Практическое занятие № 33

Тема: «Биохимия соединительной ткани и внеклеточного матрикса (ВКМ)» (лабораторно-практическое занятие)

Мотивация: Знание строения, свойств, функций соединительной ткани и компонентов внеклеточного матрикса дает возможность понимания причин патологий, связанных с нарушением их структуры и функций.

Общая цель: овладение современным уровнем естественнонаучных знаний, позво­ляющих выработать понимание молекулярных основ функционирования систем ротовой полости и получить представления о современных возможностях клинико-лабора­торной диагностики патологии соединительной ткани. Полученные по данной теме знания формируют общекультурные и профессиональные компетенции (ОК-1, ПК- 3, ПК- 9, ПК- 20) , необходимые в последующем для изучения вопросов профессиональной направленности.

В результате изучения темы студенты должны:

- знать основные белки соединительной ткани (коллаген, эластин), особенности

аминокислотного состава, строение, функции; строение ГАГ и протеогликанов, их роль

в организации внеклеточного матрикса (ВКМ); адгезивные белки ВКМ, их

в межклеточном взаимодействии и развитии опухолей.

- уметь интерпретировать роль важнейших макромолекул ВКМ (белки, ГАГ) в структурной организации; давать объяснения клиническим проявлениям недостаточности витамина С, В6; анализировать результаты лабораторных исследований на содержание оксипролина в биологических жидкостях; объяснять молекулярные механизмы, лежащие в основе нарушений структуры и функций ВКМ в развитии заболеваний.соединительной ткани.

- владеть медико-функциональным понятийным аппаратом (терминами): оксипролинурия, мукополисахаридозы, коллагенозы.

Этапы проведения занятия:

1. Вводная часть

2. Основная часть занятия: лабораторная работа, семинар

3. Заключительная часть занятия

Перечень контрольных вопросов для самоконтроля знаний:

1. Особенности синтеза, внутриклеточных и внеклеточных посттрансляционных модификаций белков межклеточного матрикса.

2. Строение и функции гликозамингликанов.

3. Наследственные и приобретенные нарушения обмена белков соединительной ткани.

Ориентировочная основа деятельности студентов для проведения лабораторной работы: Количественное определение витамина с в моче

Принцип метода: Метод основан на той же реакции, что и метод определения витамина С в продуктах. Расчет содержания аскорбиновой кислоты в моче проводят по формуле:

0,088 × А × В

Х = --------------------------

Б

Х – содержание аскорбиновой кислоты в мг в суточном количестве мочи

0,088 – содержание аскорбиновой кислоты, соответствующее 1 мл 0,001 н

раствора натриевой соли 2,6–дихлорфенолиндофенола, мг

А – результат титрования 0,001н раствором 2,6–дихлорфенолиндофенола, мл

Б - объем мочи, взятой для анализа, мл

В – пересчет на средний суточный диурез (мужчины – 1500 мл, женщины – 1200 мл)

Порядок выполнения работы:

1). В стакан (колбу) отмеривают 10 мл свежесобранной мочи, добавляют 10 мл дистиллированной воды, перемешивают и подкисляют 20 каплями 10% раствора Hcl.

2). Содержимое стакана (колбы) титруют из бюретки 0,001 н раствором 2,6–дихлорфенолиндофенола до появления устойчивой розовой окраски. Конечную точку титрования легче заметить в сравнении с рядом стоящим раствором, содержащим 10 мл мочи и 10 мл воды. Количество 2,6–дихлорфенолиндофенола, пошедшего на титрование и количество мочи, взятой для исследования, вносится в формулу для расчета содержания витамина С.

Полученные данные содержания витамина С в суточном количестве мочи сопоставить с показателями выделения аскорбиновой кислоты в норме. В выводе указать, от чего может зависеть изменение экскреции витамина С за сутки.

Клинико-диагностическое значение. Количество витамина С, выделяемое с мочой, зависит от потребности в нем организма, возраста, способности слизистой кишечника к всасыванию и др. В среднем, здоровый человек за сутки выделяет 20-40 мг витамина С. При гиповитаминозе, острых и хронических инфекционных заболеваниях уровень витамина С в моче снижается; при цинге - ниже 10 мг/сут.

Задания для самостоятельной работы студентов в неучебное время ( максимальное количество баллов – 1) :

1. Основным внеклеточным белком соединительной ткани является:

а) альбумин б) α₂-глобулин

в) гистон г) миозин д) коллаген

2. Основными аминокислотами в структуре коллагена являются:

а) гли-ала-про б) асп-лиз-мет

в) вал-лей-изолей г) гли-глу-сер д) фен-тир-три

3. Посттрансляционная модификация коллагена включает процесс гидроксилирования аминокислоты:

а) фен б) про

в) тир г) гли д) вал

4. Посттрансляционная модификация коллагена (гидроксилирование пролина) нарушается при авитаминозе:

а) В₁ б) В₁₂ в) К г) фолиевой кислоты д) С

5. Для проявления активности ЛАО необходим:

а) вит. РР б) Вит.С

в) вит. В6 г) вит. В12 д) вит. К

6. Компонентом внеклеточного матрикса соединительной ткани является:

а) глюкуроновая кислота б) гиалуроновая кислота

в) пировиноградная кислота г) аргининоянтарная кислота

д) щавелевоуксусная кислота

7. При деструктивных процессах в пародонте в слюне увеличивается содержание:

а) белков б) неорганических кислот

в) аминокислот г) сиаловых кислот

8. К неколлагеновым белкам соединительной ткани относится:

а) фибриноген б) фибронектин

в) фибрин г) альбумин д) гистоны

9. Выделение оксипролина с мочой взрослого человека в норме составляет:

а) 1-2 г/л б) 3,3-5,5 ммоль/л

в) 270-600 мг/сут г) 60-80 г/л д) 15-20 мг/сут

10. Мукополисахаридозы – заболевания, связанные с нарушением катаболизма:

а) коллагена б) эластина

в) гликопротеинов г) ГАГ д) фибронектина