- •Тема 1. Изучение устройства микроскопа, техника микроскопирования
- •1.1. Цель работы:
- •1.2. Общие теоретические сведения
- •2.3. Устройство микроскопа
- •1.4. Основные технические характеристики микроскопа.
- •1.5. Работа с микроскопом.
- •1.6. Микроскопия в тёмном поле
- •1.7. Фазово-контрастная микроскопия
- •1.8. Люминесцентная, или флуоресцентная, микроскопия
- •1.9. Электронная микроскопия
- •Тема 2. Клетка как основа жизни
- •2.1. Цель работы:
- •2.2. Величина и форма клеток
- •2.3. Структура клетки
- •Тема 3. Современная наука о питании, роль и значение основных компонентов пищи
- •2.1 Цель работы:
- •2 Общие теоретические сведения
1.4. Основные технические характеристики микроскопа.
Качество микроскопа определяется его увеличительной и разрешающей способностями.
Коэффициент увеличения микроскопа определяется произведением увеличения окуляра (К) и увеличения объектива (V) и выражается формулой:
D=KV (1)
Теоретически микроскоп может дать увеличение 2000х и более раз. Однако, следует различать полезное и бесполезное увеличение микроскопа. Пределы полезного увеличения в обычно используемых микроскопах достигают 1400х. При превышении границ полезного увеличения возникают дифракция и другие явления, обусловленные волновой природой света, которые незаметны в пределах полезного увеличения, но приводят к оптическим ошибкам в зоне бесполезных увеличений. Увеличение, которое даёт возможность рассматривать объект под предельным углом зрения и есть полезное увеличение. Оно обычно превышает числовую апертуру объектива в 500-1000 раз. Например, для объектива с увеличением 40х, имеющего числовую апертуру 0,65, полезное увеличение составляет 325-650х. С помощью этого увеличения можно различить все структуры, разрешаемые данным объективом. Поэтому для объектива 40х следует брать окуляр 15х, чтобы получить увеличение в пределах полезного. Какие бы более сильные окуляры не применялись, более тонких деталей структур выявить не удаётся. Более того, применение окуляра с большим увеличением приведёт к уменьшению количества света, попадающего в глаз наблюдателя, и возрастанию искажений, вызываемых дефектами зрения.
Если объектив имеет увеличение 90х (числовая апертура 1,25), то полезное увеличение для него равно х1250. Следовательно, и здесь не надо применять окуляры с увеличением более 15х, чтобы не выходить за пределы полезного увеличения. Бесполезные увеличения могут принести пользу лишь при подсчёте мельчайших частиц в поле зрения, если при этом не требуется рассмотрения их структуры.
Разрешающая способность микроскопа. Эта характеристика особенно важна при исследовании микрообъектов и их структур.
Если увеличительная способность микроскопа зависит от объектива и окуляра, то разрешающая способность определяется главным образом объективом и конденсором.
Расчёт разрешающей способности микроскопа проводят по формуле:
d=λ/2A (2)
Максимальная разрешающая способность светового микроскопа 0,2 мкм.
Пример расчёта разрешающей способности микроскопов.
Если увеличение объектива 40х, А= 0,65, то
d = 0,55мкм/(2 х 0,65) = 0,42 мкм
Если V объектива 90х, А = 1,25, то
d = 0,55мкм/(2 х 1,25) = 0,22 мкм
Разрешающая способность микроскопа тем лучше, чем меньше абсолютная величина d.
Задание:
1) Определить какой окуляр необходимо выбрать для объектива 40х, апертура 0,65; 90х, апертура 1,25;
2) Пользуясь справочным руководством по микроскопам МИКМЕД-1 выписать размеры объективов, апертуру, выбрать окуляры с полезным увеличением.
Контрольные вопросы:
Что такое «увеличительная способность микроскопа», как её определить?
Что такое «полезное « и «бесполезное» увеличение микроскопа?
Как определить разрешающую способность микроскопа? Какова максимальная разрешающая способность светового микроскопа?
Как построен окуляр, назовите его главные части?
Каково назначение и как построена бинокулярная насадка?
