Сборник материалов заочной конференции .docx

ИЗМЕНЕНИЯ СОСТАВА ЖЕЛУДОЧНОЙ МИКРОБИОТЫ ПРИ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ЗОНЫ

Л.В. Матвеева, Р.Х. Капкаева, Л.С. Мишанина Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева, г. Саранск

Кафедра иммунологии, микробиологии и вирусологии Заведующий кафедрой – доц., к.м.н. Л.В. Новикова Научный руководитель – проф., д.м.н. Л.М. Мосина

Актуальность. Во всех странах мира отмечается высокая заболеваемость органов гастродуоденальной зоны (ГДЗ), имеющая мультифакториальную этиологию. Одним из причинных факторов является развитие дисбиоза мукозной микробиоты. Имеются научные данные (И.Р. Мавлянов и др., 2012) о наличии зависимости степени обсемененности слизистых оболочек (СО) ГДЗ Helicobacterpylori (H. pylori) от выраженности дисбиотических изменений в желудке. Ранее (Т.Х. Сулейманова и др., 2009) установлено синергическое влияниеStaphylococcusaureus и антагонистическое действие Escherichiacoliна колонизацию СО ГДЗ Candidaalbicans. Кроме того, имеются исследования (F.Siavoshietal., 2005), позволяющие рассматривать дрожжеподобные грибы в качестве переносчиковH. pylori. По данным В.В.

Чернина и соавт. (2010, 2011), наличие H. Pylori в СО ГДЗ в условиях дисбиоза способствуетпоявлению и/или увеличению количества условно-патогенных Staphylococcusaureus,

стрептококков,грибов рода Candida иснижению уровня лактобацилл.

Целью исследования явилось изучение изменений микробиоты желудка при заболеваниях

ГДЗ.

Материалы и методы. За период 2012-2015 гг. на базе лечебно-профилактических учреждений города Саранск были обследованы при получении информированного согласия 244

человека в возрасте 23–85 лет с подозрением на заболевание желудка.

Распределение обследованных лиц было следующим. В контрольную группу по принципу случайной выборки вошли 40 практически здоровых добровольцев (21 (52,5%) мужчина, 19 (47,5%) женщин). 42 пациента с хроническим неатрофическим гастритом – 28 (66,7%) мужчин, 14 (33,3%) женщин – составили 1-ю группу. 40 больных очагово-атрофическим гастритом – 16 (40%)

мужчин и 24 (60%) женщины – 2-я группа. 12 (30%) мужчин и 28 (70%) женщин с обострением распространенного атрофического гастрита были отобраны в 3-ю группу. Среди больных с обострением язвенной болезни желудка было 30 (71,4%) мужчин, 12 (28,6%) женщин – 4-я группа.

40 больных полипозом желудка (25 (62,5%) женщин и 15 (37,5%) мужчин) составили 5-ю группу.

31

При эзофагогастродуоденоскопии (ЭГДС) проводили забор биоптатов СОс пристеночной слизью с последующим микроскопическим, микробиологическим, гистологическим исследованием.

Наличие и выраженность обсеменения СО желудка и двенадцатиперстной кишки H. pylori

определяли при микроскопии мазка-отпечатка, окрашенного по Романовскому-Гимзе, и с помощью тест-системы ХЕЛПИЛ® (Бланк) (ООО «Ассоциация медицины и аналитики», г. Санкт-

Петербург, Россия).

У обследованных лиц проводили забор 3 мл крови из локтевой вены натощак для иммуноферментного анализа, отделяли центрифугированием сыворотку и определяли в ней наличие и титр суммарных антител (IgG+IgM+IgA) к CagAH. pylori (САТ к CagAH. pylori) с

использованием тест-системы ЗАО «Вектор-Бест» (г. Новосибирск, Россия). Результат оценивали как отрицательный, сомнительный (титр <1:5), слабоположительный (1:5), положительный (1:10– 1:20), сильноположительный (1:40–1:80).

Проводили бактериологическое исследование микробиоты СО желудка путем посева разведения материала на соответствующие питательные среды (кровяной, желточно-солевой,

геликобактерный агар, среды Эндо, Сабуро и др.) и идентификации по стандартным методикам.

Количество микроорганизмов определяли путем подсчета колониеобразующих единиц в 1 г (lg

КОЕ/г) с учетом разведения материала.Результаты статистически обработали при помощи программ Microsoft OfficeExcel 7.0 с расчетом средней арифметической величины (М), ошибки средней арифметической (m), критерия Стьюдента и степени вероятности различий в группах (р).

Значимыми считали различия при р≤0,05.

Результаты. При микроскопии мазков-отпечатков биоптатов СО ГДЗ в контрольной группе

H. pyloriопределялся у 16 (40%) обследованных, клетки дрожжеподобных грибов не обнаруживались. Хеликобактерии наиболее часто (в 69,0% случаев) определялись в 1-й и 4-й

группах – на фоне II–IV степени воспаления СО желудка, реже (в 57,5% случаев) – в 3-й группе на фоне III–IV стадии атрофии СО желудка.

Клетки дрожжеподобных грибов чаще обнаруживались при полипозе желудка и распространенном атрофическом гастрите – в 20,0 и 17,5 % случаев соответственно, реже – при обострении неатрофического гастрита (в 14,3% случаев).

При иммуноферментном анализе в контрольной группе САТ к CagAH. pylori выявлялись у

11 (27,5%) человек: в титре менее 1:5 – у 3 (7,5%), 1:5 – у 8 (20%) обследованных. При обострении хронического неатрофического гастрита САТ к CagAH. pylori определялись в 76,2% случаев: в

титре менее 1:5 – у 3 (7,14%) больных, 1:5 – у 8 (19,05%), 1:10–1:20 – у 15 (35,71%), 1:40 – у 6 (14,29%). У больных с обострением очагово-атрофического гастрита положительные титры САТ к

CagAH. pylori наблюдались у 30 (75%) обследованных: у 6 (15%) – в титре 1:5, у 18 (45%) – 1:10–

32

1:20, у 6 (15%) – 1:40. При распространенном атрофическом гастрите САТ к CagAH. pylori

выявлялись у 28 (70%) больных: у 8 (20%) – в титре 1:5, у 16 (40%) – 1:10–1:20, у 4 (10%) – 1:40.

При обострении язвенной болезни желудка САТ к CagAH. pylori определялись в 81% случаев: в

титре 1:5 – у 7 (16,7%), 1:10–1:20 – у 14 (33,3%), 1:40 – у 13 (30,9%) больных. Данные результаты свидетельствуют об инфицированности большинства обследованных больных язвенной болезнью

CagA+-штаммами H. pylori. У больных полипозом желудка САТ к CagAH. pylori отмечались в

77,5% случаев: у 4 (10%) больных титр антител был менее 1:5, у 9 (22,5%) – 1:5, у 15 (37,5%) –

1:10–1:20, у 3 (7,5%) – 1:40. Наименьшая (относительно групп сравнения) инфицированность

CagA+-штаммами H. pylori отмечалась при распространенном атрофическом гастрите, что патогенетически обусловлено созданием неблагоприятной среды обитания для микроорганизма.

Частота высеваемости микроорганизмов из биоптатов СО желудка у обследованных лиц

представлена в таблице.

Таблица. Частота высеваемости (в %) микроорганизмов из биоптатов слизистой оболочки желудка у обследованных лиц

У больных с обострением хронического гастрита с увеличением стадии атрофии СО отмечалось снижение высеваемости актиномицетов, бифидобактерий, коринебактерий, кишечной палочки, H. pylori, лактобацилл, микрококков, нейссерий наряду с повышением выявляемости

33

грибов рода Candida, золотистого и эпидермального стафилококков, стрептококков. При обострении язвенной болезни желудка наблюдалось значимое относительно больных хроническим гастритом увеличение частоты высеваемости актиномицетов, коринебактерий, H. pylori,

микрококков, золотистого стафилококка на фоне снижения встречаемости бифидобактерий,

кишечной палочки, нейссерий, эпидермального стафилококка, стрептококков. У больных полипозом желудка частота высеваемости большинства микроорганизмов практически соответствовала частоте при очагово-атрофическом гастрите, кишечной палочки – при распространенном атрофическом гастрите, что указывает на общность морфологических и микробиотических изменений СО при данных заболеваниях.

Выводы. При заболеваниях ГДЗ степень изменений микробиоты желудка отражает морфологическое состояние СО.

Наибольшая частота высеваемости при заболеваниях ГДЗ характерна для стрептококков,

эпидермального стафилококка, H. pylori, Candidaspp., кишечной палочки, лактобацилл.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОБИОТИКОВ В КОРРЕКЦИИ ЛИПИДЕМИЙ

Т.Н. Мишина, И.С. Хлыбов, Р.Б. Миронов Оренбургский государственный медицинский университет, г. Оренбург

Кафедра химии и фармацевтической химии Заведующий кафедрой – проф., д.м.н. С.И. Красиков Научный руководитель – доц., к.б.н. Н.В.Шарапова

Микробиом кишечника является важной системой для поддержания гомеостаза между индивидуумом и внешней средой. Биологическое равновесие между человеком и микробной флорой является своеобразным индикатором состояния макроорганизма, реагируя на различные патологические процессы в организме и на любые изменения в окружающей среде.

Микробиота человека – высокоорганизованная система, которая реагирует качественными и количественными сдвигами на динамическое состояние организма в различных условиях жизнедеятельности, здоровья и болезни. Приоритет в формировании представлений о роли микробиоты, характере взаимодействия между ней и макроорганизмом, принадлежит отечественным учѐным Мечникову И.И., Уголеву А.М. и др.

В настоящее время принято выделять следующие важнейшие функции микробиоты, не связанные с пищеварением, но играющие ведущую роль в полноценном функционировании организма. Во-первых, микробиота защищает нас от проникновения патогенных организмов и развития инфекции, препятствуя связыванию патогенных микробов с ключевыми участками клеток слизистой. Так же микробиота конкурирует с патогенными микробами за питательные

34

вещества, для чего выделяет вещества, обладающие антибиотической активностью. Во-вторых,

микробиота стимулирует иммунную систему и знакомит еѐ с различными антигенами. В-третьих,

микробиота играет важную роль в обмене веществ. В-четвертых, нарушение баланса микробиоты вызывает диссеминацию микроорганизмов по кровотоку человека и способствует развитию очагов воспаления. Общее число микроорганизмов, которые населяют различные отдела человеческого тела, превышает численность клеток нашего организма.

Из имеющихся литературных источников известно, что изменения в кишечной микробиоте ассоциированы с воспалительными заболеваниями кишечника. Селективное уменьшение

Faecalibacteriumprausnitzii замечено у пациентов с язвенным колитом. При coeliacdisease замечено снижение количества бифидобактерий. Нарушение кишечного микробиома связано с развитием аллергии, раком кишечника, ВИЧ. Избыточная продукция Th1- и Th17 приводит к язвенному колиту, аутоиммунным заболеваниям (волчанка, псориаз, ревматоидный артрит). Дисбаланс продукции Th2 связан с астмой, аллергическими заболеваниями и язвенным колитом

[JoossensM.].Кишечные микробные сообщества могут играть важную роль в развитии комплекса метаболических нарушений, таких, как предрасположенность к инсулинорезистентности и стеатогепатиту.

Залог обеспечения процессов жизнедеятельности – это существование стабильной кишечной микробиоты, предполагающей наличие индивидуального микробного ядра,

сохраняющегося даже при применении курса антибиотикотерапии. Преобладающими в составе микробного ядра являются два семейства бактерий – Bacteroidetes и Firmicutes сопровождаемые

Actinobacteria и Verrucomicrobia.

Роль микробиоты в развитии атеросклероза. Заболевания, связанные с изменениями липидного обмена – есть неотъемлемое следствие жизни современного человека. Не смотря на существенные достижения современных ученых в сфере науки и техники, до настоящего времени крайне малое внимание уделяется роли, которую оказывает поддержание качественного и количественного состава микрофлоры кишечника в регуляции липидного обмена. Вместе с тем,

нарушение кишечной микрофлоры встречается у 90% больных с сердечно-сосудистыми заболеваниями (ССЗ).

Известно, что липидный состав крови меняется на фоне глубоких микроэкологических нарушений в кишечнике. Эти нарушения проявляются в виде повышенного количества анаэробов,

гемолитических кишечных палочек, стафилококков, грибов с одновременным снижением числа лактобацилл и бифидобацилл.

Микроорганизмы ЖКТ участвуют в холестериновом метаболизме, воздействуя непосредственно на ферментные системы клеток пациента, синтезирующие эндогенный холестерин (ХС). Так, бифидобактерии, ингибируя активность ГМГ-КоА-редуктазы, уменьшают

35

выход ХС из гепатоцитов. Некоторые штаммы кишечных стрептококков усиливают катаболизм ХС в желчные кислоты.

Различные компоненты микробной клетки (эндотоксин, мурамилдипептиды, зимозан),

альфа-интерферон и другие соединения микробного происхождения, синтез которых связан с микроорганизмами, способны индуцировать повышенный синтез ХС в различных клетках организма человека, особенно у лиц, склонных к гиперхолестеринемии.

При синдроме избыточного бактериального роста микробиота толстого кишечника поражает слизистую оболочку кишки. В частности, эндотоксины повреждают эпителий илеоцекального отдела кишечника, в значительной мере нарушают метаболизм желчных кислот в цикле их энтерогепатической циркуляции, приводя в итоге к дислипопротеидемии (ДЛП).

Основным органом-мишенью при этом становится печень.

Установлено, что при дислипидемии происходят выраженные дисбиотические изменения кишечника, следствием которых является эндотоксемия, бактериальная транслокация, нарушение функции и структуры печени. Нарушения функции печени при ДЛП обусловлены, главным образом, выраженным дисбиозом толстой кишки, выражающимся понижением общего уровня летучих жирных кислот и повышением анаэробного индекса, характерных для угнетения резидентной микрофлоры кишечника.

Таким образом, создается «порочный круг»: нарушение микроэкологии кишечника,

накопление эндотоксинов – нарушение энтерогепатической циркуляции желчных кислот – нарушение функции печени – нарушение обмена липидов – нарушение структуры печени

(жировая инфильтрация, фиброз) – нарушение обмена липидов – поддержание (усугубление)

нарушенного кишечного дисбиоза.

Ряд проведенных исследованийпозволил объяснить некоторые патофизиологические механизмы хронической сердечной недостаточности. Эндотоксин клеточной стенки грамотрицательных бактерий является причиной местной воспалительной реакции, которая вначале ограничивается слизистой оболочкой кишки. Бактерии и продукты их жизнедеятельности фагоцитируются макрофагами кишечной стенки и клетками ретикуло-эндотелиальной системы.

Активированные макрофаги проникают в региональные лимфоузлы, где бактерии разрушаются и в кровь попадают продукты их распада (фрагменты ДНК), активированные макрофаги, которые приводят к системной активации иммунной системы. Каждый новый период сердечной декомпенсации с нарастанием застойных явлений в большом кругу кровообращения усугубляет изменения в стенке кишечника, что приводит к увеличению количества грамотрицательных бактерий, их перемещению в дистальные отделы тонкой кишки и увеличению проницаемости кишечной стенки для бактериального эндотоксина. Бактериальный эндотоксин, попадая в систему портальной вены, а затем в печень, активирует макрофагальную систему печени, вызывая как

36

иммунное воспаление ткани печени (приводящее к ее фиброзу и циррозу), так и системное воспаление и системную цитокинемию. Клетки кишечника не только синтезируют ХС, но и продуцируют соединения, регулирующие его синтез в печени. Эти соединения могут воздействовать на клеточный синтез ХС как прямо, так и опосредованно, влияя на образование в печени желчных кислот.

Таким образом, резидентная и транзиторная микрофлора пациента, синтезируя,

трансформируя или разрушая экзогенные и эндогенные стерины, активно участвует в холестериновом метаболизме и является важнейшей метаболической и регуляторной системой,

кооперирующей органы и клетки хозяина в поддержании гомеостаза ХС. При нарушении этих процессов микробиота способствует развитию гиперхолестеринемии.

В работах (вставить автора) указывается также на связь между флорой кишечника,

метаболизмом фосфолипидов и риском развития атеросклероза. Опыты на грызунах с предрасположенностью к болезням сердца и диетой с лецитином из яичных желтков, у мышей не лишенных кишечной микрофлоры, угроза ССЗ исчезала, несмотря на провоцирующую диету.

Вместе с тем, артерии мышей лишенных кишечной микрофлоры быстро обрастали жировыми бляшками.

В работах ряда исследователей указывается на то, что в основе патогенеза ССЗ могут лежат как генетические, так и экологически детерминированные факторы. Кишечная микрофлора является фильтром для самого мощного воздействия на человека со стороны окружающей среды – нашей пищи. Одним из наиболее значимых последствий воздействия среды обитания является активация процессов СРО, протекающих с участием свободных радикалов (СР) и, в итоге,

окислительный стресс. Неблагоприятное воздействие окружающей среды с одной стороны вызывает дисбаланс нормальной микрофлоры кишечника, в результате чего кишечник становиться дополнительным источником токсинов эндогенного происхождения, с другой стороны, является одной из причин повышения проницаемости кишечного эпителия и, как следствие, усиленного поступления вредных агентов в системный кровоток, а также транслокации условно-патогенных микроорганизмов. Детоксикация ксенобиотиков, поступающих из кишечника, происходит в печени преимущественно за счет их окисления, с образованием свободных радикалов (СР) в качестве побочных продуктов. Значительное количество СРобразуется в процессе жизнедеятельности условно-патогенных микроорганизмов в просвете кишечника, а также при уничтожении микроорганизмов, преодолевших барьер кишечного эпителия. Свободные радикалы высоко атерогенны, так как способны вызывать повреждение различных биологических структур, включая клетки эпителия слизистой кишечника. Инактивация токсинов в просвете кишечника на фоне, с одной стороны, селективного подавления жизнедеятельности потенциально патогенных микроорганизмов и восстановления целостности

37

эпителиального кишечного барьера, с другой, существенно снижает поток микробов и токсинов из кишечника. Тем самым устраняется сама причина образования значительного количества радикалов, главным образом, в печени. Заслуживают пристального внимания результаты исследования Золотаревой Г.Н. по изучению влияния споробактерина на липидный профиль больных с сердечно-сосудистой патологией. Было показано, что эффективность курса лечения споробактерином (в течение трех недель) сопоставима по эффективности с курсом лечения статинами (в течение шести месяцев).

Таким образом, необходимы дальнейшие углубленные исследования изменений микробиоты человека в патогенезе развития хронических неинфекционных заболеваний,

разработка и внедрение новых нефармакологических методов лечения.

ИЗУЧЕНИЕ БИОАККУМУЛИРУЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ ПРОБИОТИЧЕСКИХ

ШТАММОВ МИКРООРГАНИЗМОВ ИОНОВ КАДМИЯ И СВИНЦА В УСЛОВИЯХ IN

VITRO

Н.В. Морозова Оренбургский государственный университет, г. Оренбург,

Кафедра биохимии и микробиологии Заведующий кафедрой – доц., д.м.н. Е.С. Барышева Научный руководитель – доц., к.б.н. А.Н. Сизенцов

Актуальность: Производственная деятельность человека сопровождается глобальным обогащением окружающей среды вредными веществами. Одной из серьезных проблем экологии является защита окружающей среды от загрязнения тяжелыми металлами. Возрастающий объем ядовитых отходов наносит вред здоровью человека при прямом контакте или загрязнении пищи и питьевой воды. Миграция токсических элементов в объектах внешней среды ведет к накоплению их в воде, почве, кормах, организмах животных и, через продукты питания, у человека.

Оренбургская область является крупным многоотраслевым промышленным и топливно-

энергетическим комплексом и занимает одно из ведущих мест среди регионов России по загрязнению окружающей среды.

Особенностью металлов по сравнению с другими элементами является их тенденция к биоаккумуляции. Известно, что способность концентрировать металлы, в том числе и тяжелые,

очень широко распространена в природе среди различных организмов. Настоящими

«рекордсменами» по извлечению тяжелых металлов из окружающей среды являются микроорганизмы.

38

В связи с этим целью нашего исследования является: изучение способности бактерий рода

Bacillus, входящих в состав пробиотических препаратов, к накоплению ионов кадмия и свинца в условиях in vitro.

Исходя из поставленной цели нами были определены следующие задачи:

- определить минимальные подавляющие концентрации тяжелых металлов на рост бактерий рода

Bacillus, входящих в состав пробиотических препаратов;

-изучить влияние ионов кадмия и свинца на динамику роста бактерий рода Bacillus;

-изучить способность бактерий рода Bacillus накапливать ионы кадмия и свинца в биомассе при их совместном культивировании.

Материалы исследования: В работе использовались три пробиотических препарата: «Споробактерин жидкий», «Биоспорин» и «Бактисубтил». Основу выбранных препаратов составляют бактерии рода Bacillus.

Род Bacillus – обширный (около 217 видов) род грамположительных, крупных и среднего размера, прямых или слабоизогнутых палочковидных бактерий, образующих внутриклеточные споры. Бактерии данного рода являются аэробами или факультативными анаэробами, большая часть представителей хемоорганогетеротрофы и растут на простых питательных средах.

Некоторые виды способны к нитратредукции. Также большинство видов подвижно и обладают жгутиками расположенными перетрихиально.

В качестве регулирующих факторов в работе использовались следующие соли: Pb(NO3)2 –

нитрат свинца и CdSO4 8Н2O – восьмиводный сульфат кадмия. При выборе металлов исходили из того, что они являются наиболее распространенными (в случае свинца) и наиболее опасными (в

случае кадмия) загрязнителями окружающей среды.

Методы исследования: Метод последовательных разведений был использован для определения минимальных подавляющих концентраций солей тяжелых металлов на рост бактерий рода Bacillus.

Для выполнения данного этапа работы предварительно были приготовлены: стерильная жидкая питательная среда (МПА), стерильные пробирки – по 13 штук для каждой серии разведений, стерильные 0,5 М растворы тяжелых металлов, взвеси культур микроорганизмов

(B.subtilis 534, B.subtilis 3, B.cereusIP 5832, B.licheniformis).

Для приготовления растворов солей исследуемых металлов взвешивались навески, исходя из расчетов, и растворялись в 100 мл дистиллированной воды. Растворы автоклавировались при

121 0С, в течении 15 минут и доводились до значения pH = 7. Бациллы из пробиотических препаратов высеивались на 1,5 % МПА и инкубировались в термостате 24 часа при T = 370С.

Эксперимент проводился в трех повторностях. В пробирки автоматической пипеткой вносились по 3 мл мясопептонного бульона (МПБ), кроме первой (в первую вносилось 4 мл среды

39

и 1 мл 0,1 М раствора соли тяжелого металла). Таким образом, в первой пробирке был 0,02 М

раствор металла. Содержимое первой пробирки тщательно пипетировалось с последующим переносом 3 мл во 2-ую пробирку, из 2-й в 3-ю, из 3-й в 4-ю и так до 10-й, из которой 3 мл удалялось.

В результате титрования, в каждой последующей пробирке содержалась концентрация в двое меньше, чем в предыдущей. Содержимое 11-й пробирки служило контролем роста бактерий,

12-й – контролем стерильности питательной среды, а 13-й контролем стерильности раствора соли металла. Для приготовления каждого разведения использовался стерильный наконечник пипетки.

Во все пробирки, кроме 12-й и 13-й, вносилось 30 мкл суспензии микроорганизмов. Суспензии готовились из суточных агаровой культур по стандарту мутности. Посев инкубировали в термостате в течение суток.

Учет результатов проводился визуально, при этом отмечалось наличие роста (сравнивали с контролем роста микроорганизма) или его отсутствие (сравнивали с контролем среды). Затем отмечалась последняя пробирка с полной видимой задержкой роста микробов. Количество солей тяжелых металлов в этой пробирке является минимальной подавляющей концентрацией (МПК)

для испытуемого штамма.

Фотоэлектроколориметрический метод. Для определения оптической плотности бактериальной суспензии с целью дальнейшего построения кривой роста в периодической культуре нами был использован фотоэлектроколориметр (ФЭК-КФК-2).

Измерение оптической плотности бактериальной суспензии проводилось с интервалом в три часа, начиная с нулевого часа, и продолжалось до получения трех приблизительно равных значений, что означало наступление стационарной фазы. В промежутки времени между измерениями пузырьки помещались в термостат при T = 37 0С на шейкеры (Shaker) для постоянного перемешивания.

По результатам полученных оптических плотностей с помощью программы MicrosoftExcel

выстраивались кривые роста в периодической культуре, в том числе в присутствии токсикантов.

Каждая точка кривой роста представляет собой среднее значение трех независимых экспериментов.

Атомно-абсорбционный метод. Метод основан на свойстве атомов химических элементов,

образующихся при распылении зольных растворов в пламя ацетилен-воздух, поглощать свет определенной длины волны. В качестве атомно-абсорбционного спектрофотометра использовался прибор типа AAS-1 (ГДР) с набором спектральных ламп.

Подготовка к анализу требует приготовления 20 % раствора азотной кислоты 5 % KOH,

стандартных растворов металлов и суточных культур исследуемых микроорганизмов.

40