Окраска по Романовскому – Гимзе

Относится к сложным методам и применяется чаще всего для мазков-отпечатков из органов или мазков крови после фиксации в жидком фиксаторе. Позволяет выявить ядерные элементы бактериальных клеток и гранулы волютина. Для окраски берут каплю готовой краски на 1 мл воды, которая должна быть подщелочена до рН 7,2.

Методика проведения

1. Поместить препарат (мазком вниз) в чашку Петри, подложив под края стекла спички или кусочки предметных стекол.

2. Подлить краску сбоку так, чтобы она без пузырей подтекла под мазок (красить 1-24 ч.).

3. Промыть водой (рН 7,2) и высушить.

Протоплазма молодых клеток окрашивается в сине-фиолетовый цвет, ядерные элементы – в красно-фиолетовый.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Какие типы микробиологических лабораторий существуют.

2. Принципы организации микробиологической учебной лаборатории. Оснащение микробиологической лаборатории и рабочего места. Правила работы и техника безопасности.

3. Устройство светового микроскопа. Иммерсионная микроскопия.

4. Темнопольная, фазово-контрастная, люминесцентная и электронная микроскопия и микроскопы (устройства).

5. Приготовление фиксированных препаратов мазков.

6. Простые и сложные методы окраски. Механизм и этапы окраски по Граму. Особенности окраски методами Романовского, Ожешко, Бурри − Гинса, Нейссера, Циля − Нильсена.

7. Приготовление препаратов для изучения микроорганизмов в нативном состоянии. Методы «висячей», «раздавленной» капли. Витальная (прижизненная) окраска.

РАБОТА ПОД РУКОВОДСТВОМ ПРЕПОДАВАТЕЛЯ

1. Ознакомление с основными приборами и оборудованием, используемыми в микробиологических лабораториях.

2. Изучение иммерсионной системы светового микроскопа.

3. Приготовление фиксированных мазков из бактериальных культур и их окраска простыми методами.

4. Микроскопия окрашенных препаратов с использованием обычных и иммерсионных систем.

5. Приготовление фиксированных мазков из бактериальных культур и их окраска сложными методами (по Граму, Цилю – Нильсену, Ожешко, Нейссеру, Бурри – Гинсу).

6. Приготовление препаратов для изучения бактерий в живом состоянии.

7. Приготовление мазков «висячей» и «раздавленной» капли.

8. Приготовление препаратов, окрашенных метиленовым синим.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ

1. Записать основные правила работы в микробиологической лаборатории.

2. Приготовить нативные мазки «висячей » и «раздавленной » капли.

3. Приготовить фиксированные препараты из смеси бактериальных культур.

4. Провести микроскопию и зарисовать микроскопические препараты.

Тема № 2. Морфология бактерий. Ультраструктура бактериальной клетки

Знание морфологии и изучение ультраструктуры бактерий является основой микроскопического метода исследования и необходимо для правильного применения химиотерапевтических препаратов.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ

Изучение морфологии и ультраструктуры бактерий.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ

1. Формы бактериальных клеток и методы изучения морфологических особенностей.

2. Основные морфологические особенности бактерий.

3. Основные морфологические типы бактерий.

4. Элементы ультраструктуры бактериальной клетки.

СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ

1. Дифференцировать бактерии по морфологическим признакам.

2. Определить родовую принадлежность конкретных бактерий по морфологическим признакам.