Количественное определение кислотности желудочного сока

Желудочный сок является секретом желез слизистой оболочки желудка, представляет собой бесцветную жидкость с сильнокислой реакцией (рН=1,5-2,5), объемом 1,5-2 л в сутки. Желудочный сок сложен по составу – состоит из различных органических и неорганических веществ, среди которых особое место занимают соляная кислота и белки-ферменты, а также вода (до 99,2%). Переваривание белков во многом зависит от кислотности желудочного сока.

Определение кислотности желудочного сока и наличие молочной кислоты в нем имеет важное диагностическое значение для определения желудочно-кишечных заболеваний. При патологии кислотность желудочного сока может быть нулевой, пониженной или повышенной. Отсутствие соляной кислоты и пепсина (ахилия) часто наблюдается при злокачественных новообразованиях желудка. Пониженная кислотность (гипохлоргидрия) встречается при гипоацидном гастрите, иногда при язвенной болезни желудка. Повышенная кислотность (гиперхлоргидрия) имеет место при гиперацидном гастрите и часто сопровождается язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки. При определении кислотности различают общую кислотность (сумма всех кислореагирующих веществ), общую соляную кислоту: свободную и связанную.

Принцип метода. Метод основан на определении кислотных веществ желудочного сока путем титрования их раствором гидроксида натрия с использованием двух различных индикаторов: n-диметиаминоазобензола (зона перехода окраски при рН=2,3-4,2) и фенолфталеина (зона перехода окраски рН=8,2-10,0). По изменению окраски (от красной к оранжевой) индикатора n-диметиаминоазобензола определяется свободная соляная кислота, а по переходу окраски фенолфталеина (от бесцветной к розовой) – общая кислотность желудочного сока.

В норме общая кислотность для взрослого человека составляет 40 – 60 ммоль/л, у новорожденных – 2,8 ммоль/л, у детей от 1 месяца до 1 года – 4 – 20 ммоль/л.

Содержание свободной соляной кислоты в норме составляет 20 – 40 ммоль/л (у новорожденных – 0,5 ммоль/л).

Определение общей кислотности, общей соляной кислоты, свободной соляной кислоты и связанной соляной кислоты проводится в одной порции желудочного сока.

Исследуемый материал и реактивы

1. Желудочный сок. 2. Раствор диметиламиноазобензола. 3. Фенолфталеин. 4. Раствор гидроксида натрия (0,1н).

Ход работы

Отмеривают пипеткой в колбочку 10 мл желудочного сока, добавляют 1 каплю диметиламиноазобензола и 2 капли фенолфталеина. При наличии в желудочном соке свободной соляной кислоты он окрашивается в красный цвет с розовым оттенком, при ее отсутствии сразу появляется оранжевая окраска. Титруют свободную соляную кислоту 0,1н NaOH из микробюретки до появления оранжевого окрашивания и результат записывают (1-ая отметка). Не добавляя щелочи в бюретку, продолжают титрование до появления лимонно-желтого цвета и результат записывают (2-ая отметка от 0). Продолжают титрование до появления розового окрашивания (3-я отметка от 0). 1-ая отметка соответствует количеству свободной соляной кислоты (см. расчет), 2-я – используется для определения связанной соляной кислоты, а последняя отметка соответствует общей кислотности.

Расчет. Если на титрование 10 мл желудочного сока израсходовано 3,0 мл 0,1н раствора NaOH, то количество свободной соляной кислоты равно:

Х = 3,0*1000 * 0,1 / 10 = 30 ммоль/л.

где 3,0 – количество 0,1н раствора NaOH, мл;

10 – количество желудочного сока, взятого для титрования, мл;

0,1 – количество мг–экв. щелочи в 1 мл 0,1н раствора, ммоль;

1000 – пересчет на 1литр.