Лабораторная работа № 3
Тема: Определение кислотности желудочного сока
Цель: Научиться определять свободную и связанную НСl и общую кислотность желудочного сока (ЖС). Различные виды патологии
(гипоацидис, гиперацидис, ахлоргидрия, ахилия) возможные при гастритах, раке желудка, злокачественном малокровии.
Принцип метода: В состав ЖС входят: вода, белки, ферменты (гастриксин, пепсин, липаза), соляная кислота, муцин, хлористый натрий, кислые фосфорнокислые соли и другие вещества. Соляная кислота обладает дезинфицирующим действием: в ее присутствии погибает большинство бактерий. При пониженной концентрации или полном отсутствии соляной кислоты в желудке развиваются гнилостные процессы и процессы брожения и накапливаются органические кислоты: молочная, масляная, уксусная и др.
Опыт 1. Качественный анализ желудочного сока.
1. Определение реакции ЖС. Одним из факторов, определяющих скорость переваривания белков в желудке, является кислотность ЖС. 1 каплю профильтрованного ЖС наносят стеклянной палочкой на синюю лакмусовую бумажку. В присутствии кислореагирующих веществ лакмусовая бумажка приобретает красный цвет. При некоторых заболеваниях в ЖС могут полностью отсутствовать кислореагирующие вещества.
Результат анализа:
Вывод:
2. Проба на свободную соляную кислоту. 1 каплю профильтрованного ЖС наносят на красную бумажку «Конго». В присутствии свободной соляной кислоты бумажка приобретает синий цвет.
Результат анализа:
Вывод:
3. Проба на молочную кислоту. Реакция на молочную кислоту основана на ее способности образовывать с солями трехвалентного железа молочнокислое железо, окрашенное в желто-зеленый цвет.
К 20 каплям 1 % раствора фенола добавляют 1-2 капли 1 % раствора хлорного железа. Получается фенолят железа, окрашенный в фиолетовый цвет. В пробирку с реактивом добавляют по каплям ЖС, содержащий молочную кислоту. В присутствии молочной кислоты синяя окраска переходит в желто-зеленую за счет образования молочнокислого железа. При одновременном присутствии соляной кислоты жидкость обесцвечивается.
Результат анализа:
Вывод:
4. Реакция на кровь с бензидином. В пробирку отмеривают 1 мл ЖС, добавляют 4-5 капель 0,2 % спиртового раствора бензидина и 5 капель 1 %раствора пероксида водорода. Если ЖС содержит кровь, то в результате окисления бензидина развивается синее окрашивание.
Результат анализа:
Вывод:
Опыт 2. Количественный анализ желудочного сока.
Определение общей кислотности, общей соляной кислоты, свободной соляной кислоты и связанной кислоты в одной порции ЖС.
Принцип определения кислотности ЖС основан на титровании свободной НСl и кислореагирующих веществ 0,01Н NaOH.
Общая кислотность ЖС выражается количеством мл 0,01Н NaOH, пошедших на титрование 100 мл ЖС в присутствии индикатора – фенолфталеина.
В норме общая кислотность равна 40-60 единицам (Е).
Свободную соляную кислоту принято выражать количеством мл 0,01Н NaOH, пошедших на титрование 100 мл ЖС, в присутствии индикатора метилового желтого.
В норме содержание свободной соляной кислоты равно 20-40 (Е).
В норме содержание связанной соляной кислоты равно 10-20 (Е).
Ход работы: В колбу для титрования вносят пипеткой 0,5 мл исследуемого ЖС. Добавляют 1 каплю раствора метилового желтого и 2 капли раствора фенолфталеина. При наличии в ЖС свободной соляной кислоты он окрашивается в красный цвет с розовым оттенком, при ее отсутствии появляется сразу желтая окраска. Пробу титруют 0,01Н NaOH до появления оранжевой окраски и отмечают количество щелочи в мо, пошедшее на титрование свободной НСl (1пункт титрования). Далее титрование продолжают до появления лимонно-желтой окраски (2 пункт титрования) и снова отмечают количество щелочи в мл, израсходованное сначала титрования до 2 пункта. Затем титрование продолжают до появления розовой окраски (3 пункт титрования). Отмечают количество щелочи, пошедшее на титрование от начала до 3 пункта титрования.
Формулы для расчета:
Количество свободной HCl:
где а – количество 0,01Н NaOH, пошедшего на титрование до 1 пункта; 0,5 – объем исследуемого желудочного сока.
Количество общей HCl:
где в – среднее арифметическое количество щелочи, пошедшее на титрование до 2 и 3 пунктов.
Количество связанной HCl:
HClсвяз. = HClобщ. - HClсвоб.
Общая кислотность (ОК):
где к – количество 0,01Н NaOH, пошедший на титрование до 3 пункта.
Таблица результатов анализа
№ вар. |
Пункт титрования |
Индикатор |
Окрашивание |
Кол-во NaOH, пошедшего на титрование, мл |
Кол-во HCl |
Общая кислотность |
|||||
V1 |
V2 |
V3 |
Vср |
Своб. |
Общ. |
Связ. |
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Вывод: