Гормоны фетоплацентарной системы

Во время беременности формируется 3-я эндокрин­ная железа в организме женщины - это плацента, кото­рая вместе с тканями растущего плода секретирует в кровь следующие гормоны:

а) прогестерон;

б) хориогонадотропин;

в) плацентарный лактоген;

г) тиреотропин.

Эти гормоны изменяют метаболизм в организме жен­щины, создавая условия для роста и развития плода, со­хранения беременности, подготовки молочных желез к лактации.

Патология

Адреногенитальный синдром. Этот синдром характеризуется гиперплазией коры надпочечников и повышенным образованием андрогенов, что связано с дефектом ферментативной системы 11 и 21 гидроксилаз, вследствие чего не синтезируются глюко- и минералокортикоиды, а только половые гормоны.

Признаки: гетеросексуальный тип, раннее половое созревание, маскулинизация, вирилизация.

Катаболизм половых гормонов - распад большей части половых гормонов идет в печени до 17-кетостероидов, которые в реакциях конъюгации с ФАФС и УДФ ГК образуют парные серные и глюкуроновые кислоты, выде­ляющиеся почками в мочу; с мочой выбрасываются нару­жу.

Методы исследования гормонального статуса организма человека

Прогресс в медицине и биохимии стал возможным благодаря появлению принципиально новых аналитических методов.

Главное отличие методов связывания от биологических состоит в том, что они дают возможность судить о количестве анализируемого вещества не по биологической активности, а по количеству комплекса, образовавшегося при взаимодействии этого вещества с так называемым связывающим агентом.

Методы иммуноферментного анализа (ИФА) занимают важное место в арсенале всех лабораторий мира.

Высокая специфичность, чувствительность и воспроизводимость, а также возможность использования относительно простой, дешевой отечественной аппаратуры и доступных наборов реагентов обеспечивают широкое использование данного метода в медицинской практике.

В основе метода лежит способность ферментов без уменьшения активности присоеди-нять белковые и небелковые вещества с образованием коньюгатов - определяемое вещество - фермент. Такие ферменты служат метками компонентов реакции. В качестве индикатор-ных ферментных меток используется пероксидаза хрена, щелочная фосфатаза, глюкозоокси-даза и β - галактозидаза. При действии фермента на хромоген образуется окрашенный про-дукт, о содержании которого судят по оптической плотности фотометрируемого раствора.

Твёрдофазный иммуноферментный анализ – Elisа (ENZYME LINKED IMMUNO-SORBENT ASSAY) является наиболее распространенной разновидностью иммунохимичес-ких исследований.

Принцип твердофазного иммуноферментного анализа состоит в формировании комплекса, напоминающего собой «слоёный пирог», в котором определяемое вещество составляет один из внутренних слоев, а индикаторный фермент - самый внешний.

Практическая работа

Работа №1. Качественное обнаружение 17-кетосте-роидов в моче с помощью т-динитробензола

В пробирку помещают 5 капель мочи, 5 капель 30%-го раствора едкого натра и 5 капель 2%-го спиртово­го раствора (в этаноле) m-динитробензола. Перемешива­ют. При стоянии появляется красное окрашивание за счетобразования продуктов конденсации циклопентанопергидрофенантрена с т-динитробензолом.

Работа №2. Качественная реакция на кортизол

К 1 мл спиртового раствора кортизола добавляют 0,25 мл раствора гидроксида тетраметиламмония и 0,25 мл раствора синего тетразолия. Содержимое пробирки встря­хивают и оставляют в темноте на 25 мин. Жидкость окра­шивается в розовый цвет.

Реакция используется в колориметрическом методе для количественного определения содержания кортикостероидов в биологических жидкостях и основана на вос­становлении синего тетразолия за счет оксикетонной груп­пы у 17-го углеродного атома циклопентанпергидрофенантренового ядра.

Работа №3. Качественная реакция на фолликулин (эстрон) с концентрированной серной кислотой

В маленькую пробирку наливают 20 капель спирто­вого раствора фолликулина и помещают ее в кипящую водяную баню на 5-10 мин для удаления спирта. К ос­тавшемуся в пробирке фолликулину добавляют 20 капель концентрированной серной кислоты и помещают пробир­ку вновь в кипящую водяную баню на 5-10 мин. Появ­ляется соломенно-желтое окрашивание, переходящее при нагревании в оранжевое и имеющее зеленую флюоресцен­цию. С масляным раствором фолликулина реакцию про­водят при комнатной температуре.

Работа №4. Качественная реакция на ароматичес­кую группу фолликулина

К 2 каплям фолликулина приливают 1 каплю 30% -го раствора щелочи и 1 каплю реактива Фолина. Появляет­ся синее окрашивание, обусловленное наличием фенольной группировки.