4.1. Гуморальный иммунитет

Иммуноглобулины представляют собой характерный продукт секреции В-клеток на ко­нечной стадии их дифференцировки, т.е. плазматических клеток. Концентрация иммуногло­булинов в сыворотке является результатом установившегося равновесия между их синтезом и распадом. Дефекты, связанные с нарушением метаболизма иммуноглобулинов, наблюда­ются при многих заболеваниях. Уменьшение содержания иммуноглобулинов в сыворотке может происходить по трем причинам:

1. нарушение синтеза одного, нескольких или всех классов иммуноглобулинов;

2. увеличение деструкции иммуноглобулинов;

3. значительные потери иммуноглобулинов (например, при нефротическом синдроме).

Общим следствием указанных процессов является дефицит иммуноглобулинов, а тем самым и антител. Если имеет место 1-й тип (нарушение синтеза), нарушаются реакции им­мунного ответа клеточного типа, опосредованные Т-лимфоцитами. Увеличение количества иммуноглобулинов может быть обусловлено усилением их синтеза или уменьшением интен­сивности их распада. Повышенная выработка иммуноглобулинов является причиной гипер-гаммаглобулинемии.

4.2. Клеточный иммунитет

Исследование клеточного иммунитета необходимо для выявления первичного или вто­ричного иммунодефицита, а также для контроля за проведением иммуностимулирующей те­рапии. Клеточный иммунитет представлен различными популяциями Т- и В-лимфоцитов, соотношение которых играет важную роль для оценки состояния этого звена иммунитета.

Среди В-лимфоцитов имеются три группы клеток:

• В-эффекторы, или плазматические клетки, вырабатывающие антитела (иммуноглобу­лины);

• В-хелперы, или В-помощники, помогающие Т-лимфоцитам выполнять их функции;

• В-супрессоры, замедляющие клеточные реакции, тормозящие синтез ДНК, выработку антител, функции Т-лимфоцитов, ответ лимфоцитов на воздействие митогенов.

На своей поверхности В-клетки несут молекулы иммуноглобулинов, которые функцио­нируют как рецепторы для антигенов. Наряду с этим они имеют рецепторы к Fc-фрагментам иммуноглобулинов и к компонентам комплемента. В-система имеет непосредственное отно­шение к выработке иммуноглобулинов, ответственных за иммунные реакции организма. Сами по себе В-клетки неспособны распознать чужеродные антигены без Т-клеток.

Т-лимфоциты несут на своей поверхности маркеры — антигены, которые объединены в кластеры дифференцировки (CD). Они выступают в роли первичных стимуляторов В-лим­фоцитов и моноцитов крови, тканей. Это достигается либо посредством выделения ими гуморальных факторов (интерлейкинов и лимфокинов), либо путем прямого контакта с В-клетками. Для оценки Т-звена клеточного иммунитета исследуют количество Т-лимфоци­тов, Т-хелперов, Т-киллеров, Т-супрессоров, а также оценивают функциональную актив­ность Т-лимфоцитов и систему цитокинов.

5. История развития клинической оценки

5.1. Микроскопия

1590 - открыты оптические свойства линзы и сконструирован первый микроскоп (Л. Липпершей, Г. и З. Янсены). Его увеличение составляло от 3 до 10 раз.

1674 - Антони ван Левенгук изготовил линзы с увеличением, достаточным для проведения простых научных наблюдений.

1683 - были впервые описаны эритроциты, открыты и описаны бактерии.

5.2. Бактериология (Роберт Кох)

1868 – открыты микобактерии туберкулёза

1877 – разработаны плотные питательные среды

для выращивания микроорганизмов

1883 – открыт возбудитель холеры

5.3. Иммунология

1900-е годы – создание сывороток и вакцин для лечения инфекционных заболеваний

1900 – К.Ландштайнер, группы крови (Нобелевская премия)

5.4. Биохимия

XIX век – выделены глюкоза, холестерин, мочевая кислота, креатин

Начало ХХ века – разработаны методы изучения белков (хроматография, рентгеноструктурный анализ, метод изотопной индикации, цитоспектрофотометрия)

1923 - Т. Сведберг, центрифугирование. Нобелевская премия

1937 - А. Тизелиус, электрофорез. Нобелевская премия

5.5. Гемостазиология

1838 – открыт тромбин

1842 – обнаружены тромбоциты

1861 – А.Шмидт, первая теория свертывания крови

1875 – выделен фибриноген

1957 – введены цифровые обозначения факторов свертывания крови

5.6. Молекулярная диагностика

1953 - Ф. Крик и Д. Уотсон открыли структуру и функции молекулы ДНК

1983 – разработан принцип полимеразной цепной реакции (ПЦР)

1995 – официальное становление метода ПЦР в России

5.7. История развития службы лабораторной диагностики в России

1947 – Всесоюзное общество врачей-лаборантов

1955 – выпуск журнала «Лабораторное дело»

1992 – Российская ассоциация медицинской лабораторной диагностики

1997 – первая диссертация (докторская) по специальности «Клиническая лабораторная диагностика»

6. Некоторые приборы , используемы при лабораторных исследованиях

Центрифугирование

Центрифугирование — разделение неоднородных систем (напр., жидкость — твердые частицы) на фракции по плотности при помощи центробежных сил. Центрифугирование осуществляется в аппаратах, называемых центрифугами. Центрифугирование применяется для отделения осадка от раствора, для отделения загрязненных жидкостей, производится также центрифугирование эмульсий (напр., сепарирование молока). Центрифугирование бетонаприменяется для увеличения его прочности. Для исследования высокомолекулярных веществ, биологических систем применяют ультрацентрифуги. 

Отбор аликвот пипеткой Мора

Аликвота - в аналитической химии — точно измеренная кратная часть образца (объём раствора), взятая для анализа, которая сохраняет свойства основного образца.

В фармацевтике аликвотой часто называют метод измерения концентрации вещества, количество которого меньше, чем порог чувствительности используемой шкалы. Например, если шкала надёжна только для образцов массой свыше 120 мг, но нужно отмерить 40 мг лекарства, требуется аликвота. Для этого приготовляется раствор нужной концентрации: например, 120 мг лекарства смешиваются с пропорциональным количеством растворителя, а потом взвешивается то количество раствора, которое содержит 40 мг лекарства.

Пипетирование

Метод пипетирования. Пипеткойотбирают определенный объемраствора стандартного вещества, концентрация которогоизвестна, переносят в колбу и титруют стандартизируемым раствором. Вместостандартного раствораможно применять также раствор, который до этого был стандартизирован. Затем находятсреднее арифметическоеизрасходованного объема стандартизируемого раствора.

Существует еще способ пипетирования. Для установки, титра методом пипетирования готовят точно 0,1 н. раствортетрабората натрия. Для этого точную навеску (19,07 г на 1 л или 4,768 г на 250 мл)тетрабората натриявзвешивают начасовом стеклеи переводят вмерную колбучерез воронку. Воронку ичасовое стеклообмывают изпромывалкиструей горячейводы, затем наполняют колбу водой на Va объема. Взбалтывая колбукруговыми движениями, растворяют навеску, после чего охлаждают колбу докомнатной температуры, разбавляютраствор водойдо метки и перемешивают.

Биохимический анализатор крови

Спектрофотометрия

Спектрофотометрия (абсорбционная) — физико-химический метод исследования растворов и твёрдых веществ, основанный на изучении спектров поглощения в ультрафиолетовой (200—400 нм), видимой (400—760 нм) и инфракрасной (>760 нм) областях спектра. Основная зависимость, изучаемая в спектрофотометрии, — зависимость интенсивности поглощения (как правило измеряется оптическая плотность - логарифм светопропускания т.к. она зависит линейно от концентрации вещества) падающего света от длины волны. Спектрофотометрия широко применяется при изучении строения и состава различных соединений (комплексов, красителей, аналитических реагентов и др.), для качественного и количественного определения веществ (определения следов элементов в металлах, сплавах, технических объектах). 

заключение

В клинической медицине методы лабораторного анализа применяют главным образом для подтверждения клинического диагноза или его уточнения, установления причины болезни (при генетических, инфекционных заболеваниях, отравлениях), для характеристики формы, тяжести течения и определения прогноза болезни, для выбора этиологической и патогенетической терапии, контроля за результатами лечения, а также для обнаружения патологии при скрининговых исследованиях в диспансеризируемых контингентах населения. Эти цели определяют содержание лабораторного анализа, как самостоятельного научного раздела клинической медицины, основными задачами которого являются: 1) разработка методов лабораторных исследований; 2) разработка требований к качеству выполнения аналитических методов и средств обеспечения этих требований, 3) установление пределов нормальных индивидуальных колебаний каждого исследуемого параметра состава и свойств биологических жидкостей и тканей; 4) изучение закономерных связей лабораторно выявляемых патологических отклонений с сущностью патологического процесса при конкретных заболеваниях; 5) установление диагностической, дифференциально-диагностической и прогностической ценности отдельных лабораторных тестов и их комбинаций; 6) создание диагностических лабораторных программ для оптимизации диагностики. Первые три задачи выполняются специалистами лабораторного дела, остальные — в совместной работе с клиницистами.

    Теоретической основой лабораторного анализа являются как медицинские, так и фундаментальные науки, прежде всего физика, химия, биофизика, биохимия, молекулярная биология, микробиология, математика, развитие которых определяет прогресс возможностей и качества лабораторного анализа. В соответствии с объектами и методами исследования формируются клиническая химия и токсикология, клиническая микробиология, клиническая иммунология, клиническая паразитология, клиническая цитология; последняя включает ряд самостоятельных подразделов, из которых особенно развиты клиническая лабораторная гематология и клиническая цитология опухолей. Развитие этих клинических отраслей находится в прямой зависимости от состояния и развития базовых для каждой из них теоретических и клинических дисциплин. Так, интенсивное развитие клинической иммунологии в последней трети 20 в. стимулировано как успехами теоретической иммунологии, так и повышением практической значимости иммунологических проблем в связи с развитием трансплантации органов и тканей, изучением аутоиммунных болезней, иммунодефицитных состояний (в т.ч. связанных с ВИЧ-инфекцией), установлением роли иммунных процессов в формировании физиологических и патологических реакций организма, разработкой иммунохимических способов идентификации различных субстратов и т.д. При этом диагностические программы определенных видов патологии включают разные виды лабораторного анализа, а методы исследования, разрабатываемые для отдельных отраслей, находят успешное применение и в других отраслях.

список использованных источников

• Крешков А. П. Основы аналитической химии. Теоретические основы. Количественный анализ.

• Г.И. Назаренко , А.А.Кишкун «Клиническая оценка результатов лабораторных исследований»

• knigilib.net

• StudFiles.net

• www.nedug.ru

• www.dixion.ru