- •Принципы культивирования микроорганизмов Знакомство с микробиологической лабораторией. Микроскопические методы исследования морфологии бактерий и грибов.
- •Знакомство с микробиологической лабораторией
- •Основные методы выявления микроорганизмов
- •Оборудование микробиологической лаборатории
- •Основные правила поведения и работы в микробиологической лаборатории
- •Приготовление препаратов для микроскопического исследования
- •Методы окраски мазков
- •Знакомство с микроскопической техникой. Работа с биологическим микроскопом.
- •Характеристика культуры по морфологическим и тинкториальным признакам
- •Тема 5. Бактериологические методы исследования.
- •Отбор и доставка материала в лабораторию
- •Бактериологические методы исследования
- •Питательные среды для культивирования бактерий
- •Методы посевов
- •Методы культивирования и выделения чистой культуры бактерий
- •Идентификация бактерий
- •Принципы диагностики микозов
- •Паразитологические методы исследования. Лабораторная диагностика инвазий.
- •Вирусологические методы исследования.
- •Выделение и культивирование вирусов
- •Идентификация вирусов
- •Методы стерилизации и дезинфекции в микробиологической лаборатории.
- •Лабораторная диагностика дисбактериоза
- •Принципы санитарно-бактериологического исследования
- •Организация противоэпидемической работы
- •Основы клинической микробиологии Роль медицинской сестры в системе контроля за госпитальными инфекциями
- •Иммуномикробиологические исследования Серологические реакции в микробиологических и иммунологических лабораториях используют в двух целях:
- •Иммунологические реакции выявления специфических антигенов
- •Иммунологические реакции выявления специфических антител
- •7. Реакция торможения гемагглютинации (ртга).
- •Условные обозначения: - торможение гемагглютинации (пуговка) ; - гемагглютинация (зонтик).
- •9. Реакция гемагглютинации (рга)
- •Реакции связывания комплемента. Риф и ифа.
- •Реакция связывания комплемента
- •Метод флюоресцирующих антител (мфа) или реакции иммунофлюоресценции (риф)
- •Иммуноферментный анализ (ифа)
- •Основы иммунопрофилактики
Основные правила поведения и работы в микробиологической лаборатории
-
В помещение микробиологической лаборатории нельзя входить без специальной одежды - халата и белой шапочки или косынки, сменной обуви.
-
Запрещается выходить за пределы лаборатории в халатах или надевать верхнее платье на халат.
-
В помещении бактериологической лаборатории категорически запрещается курить, принимать пищу, хранить продукты питания.
-
Весь материал, поступающий в лабораторию, должен рассматриваться как инфицированный.
-
При распаковке присланного заразного материала необходимо соблюдать осторожность: банки, содержащие материал для исследования, при получении обтирают снаружи дезинфицирующим раствором и ставят не прямо на стол, а на подносы или кюветы.
-
Переливание жидкостей, содержащих патогенных микробов, производят над сосудом, наполненым дезинфицирующим раствором.
-
О случаях аварии с посудой, содержащей заразный материал, или пролевания жидкого заразного материала надо немедленно сообщить заведующему лабораторией или его заместителю. Мероприятия по обеззараживанию загрязненных патогенным материалом осуществляется немедленно.
-
Поступающий в лабораторию материал для исследования регистрируют в специальном журнале и маркируют.
-
По окончании работы руки, инструменты, рабочее место обрабатывают дезинфицирующим раствором. Зараженный материал и ненужные культуры подлежат обязательному уничтожению, по возможности в тот же день.
Микроскопические методы исследования морфологии бактерий и грибов
Приготовление препаратов для микроскопического исследования
Для приготовления препарата исследуемый материал берут из пробирки, колбы или чашки Петри бактериологической петлей или стерильной пипеткой. В некоторых случаях используют для этой цели препаровальные иглы.
Приготовление препарата для изучения микроорганизмов в нативном виде. Метод «висячей капли». Препарат готовят на покровном стекле, в центре которого наносят одну каплю бактериальной культуры. Затем предметное стекло с лункой, края которой предварительно смазывают вазелином, прижимают к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстрым движением переворачивают препарат покровным стеклом вверх. В правильно приготовленном препарате капля должна свободно висеть над лункой, не касаясь ее дна или края. Для микроскопии вначале используют малый сухой объектив 8Х, под увеличением которого находят край капли, а затем устанавливают объектив 40Х и исследуют препарат. Метод «раздавленной» капли. На поверхность обезжиренного предметного стекла наносят каплю исследуемого материала или суспензию бактерий и покрывают ее покровным стеклом. Капля должна быть небольшой, не выходящей за край покровного стекла. Микроскопируют препарат с объективом 40Х. После микроскопии препараты «раздавленной» капли или «висячей» капли опускают в дезинфицирующий раствор.
Приготовление фиксированных препаратов-мазков. Для приготовления препарата на обезжиренное предметное стекло наносят каплю воды или изотонического раствора хлорида натрия, в которую петлей вносят исследуемый материал и распределяют его таким образом, чтобы получить тонкий и равномерный мазок. При таком распределении материала в мазке при микроскопии можно увидеть изолированные бактериальные клетки. Если исследуемый материал содержится в жидком виде, то его непосредственно наносят петлей на предметное стекло и готовят мазок. Мазки высушивают на воздухе или в струе теплого воздуха над пламенем горелки, не давая капле закипать. Для фиксации мазка предметное стекло (мазком вверх) медленно проводят 3 раза через пламя горелки. Микроорганизмы при фиксации погибают, плотно прикрепляясь к поверхности стекла, и не смываются при дальнейшей обработке. Более длительное нагревание может вызвать деформацию клеточных структур. Мазки крови, мазки-отпечатки органов и тканей и в некоторых случаях мазки из культур микроорганизмов фиксируют погружением на 15-20 мин. в метиловый или этиловый спирт, смесь Никифорова, сулемовый спирт и другие фиксирующие жидкости.
Рис. 1. Фиксация прапарата-мазка пламенем.