УО «МИНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ КОЛЛЕДЖ»

ОТДЕЛЕНИЕ «МЕДИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ДЕЛО»

КУРС II

АНАЛИТИЧЕСКАЯ ХИМИЯ

Лекция № 15

Тема: «Хроматография»

Подготовлена преподавателем

аналитической химии

Пазюк Н.И.

.

Тема: «Хроматография»

План изложения материала

1. Основные понятия и термины.

2. Сущность метода.

3. Адсорбционная (молекулярная) хроматография.

4. Ионообменная хроматография.

5. Распределительная хроматография.

6. Молекулярно-ситовая хроматография.

7. Аффинная (биоспецифическая) хроматография.

1. Основные понятия и термины.

Хроматография – это физико-химический метод разделения и анализа смесей газов, жидкостей или растворенных веществ сорбционными методами в динамических условиях.

Сорбция (от лат.sorbere – поглощать) – поглощение газообразных или растворенных веществ твердыми телами или жидкостями из окружающего пространства.

Состоит из двух процессов: адсорбции и абсорбции.

Адсорбция (лат.ad. – при, к слову sorbere – глотать, поглощать) – поверхностное поглощения, т.е. поглощения поверхностным слоем.

Абсорбция (лат. absorption – всасывание, поглощение) – поглощение вещества всем объемом поглощающего тела.

Десорбция (лат.de – приставка, означающая отделение, удаление, отмену, понижение) – процесс обратный сорбции.

Адсорбент – вещество, способное поглощать другое вещество.

Адсорбат – вещество, которое уже адсорбировалось.

Сорбент – вещество, составляющее неподвижную фазу.

Сорбат – анализируемая смесь веществ, составляющая наряду с растворителем или носителем подвижную фазу.

2. Сущность метода.

Хроматография – метод разделения смесей – основана на различном распределении компонентов смеси между двумя фазами – неподвижной (сорбентом) и подвижной (растворитель + сорбат) и осуществляется путем пропускания подвижной фазы через неподвижную. При прохождении сорбата через сорбент непрерывно происходят взаимосвязанные процессы сорбции – десорбции. С течением времени устанавливается адсорбционное равновесие.

Хроматографические методы очень многообразны. В основу их классификации положены следующие признаки:

• по агрегатному состоянию сорбента и сорбата хроматографию разделяют на газовую и жидкостную. Газовая хроматография включает газожидкостную и газотвердофазную, жидкостная – жидкостно-твердофазную и жидкостно-гелевую. Первое слово в названии метода характеризует агрегатное состояние подвижной фазы, второе – неподвижной;

• по механизму взаимодействия сорбента и сорбата выделяют адсорбционную (молекулярную), ионообменную, распределительную, молекулярно-ситовую и аффинную хроматографию;

• по технике выполнения процесса выделяют колоночную хроматографию, когда разделение проводят в специальных колонках, и плоскостную хроматографию, когда разделение проводится на специальной бумаге (бумажная хроматография) или в тонком слое сорбента (тонкослойная хроматография).

3. Адсорбционная (молекулярная) хроматография.

Метод основан на различной способности молекул к адсорбции, что обусловлено строением молекул и их молярной массой.

Через колонку, заполненную адсорбентом (порошкообразный оксид алюминия, оксид кальция, сахар, крахмал, целлюлоза, активированный уголь) пропускают смесь растворенных веществ, которые следует разделить. Чем слабее адсорбируется вещество, тем больше скорость его перемещения по колонке и тем дальше оно перемещается от линии старта.

Чтобы растворенное вещество хорошо адсорбировалось на поверхности адсорбента, надо подобрать такой растворитель, который сам бы не адсорбировался.

Затем колонки промывают чистым растворителем (процесс элюирования от лат. eluere – мыть, смывать). При этом первыми вымываются слабо адсорбируемые молекулы, а последними – молекулы, наиболее прочно связанные с адсорбентом.

В медицине широко используется гемосорбция, при которой применяется активированный уголь для очистки крови от токсических веществ.