Билет №49

1. Подготовка операционного поля (стр.207). Метод Гроссиха – Филончикова (из лекции).

Накануне операции делают очистительную клизму, больной принимает гигиеническую ванну, ему меняют нательное, постельное белье. Утром в день операции сбривают волосы в области опер.поля сухим способом.

Если есть рана: повязку снимают, рану накрывают стерильной салфеткой, кожу протирают бензином /эфиром (?!?!?!), сбривают волос сухим способом. Все движения – в направлении от раны (чтобы уменьшить степень её загрязненнности). После сбривания волос салфетку снимают, кожу вокруг раны смазывают 5% спирт.р-ром йода и рану накрывают стерильной салфеткой. В операционной рану вновь обрабатывают спирт.р-ром йодаи изолируют стерильн.опер.бельем.

Классический метод. Метод Гроссиха – Филончикова

В качестве антисептика – 5% раствор йода спиртовый. Кратность: 4-х кратное использование раствора. 1-й раз – до обкладывания стерильным бельем. 2-й раз – перед разрезом/уколом. 3-й раз – перед наложением швов. 4-й – после наложения швов. Этот метод имеет ограниченное применение в связи с частыми осложнениями (аллергические реакции, ожоги, дерматит).

2. Определение группы крови по системе а b0 и экспресс-метод определения Rh фактора.

1)С помощью стандартных изогемоагглютинирующих сывороток:

1. под соответствующими обозначениями группы крови на тарелку наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I (бесцветная), II (голубая), III (розовая) групп крови (титр 1:32) в объеме 0,1 мл (одна большая капля около 1 см в диаметре);

2. наносят две серии сывороток каждой группы;

3. шесть капель исследуемой крови (величиной примерно с булавочную головку) по 0,01 мл;

4. последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину (тарелку) в шесть точек, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки (соотношение кровь: сыворотка равно 1:10);

5. осторожно перемешивают разными палочками (или уголками предметных стекол);

6. после перемешивания тарелку периодически покачивают;

7. агглютинация начинается в течение первых 10-30 сек., однако наблюдают до 5 минут ввиду возможности поздней агглютинации;

8. в те капли, где агглютинация произошла, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия (проверка на ложную агглютинацию).

Оценка результата:

• все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинацию - 0(I) группа крови;

• реакция отрицательна с сыворотками A(II) группы и положительна с 0(I) и B(III) группами - A(II) группа крови;

• реакция отрицательна с сыворотками B(III) группы и положительна с 0(I) и A(II) группами - A(III) группа крови;

• реакция во всех шести сыворотках положительна - AB(IV) группа крови. Необходима проверка с сывороткой AB(IV) группы.

2) С помощью моноколональных АТ - цоликлонов анти-А, анти-В. Моноклинальные антитела (ABO-титрующие: цоликлоны анти-А и анти-В) получаются при помощи генной инженерии. Их готовят в промышленных масштабах из крови стерильных мышей, поэтому исключается заражение гепатитом или СПИДом. Цоликлон анти-А окрашивается в голубой цвет; анти-В - в розовый.

Цоликлоны наносятся на планшет одной большой каплей (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти-А, анти-В. Рядом наносится по одной маленькой (0,01 мл) капле исследуемой крови. После смешивания реагентов и крови реакцию агглютинации наблюдают в течение 2,5 минут.

Оценка результатов:

• кровь Oαβ(I) группы - агглютинации нет ни с цоликлоном анти-A, ни с анти-B (эритроциты не содержат антигенов A и В);

• кровь Aβ(II) группы - агглютинация произошла только с цоликлоном анти-A (эритроциты содержат только антиген A);

• кровь Bα(III) группы - агглютинация произошла только с цоликлоном анти-B (эритроциты содержат только антиген B);

• кровь ABO(IV) - агглютинация наблюдается с обеими цоликлонами (эритроциты содержат оба антигена). В этом случае производится контрольное исследование дабы исключить аутоагглютинацию. Одна капля (0,1 мл) изотонического раствора хлорида натрия смешивается с каплей (0,01 мл) исследуемой крови - реакция агглютинации должна отсутствовать.