Федеральное агентство по здравоохранению и социальному развитию

ГОУ ВПО «Ижевская государственная медицинская академия»

Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии

Составитель: старший преподаватель, к.б.н.,

Т.Г.Заболотская

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА

ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Малый практикум для самостоятельной

работы студентов

Ижевск

2007

ПРАКТИКУМ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

студента ___________группы ___________________факультета

______________________учебного года

________________________________________________________

(Ф.И.О.)

Преподаватель________________________________________

(Ф.И.О.)

Лабораторное занятие №12

ТЕМА: Возбудители вирусных респираторных инфекций: гриппа, парагриппа,

кори, эпидемического паротита, краснухи, атипичной пневмонии.

Аденовирусные инфекции.

ЦЕЛЬ: усвоить принципы диагностики, лечения и профилактики респираторных

заболеваний, вызванных вирусами.

ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ:

1. Методы диагностики вирусных инфекций.

2. Возбудители гриппа. Таксономия. Характеристика. Микробиологическая

диагностика. Специфическая профилактика.

3. Возбудители ОРВИ: парамиксо-, корона-, рео-, рино-, аденовирусы.

Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая

профилактика и лечение.

4. Парамиксовирусы. Таксономия. Характеристика. Вирус паротита.

Лабораторная диагностика парамиксовирусных инфекций.

Специфическая профилактика и лечение.

5. Вирус кори. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика.

Специфическая профилактика.

6. Вирус краснухи. Таксономия и характеристика. Лабораторная диагностика.

Специфическая профилактика.

7. Аденовирусы. Классификация. Лабораторная диагностика, профилактика.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Просмотреть культуру фибробластов в норме и при ЦПД вируса.

2. Зарисовать реакцию гемадсорбции на культуре клеток.

3. Зарисовать ЦПД на культуре клеток при аденовирусной инфекции

4. Провести идентификацию вируса гриппа в РТГА на стекле. Сделать вывод..

5. Оценить готовый результат определения антител в парных сыворотках

с помощью РТГА при диагностике гриппа

6. Оценить готовый результат РСК при диагностике кори.

7. Выписать бланки - направления для исследования различного материала

при респираторных вирусных инфекциях.

8. Описать иммунопрепараты, используемые в диагностике, лечении

и профилактике данных инфекций.

Методы диагностики вирусных инфекций.

Лабораторная диагностика вирусных инфекций складывается из 4 групп методов:

1/ Экспресс-методы: быстрое обнаружение возбудителя или его компонентов

непосредственно в клиническом материале от больного.

2/ Вирусологический метод: выделение вируса и его идентификация.

3/ Серологический метод: определение противовирусных антител.

4/ Молекулярно-биологические методы: выявление и идентификация вирусных нуклеиновых кислот.

Выбор метода лабораторной диагностики определяется характером заболевания, предполагаемым возбудителем и периодом болезни.

Таксономия

Семейство ортомиксовирусов

Семейство парамиксовирусов

Семейство аденовирусов

Возбудители ОРВИ

ГРИПП

Таксономия

Морфология:

Культивирование:

Антигенная структура:

Источник инфекции:

Пути передачи:

Патогенез

Клиника

Иммунитет

Диагностика

Специфическое лечение:

Специфическая профилактика

ПАРОТИТ

Таксономия

Морфология:

Культивирование:

Антигенная структура:

Источник инфекции:

Пути передачи:

Патогенез

Клиника

Иммунитет

Диагностика

Специфическое лечение:

Специфическая профилактика

КОРЬ

Таксономия

Морфология:

Культивирование:

Антигенная структура:

Источник инфекции:

Пути передачи:

Патогенез

Клиника

Иммунитет

Диагностика

Специфическое лечение:

Специфическая профилактика

КРАСНУХА

Таксономия

Морфология:

Культивирование:

Антигенная структура:

Источник инфекции:

Пути передачи:

Патогенез

Клиника

Иммунитет

Диагностика

Специфическое лечение:

Специфическая профилактика

АТИПИЧНАЯ ВИРУСНАЯ ПНЕВМОНИЯ

Таксономия

Морфология:

Культивирование:

Антигенная структура:

Источник инфекции:

Пути передачи:

Патогенез

Клиника

Иммунитет

Диагностика

Специфическое лечение:

Специфическая профилактика

АДЕНОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ

Таксономия

Морфология:

Культивирование:

Антигенная структура:

Источник инфекции:

Пути передачи:

Патогенез

Клиника

Иммунитет

Диагностика

Специфическое лечение:

Специфическая профилактика

Работа 1: Культура фибробластов в норме и при ЦПД вируса.

Микроскопия под малым увеличением. Нормальные фибробласты имеют вытянутую форму и располагаются монослоем равномерно прикрепленные к стеклу. ЦПД вирусов проявляется изменением морфологии фибробластов: круглоклеточная дегенерация (клетки округлые, зернистые, темные) и отслоением от стекла.

Работа 2. Реакция гемадсорбции на культуре клеток.

При микроскопии монослоя культур клеток, зараженных вирусом, после 30 минутного контакта со взвесью куриных эритроцитов, вирусы, имеющие гемагглютинин, вызывают прикрепление (приклеивание) эритроцитов на поверхность клеток. Наблюдается диффузная или локальная адсорбция эритроцитов на клетках монослоя. При окраске по Романовского-Гимзе клетки окрашиваются в голубой цвет с синими ядрами, а эритроциты – в красный.

Работа 3:.ЦПД в культуре клеток при аденовирусной инфекции.

Аденовирусы изменения клеток в виде округления пораженных клеток и их группировку, напоминающих гроздь винограда, с отслоением от стекла; или дегенерацию клеток с внутриядерными и цитоплазматическими включениями.