классу гидролаз, катализирующих реакцию гидролиза нуклеиновых кислот.

16.Вторичная структура днк.Организация днк эукариот

В 1953 г. Дж. Уотсон и Ф. Крик модель простр. структуры ДНК -имеет форму спирали, образованную двумя полинуклеотидн. цепями, закрученными относительно друг друга и вокруг общей оси. Двойная спираль правозакрученная, полинуклеотидньхе цепи в ней антипараллельны, т.е. если одна из них ориентирована в направлении 3'→5', то вторая - в направлении 5'→3'. Поэтому на каждом из концов молекулы ДНК расположены 5'-конец одной цепи и 3'-конец другой цепи.Все основания цепей ДНК расположены внутри двойной спирали, а пентозофосфатный остов - снаружи. Полинуклеотидные цепи удерживаются относительно друг друга за счёт водородных связей между комплемент. пуриновыми и пиримидиновыми азотистыми осн. А и Т (две связи) и между G и С (три связи Последоват. Нуклеот. 1 цепи полностью комплементарна последовательности нуклеотидов 2 цепи. Поэтому, согласно правилу Чаргаффа, число пуриновых оснований (А + G) равно числу пиримидиновых оснований (Т + С).. Между основаниями двухцепочечной молекулы в возникают гидрофобные взаимод., стабилизирующие двойную спираль.Такая структура исключает контакт азотистых остатков с водой, но стопка оснований не может быть абсолютно вертик.. Пары оснований слегка смещены отн. друг друга. В обр. структуре различают две бороздки - большую, и малую,. Азот. Основ. в обл. большой и малой бороздок взаимодействуют со специф. белками, участвующими в организации структуры хроматина.

17. физ-хим свойства ДНК. Денатурация ДНК. Гибридизация. Гиперхромный эффект.

1хорошо растворимы в воде, практически не растворимы в органических растворителях., 2очень чувствительны к действию температуры и критических значений уровня pH.,3 молекулы ДНК с высокой молекулярной массой, выделенные из природных источников, способны фрагментироваться под действием механических сил, например при перемешивании раствора, 4нуклеиновые кислоты фрагментируются ферментами — нуклеазами. 5Высокая вязкость и плотность растворов 6Денатурация 7Амфотерность.Денатурация свойственна макромалекулам, имеющим пространственную организацию. Она может быть вызвана нагреванием, воздействием химических веществ, которые нарушают Ван-дер-Вальсовы взаимодействия, разрывают водородные связи, стабилизирующие вторичную и третичную структуры.При нагревании происходит разделение двунитевой ДНК на одиночные полинуклеотидные цепи. При медленном охлаждении они снова воссоединяются по принципу комплементарности, образуются нативная двунитевая полинуклеотидная цепь ДНК – этот процесс называется ренатурацией и при быстром охлаждении она не происходит.Спирализованные (организованные) участки нуклеиновых кислот оптически активны, вращают плоскость поляризованного света, поглощают в ультрофиолете при максимуме 260 нм, но интенсивность поглощения нуклеиновыми кислотами ниже, чем смесью нуклеотидов – гипохромный эффект.