- •Вводные замечания. Ферменты.
- •Лабораторная работа №1.
- •1.3. Ферментативный гидролиз крахмала
- •1.3.1 Ход работы:
- •1.4 Кислотный гидролиз крахмала.
- •1.5. Кислотный гидролиз клетчатки.
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №2. «Качественные реакции на дегидрогеназы»
- •2.4 Ход работы:
- •2.5 Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №3 «Определение активности каталазы крови и пероксидазы молока»
- •3.2 Количественное определение каталазы крови
- •3.3 Качественная реакция на пероксидазу молока.
- •3.5 Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №4. «Рефрактометрическое определение общего белка в сыворотке крови. Электрофорез белка»
- •4.6 Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №5
- •15.5 Контрольные вопросы
- •Литература
Лабораторная работа №1.
«Ферментативный и кислотный гидролиз крахмала и клетчатки»
1.1 Цель работы: изучить физико-химические свойства ферментов и особенности их действия в разных условиях.
1.2 Реактивы и оборудование: 0,8%-ный раствор хлорида натрия, 1%-ный раствор сульфата меди, 0,2%-ный раствор соляной кислоты, 1%-ный раствор соды, раствор Люголя, 10%-ный и 40%-ный растворы NaOH, 1%-ный раствор
крахмала, слюна, концентрированная соляная кислота, 72%-ный раствор H2SO4, штатив с пробирками, водяные бани, термометры, спиртовки или электроплитки, лакмусовая бумага, вата, колбы на 100 мл.
1.3. Ферментативный гидролиз крахмала
1.3.1 Ход работы:
В пробирку собрать 2-3 мл слюны и разбавить ее водой в 5-6 раз. Взять 6 пробирок, пронумеровать и налить в каждую примерно по 1мл разбавленной слюны. Слюну в первой пробирке прокипятить, во вторую пробирку добавить 1мл физиологического раствора, в третью 1 мл раствора CuSО4, в четвертую 1 мл раствора HCI, в пятую 1 мл раствора соды.
Во все шесть пробирок прилить но 5 мл раствора крахмала и поставить их в водяную баню при температуре (37 - 40°С) на 15-20 минут, после чего пробирки достать, охладить и проверить активность фермента амилазы:
- добавить во все 6 пробирок по 1 капле раствора Люголя – отметить результаты;
- проделать реакцию Троммера с пробой из пробирок, где нет синего окрашивания.
Разобрать полученные данные, сделать выводы и занести их в таблицу.
Написать схему гидролиза крахмала.
Таблица 1. Особенности действия фермента амилазы.
№
п/п |
Субстрат |
Ферменты |
Дополнительный фактор |
Результаты опыта |
Выводы |
|
|
|
|
Реакция |
Реакция |
|
|
п.п. |
|
|
с йодом |
Троммера |
|
|
1 |
крахмал |
амилаза, |
нагревание |
|
|
|
2 |
----------- |
|
физ. раствор |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3 |
----------- |
|
CuS04 |
|
|
|
4 |
----------- |
|
НСl |
|
|
|
5 |
----- ---- |
|
Na2CO3 |
|
|
|
б |
---------- |
|
нагревание |
|
|
|
7 |
сахароза |
|
нагревание |
|
|
|
