2.4. Серологические методы диагностики.

Принцип метода

Методы серологической диагностики хламидиоза основаны на опре­делении специфических антител в сыворотке крови, а также в секретах лиц, больных или имеющих хламидиоз в анамнезе. Интерпретацию ре­зультатов серологического обследования следует проводить в совокуп­ности с анализом клинико-эпидемиологических данных, а также с учетом особенностей использованного серологического теста.

Для серодиагностики в настоящее время наиболее часто используют иммуноферментный анализ (ИФА на наличие антител). Общий принцип ИФА-дигностики следующий: антиген фиксируется на твердой поверхно­сти, обрабатывается испытуемой сывороткой, а затем антивидовым иммуноглобулином, связанным с ферментом, визуализирующимся после добавления субстрата. Достоинством метода является возможность ав­томатического учета результатов и выявления классов антител - IgG, IgA, IgM. Учитывая низкую иммуногенность "урогенитальных штаммов" хла­мидии и возможность присутствия антител после ранее перенесенной хламидийной инфекции, необходимо исследовать несколько проб сыво­ротки в динамике заболевания с интервалом в 2- 3 недели.

Общеупотребительным методом серодиагностики является реакция непрямой иммунофлюоресценции для выявления антител (НИФ). При проведении НИФ используются фиксированные очищенные антигены хламидии, нанесенные в виде точек на стекло. Нанесенная сыворотка больных реагирует с антигенами различных серотипов, после чего обра­батывается антивидовой люминесцирующей сывороткой. Тест чувстви­телен, во многих случаях дает информацию о серотипе хламидии, и це­лесообразен при эпидемиологических исследованиях.

В руководствах прежних лет описывается реакция связывания ком­племента (РСК) для серодиагностики хламидиозов, однако в настоящее время в силу относительно слабой чувствительности РСК применяется только при диагностике системного хламидиоза - венерической лимфогранулемы,

Материально-техническое обеспечение метода

Стандартное оборудование лаборатории для проведения иммуноферментного анализа (спектрофотометр, термостат, холодильник, пипеточные дозаторы).

Тест-системы для ИФА на определение антител к Ch.trachomatis. Эти тест-системы более чувствительны по сравнению с тест-систе­мами для определения хламидийных антигенов. В них может быть использован липополисахарид для выявления родоспецифических анти­тел (тест-система с рекомбинантным ЛПС - pChlamydian ELISA (MEDAC GmbH, Германия). В последнее время получили распространение пептидные тест-системы с видоспецифическими белковыми антигенами (ОБНМ) клеточной стенки хламидий (Immunocomb, Orgenic,Израиль).

Методика

Инструкции по применению тест-систем заложены в диагностические наборы.

Показания и противопоказания к применению метода

Серологические тесты по определению IgG в сыворотке крови инфор­мативны при генерализованных формах инфекции, а также в тех случа­ях, когда инфицированные органы не доступны для непосредственного исследования (при инфицировании СП. pneumoniae, при инфицировании органов малого таза, пневмониях новорожденных).

При локализованной урогенитальной инфекции информативным яв­ляется изучение показателей местного иммунитета (в цервикальном сек­рете у женщин, в соке простаты и семенной плазме у мужчин). В послед­ние годы появляются данные о том, что для мужской популяции с хламидийными простатитами лучшим, маркером является измерение титров антихламидийных IgA в семенной плазме. При обследовании бесплод­ных пар этот показатель более информативен, чем исследование сыво­ротки крови. Следует иметь в виду, что IgA появляются в цервикальном секрете женщин и семенной плазме мужчин через некоторое время по­сле начала инфекционного процесса и, следовательно, эти тесты не под­ходят для диагностики острого хламидийного инфекционного процесса. Показатели местного иммунитета (IgA в секретах) по значимости обычно совпадают с показателями гуморального иммунитета (IgG в сыворотке крови) у женщин, и статистически достоверно не совпадают - у мужчин, по-видимому, вследствие наличия гемато-тестикулярного барьера.

Серологические тесты не следует использовать в качестве исследо­вания на контроль излеченности, т.к. титр антител остается достаточно высоким в течение нескольких месяцев после лечения, однако они хоро­шо применимы при дифференциальной диагностике хламидиоза. Осо­бенно высока ценность этого метода при хронических бессимптомных формах хламидийной инфекции органов малого таза (простатиты, эпидидимиты, сальпингиты, сальпингоофориты). Чувствительность и спе­цифичность тест-систем для определения антител к хламидиям не ме­нее 95%.