Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
посібник лаб.роб..doc
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.03.2025
Размер:
1.47 Mб
Скачать

Контрольні запитання та завдання

  1. Що таке білки?

  2. На які класи ділять білки з точки зору виконуваних ними функцій?

  3. Як розподіляють білки за формою молекул?

  4. На які групи ділять білки за фізико-хімічними властивостями?

  5. Що ви знаєте про функціональну класифікацію білків?

  6. Як ділять білки за особливостями хімічної будови?

  7. На які підгрупи ділять складні білки?

  8. Які білки відносять до простих? Наведіть приклади.

  9. Наведіть приклади складних білків.

  10. Що таке ізоелектрична точка? ...рІ?

  11. Що таке денатурація?

  12. Якими методами можна осаджувати білки?

  13. На які групи ділять методи осадження білків?

  14. Чим оборотно осаджують білки? ...необоротно осаджують білки?

  15. Білкова частина вірусу тютюнової мозаїки складається з 2130 субодиниць, молекулярна маса кожної 17500. Розрахувати загальну довжину всіх поліпептидних ланцюгів, якщо частка спіральної конфігурації в них рівна 30%.

Література

Гонський Я. І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини. Тернопіль: Укрмедкнига, 2004 рік – стор. 45 – 62.

Шевряков М.В., Яковенко Б.В., Явоненко О.Ф. Практикум з неорганічної хімії. Суми.: Університетська книга, 2003 рік – стор. 29 – 33.

Фримантл М. Химия в действии. М.: Мир, 1991 год – т.2, стор. 530 – 535.

Виконання роботи

ДОСЛІД 1. ВИСОЛЮВАННЯ БІЛКІВ АМОНІЙ СУЛЬФАТОМ

У пробірку налийте 2 мл розчину білка курячого яйця, додайте рівний об’єм насиченого розчину амоній сульфату (зверніть увагу на те, щоб розчин амоній сульфату був дійсно насичений, тобто на дні пляшки з реактивом був осад). Збовтайте вміст пробірки. Спостерігайте випадання осаду глобулінів. Відфільтруйте осад, а фільтрат розділіть навпіл.

До вмісту першої пробірки долийте рівний об’єм дистильованої води. Спостерігайте розчинення осаду. Про що це свідчить?

Дайте вмісту другої пробірки відстоятися 5-7 хвилин, потім відфільтруйте осад. У розчині залишаться альбуміни.

Фільтрат розділіть порівну на дві пробірки.

Одну пробірку обережно нагрійте до кипіння. Спостерігайте випадання осаду альбумінів внаслідок денатурації.

До вмісту другої пробірки додайте кристалічний порошок амоній сульфату до припинення його розчинення. Спостерігайте появу помутніння внаслідок випадання осаду альбумінів.

Відфільтруйте добутий осад, а фільтрат перевірте на відсутність білків шляхом виконання біуретової реакції. Для цього до фільтрату додайте рівний об’єм розчину натрій гідроксиду і кілька крапель купрум (ІІ) сульфату. Блакитне забарвлення, яке не змінюється, свідчить про негативну біуретову реакцію.

Опишіть спостереження.

ВИСНОВОК: У висновку зазначте, про що свідчить негативна біуретова реакція та які умови розділення білків за допомогою амоній сульфату. Зробіть також висновок про оборотність висолювання білків солями лужних металів (згадайте, що йон амонію в силу його малих розмірів дуже нагадує за властивостями йони лужних металів).

ДОСЛІД 2. ОСАДЖЕННЯ БІЛКІВ ДІЄЮ ВИСОКИХ ТЕМПЕРАТУР

У п’ять пробірок налийте по 2 мл розчину білка.

Вміст першої пробірки нагрійте. Що спостерігаєте?

До другої пробірки додайте одну краплину 1%-вого розчину оцтової кислоти і нагрійте. Спостерігайте більш повне і прискорене випадання осаду білка в цій пробірці. Поясніть спостереження.

У третю пробірку додайте близько 0,5 мл 10%-вого розчину оцтової кислоти і вміст пробірки прокип’ятіть. Що спостерігаєте? Чому не утворюється осад білка?

У четверту пробірку додайте 0,5 мл 10%-вого розчину оцтової кислоти, декілька краплин насиченого розчину натрій хлориду і нагрійте. Спостерігайте випадання осаду білка. Як це можна пояснити?

У п’яту пробірку додайте 0,5 мл розчину натрій гідроксиду і прокип’ятіть. Спостерігайте відсутність осаду навіть при тривалому нагріванні. Як ви це поясните?

За результатами спостережень заповніть таблицю:

пробірки

Вміст пробірки

Вплив на вміст

пробірки

Спостереження

Висновки

1

2 мл розчину білка

Нагрівання не до кипіння

2

2 мл розчину білка + 1 крапля 1%

р-ну СН3СООН

Ще менш тривале нагрівання

3

2 мл розчину білка + 0,5 мл 10% р-ну СН3СООН

Тривале кип’ятіння

4

2 мл розчину білка + 0,5 мл 10% р-ну СН3СООН + кілька крапель р-ну NaCl

Кип’ятіння

5

2 мл розчину білка + кілька крапель р-ну

NaOH

Тривале кип’ятіння

ВИСНОВОК: У висновку зазначте роль температури і умов осадження білків в ізоелектричному стані білка.

ДОСЛІД 3. ОСАДЖЕННЯ БІЛКІВ ДІЄЮ КОНЦЕНТРОВАНИХ МІНЕРАЛЬНИХ КИСЛОТ

У три пробірки обережно налийте по 1 мл концентрованих розчинів кислот: у першу – хлоридної, у другу – сульфатної, у третю – нітратної. У кожну з них по стінці обережно долийте по 0,5 мл розчину білка. Спостерігайте утворення білого кільця осаду на межі двох рідин в кожній з пробірок. Про що це свідчить?

Обережно збовтайте вміст пробірок. Спостерігайте розчинення денатурованого білка в першій і другій пробірках і відсутність розчинення – в третій.

Результати спостережень занесіть у таблицю:

№ пробірки

Вміст пробірки

Дія

Спостереження

Висновок

1

Хлоридна кислота + білок

Додавання білка

Збовтування

2

Сульфатна кислота + білок

Додавання білка

Збовтування

3

Нітратна кислота + білок

Додавання білка

Збовтування

ВИСНОВОК: Зробіть висновок про денатуруючий вплив неорганічних кислот на білки.

ДОСЛІД 4. ОСАДЖЕННЯ БІЛКІВ ОРГАНІЧНИМИ РОЗЧИННИКАМИ

У дві пробірки налийте по 1 мл розчину білка курячого яйця і додайте на кінчику шпателя кристалічного натрій хлориду. Енергійно збовтайте вміст пробірок. В першу долийте 1-2 мл спирту, в другу – 2 мл ацетону. Знову збовтайте вміст пробірок. Через 3 хвилини спостерігайте випадання осаду в обох пробірках.

ВИСНОВОК: Зробіть висновок про вплив на білки органічних розчинників.

ДОСЛІД 5. ОСАДЖЕННЯ БІЛКІВ СОЛЯМИ ВАЖКИХ МЕТАЛІВ

У дві пробірки налийте по 1 мл розчину білка курячого яйця. В першу пробірку додайте краплинами розчин купрум (ІІ) сульфату, в другу – плюмбум (ІІ) ацетату. Спостерігайте утворення осаду в обох пробірках. Поясніть свої спостереження.

Додайте в обидві пробірки надлишок відповідних солей. Що спостерігаєте?

ВИСНОВОК: У висновку відмітьте, як впливають на білок розчини солей важких металів.