Практичні роботи Завдання 1. Виявлення глюкози в зразках сечі № 1-4. Метод Фелінга.

Широко застосовувані методи виявлення та кількісного визначення цукру в біологічних рідинах, особливо в сечі, грунтуються на редукуючих властивостях глюкози.

Метод Фелінга.

Принцип методу. Реакція заснована на властивості глюкози, завдяки наявності альдегідної групи, при нагріванні в лужному середовищі окислюватися, відновлюючи при цьому блакитний гідроксид міді (II) Си (ОН)₂ в жовтий гідроксид міді (І) СиОН. При подальшому нагріванні утворюється оксид міді (І) СиО цегляно-червоного кольору. Реактив Фелінга, що використовується в реакції, отримують при змішуванні рівних кількостей розчинів сульфату міді (розчин Фелінга І) і лужного розчину сегнетової солі (розчин Фелінга II). В результаті взаємодії сульфату міді з лугом утворюється гідроксид міді (II), що одразу вступає в реакцію з сегнетовою сіллю з утворенням темно-синього розчину мідно-винного комплексу (розчину Фелінга).

Весь гідроксид міді (II) в реактиві Фелінга комплексно зв'язаний з сегнетовою сіллю, що протидіє утворенню з нього при нагріванні чорного осаду оксиду міді (II) та спотворенню отриманих результатів.

Хід роботи. В пробірку вносять по 10 крапель розчинів Фелінга І і II, змішують, додають 20 крапель досліджуваної сечі, нагрівають до кипіння. Якщо сеча містить глюкозу, випадає жовтий осад CuOH або цегляно-червоний Си₂О, інтенсивність забарвлення яких і кількість залежать від концентрації глюкози в досліджуваному зразку.

Клініко-діагностичне значення. Наявність глюкози в сечі (глюкозурія) свідчить про підвищення рівня глюкози в крові вище 10 ммоль/л (нирковий поріг для глюкози). Глюкоза в сечі появляється при цукровому діабеті, аліментарній гіперглікемії, збудженні ЦНС, ураженні нирок, гіпертиреозі, акромегалії тощо.

Завдання 2. Визначення кетонових тіл в зразках сечі № 1-4 .

Принцип методу. Ацетон та ацетооцтова кислота з нітропрусидом натрію в лужному середовищі утворюють продукти реакції, забарвлені в червоний колір:

СН₃ - СО - СНз + Na₂ [Fe (CN)₅ NO] + 2NaOH→

Na4 [Fe (CN)_S NO =CHCOCH₃] +2H₂О.

При дії концентрованої оцтової кислоти утворюється продукт вишнево-червоного кольору:

Na4 [Fe (CN_S) NO =CHCOCH₃] +CH₃COOH

→Na3 [Fe (CN₅) NOCH3COCH3] + CH3COONa.

Ацетооцтова кислота (в енольній формі) здатна також утворювати з хлоридом заліза (III) комплексну сполуку вишнево-червоного кольору.