Ворсинки (фимбрии, пили)

Поверхность энтеробактерий и нескольких других микроорганизмов покрыта большим числом (от 10 до нескольких тысяч) ворсинок - нитевидных образований белковой природы. Как и жгутики, они построены из одного вида белка - пилина, субъединицы которого организованны в виде полой внутри нити и берут начало от ЦПМ. Они короче и тоньше жгутиков, их ширина 10-12 нм и длина до 12 мкм.  Ворсинки полифункциональны: обеспечивают трансмиссивную передачу генов (конъюгация), являются рецепторами для фагов, органом прикрепления бактерий к питательному субстрату (адгезия), участвуют в транспорте метаболитов. У стрептококков имеется наружный слой протеиновых волосков (фимбрий), которые получили название белок М (М-протеин). Этот белок играет важную роль в процессах взаимоотношений бактерий с макроорганизмом.

Обнаружение: нативные препараты.

Пили. У многих бактерий находят ворсинки (фимбрии, пили).Пили – это нитеобразные полимерные органеллы белковой природы, локализованные на поверхности клеток. Размер пилей варьирует от долей микрометров до более 20 мкм в длину и от 2 до 11 нм в диаметре. Пили состоят из одного или нескольких типов белковых субъединиц, называемых пилины, которые обычно организованы в спиральные структуры.по рхитектуре это могут быть толстые прочные палочковидные образования, тонкие нитевидные, и есть еще так называемые кудряшки, еще более тонкие, которые имеют тенденцию сваливаться в пушистую липкую массу на поверхности бактерий и ответственны за агрегацию клеток. Функции пилей: отвечают за адаптацию, выживаемость, распространение, адгезию, коньюгацию, сигнальное общение.

Приготовление препарата «висячая капля». Висячую каплю готовят на предметном стекле с углублением (луночкой). Край луночки смазывают тонким слоем вазелина, на покровное стекло наносят микроорганизмы. Если они выращены в жидкой среде, берут одну каплю культуры. Если на плотной, то сначала на покровное стекло наносят каплю изотонического раствора натрия хлорида, а затем вносят в нее культуру микробов. Предметное стекло переворачивают и аккуратно опускают на покровное так, чтобы капля оказалась в центре углубления, после чего его ставят в прежнее положение. В таком препарате капля «подвешена» с внутренней поверхности покровного стекла и находится в герметической влажной камере. Это позволяет наблюдать за движением микробов в течение длительного времени. Препарат рассматривают в затемненном поле (сужают диафрагму), что увеличивает контрастность неокрашенных форм. ^ Приготовление препарата «раздавленная капля». Препарат готовят на обычном предметном стекле. Для этого на его поверхность наносят каплю культуры микробов, покрывают покровным стеклом и рассматривают при тех же условиях, что и висячую.

Микроскопия в тёмном поле.

Микроскопия в тёмном поле основана на освещении объекта косыми лучами света. Эти лучи не попадают в объектив, поэтому поле зрения выглядит тёмным. Такое освещение препарата достигается применением специального конденсора. Если препарат содержит клетки микроорганизмов, то косые лучи, проходя через препарат, в значительной степени отражаются от поверхности клеток и настолько уклоняются от своего первоначального направления, что попадают в объектив. Тогда наблюдатель видит на чёрном фоне интенсивно святящиеся объекты, даже если их диаметр в 10 раз меньше, чем предел разрешения объектива.