2 Материалы и методы
2.1 Материалы и объекты исследования
В качестве объектов исследования взяты следующие гетероциклические соединения:
-O-, N-, S- содержащие гетероциклические соединения |
Структурная формула |
|
1 |
ДАТП-1 |
|
2 |
ДАТП-2 |
|
3 |
ГГХ-3-ЦМ |
|
4 |
ДГП-4-ЦМ |
|
5 |
ГГТХ-6 |
|
Соединения синтезированы и предоставлены нам сотрудниками кафедры органической и биоорганической химии Саратовского национального государственного университета им. Н.Г.Чернышевского (руководитель - профессор, д.х.н. Клочкова И.Н.).
Растительные культуры, используемые в работе:
-пшеница сорта «Алейская» (Triticum durum Desf);
-пшеница сорта Саратовская 55;
-горох сорта «Глориоза» (Pisum sativum);
-фасоль обыкновенная (Phaseolus vulgaris);
-кукуруза сахарная (Zea saccharata Sturtev);
-озимая рожь Волхова(2009;2010;2011г. По госту.)
-озимая рожь Кировская(2009;2010;2011г. По госту.)
-озимая рожь Саратовская(2009;2010;2011г. По госту.)
-озимая рожь Татьяна(2009;2010;2011г. По госту.)
-озимая рожь Марусенька(2009;2010;2011г. По госту.)
2.2 Приготовление рабочих растворов
Рабочие растворы исследуемых соединений готовят следующим образом: навески веществ молярной концентрации растворяют в 1 мл диметилсульфоксида и добавляют до 100 мл дистиллированной воды при интенсивном перемешивании в течение 0,5-1 ч. Следующие концентрации готовят последовательным разбавлением исходных растворов.
2.3 Подготовка биоматериала к исследованиям
2.3.1 Подготовка семян для проведения исследования
Исследуемые семена трижды промывают стерильной дистиллированной водой и подсушивают на фильтровальной бумаге. Далее их помещают на пять минут в стерильный 0,9% физиологический раствор. Семена, всплывшие на поверхность раствора, выбраковывают, а остальные подсушивают на фильтровальной бумаге и используют в экспериментах.
2.4 Изучение действия различных гетероциклических соединений на длину корней и стебля проростков семян
2.4.1 Действие соединений (ГГХ-3-ЦМ, ДГП-4-ЦМ, ГГТХ-6 , ДАТП-1,ДАТП-2) на прорастание семян и рост проростков
Семена всех вышеперечисленных растений в количестве 10 штук каждого помещают в чашки Петри, и заливают растворами соответствующих концентраций изучаемых веществ (2,3·10-2, 2,3·10-3, 2,3·10-4, 2,3·10-5, 2,3·10-6, 2,3·10-7, 2,3·10-8, 2,3·10-9, 2,3·10-10, 2,3·10-11 г/л). В качестве контроля используют отстойную воду. Чашки с семенами выдерживают при естественном освещении и температуре 26-300С трое суток. Результаты экспериментов определяют на 1-ые, 2-ые и 3-ьи сутки. Длину корней проросших семян измеряют с помощью линейки с ценой деления равной 1мм. Статистическую обработку результатов проводят по методике, описанной в работе ( ). Эксперименты проводят в трехкратной повторности.
2.4.2 Действие соединений ГГТХ-6, ДГП-4-ЦМ на рост корней и стеблей проростков ржи различного года созревания и различных сортов
Опыт проводят по методике аналогичной в п. 2.4.1, на семенах ржи 2009, 2010, 2011 года созревания, используя растворы соединений ГГТХ-6 , ДГП-4-ЦМ в следующих концентрациях (2,3·10-2, 2,3·10-3, 2,3·10-4, 2,3·10-5, 2,3·10-6, 2,3·10-7, 2,3·10-8, 2,3·10-9, 2,3·10-10, г/л )
2.4.3 Действие соединений ГГТХ-6, ДГП-4-ЦМ на прорастание семян и рост проростков ржи различных сортов
Опыт проводят по методике аналогичной в п. 2.4.1, на семенах ржи сортов Марусенька, Кировская, Татьяна, Волхова, Саратовская, используя растворы соединений ГГТХ-6 , ДГП-4-ЦМ в следующих концентрациях (2,3·10-2, 2,3·10-3, 2,3·10-4, 2,3·10-5, 2,3·10-6, 2,3·10-7, 2,3·10-8, 2,3·10-9, 2,3·10-10, г/л )