Сборник материалов заочной конференции .docx
.pdfγ-герпесвирусы характеризуются тропностью к лимфоидным клеткам (Т- и В-лимфоцитам),
в которых они длительно персистируют и которые могут трансформировать, вызывая лимфомы,
саркомы. В эту группу входят вирус Эпштейна-Барр и HHV-8-герпес – вирус, ассоциированный с саркомой Капоши (KSHV).
Лабораторная диагностика герпетической инфекции основаны на следующих принципах:
выявление вируса per se (электронная микроскопия); выявление и идентификация вирусов посредством взаимодействующих с ними клеток (накопление вирусов в чувствительных к ним клетках); выявление и идентификация вирусов с помощью антител (ИФА, РН, РСК); выявление и идентификация нуклеиновых кислот (ПЦР).
Электронная микроскопия: быстрая диагностика позволяет обнаружить вирус герпеса или их компоненты непосредственно в пробах, взятых от больного, и дать быстрый ответ через несколько часов. Возбудитель выявляют с помощью электронной микроскопии клинического материала при негативном контрастировании. Серологические методы уступают по информативности и чувствительности другим способам лабораторной диагностики и не позволяют с достаточной степенью достоверности установить этиологию той или иной формы заболевания. Нарастание титров антител происходит в поздние сроки (через несколько недель)
после заражения или реактивации вируса, и в то же время оно может и не наблюдаться у иммунодефицитных лиц. Для установления 4-кратного нарастания титра антител к герпесвирусной инфекции (показатель первичной инфекции) необходимо исследование парных сывороток. Серологические реакции (РСК, РН) обладают высокой специфичностью, но относительно низкой чувствительностью, а кроме того, сложны в постановке. Широкое практическое применение получили иммунофлюоресцентный метод, ИФА. Наиболее точным методом диагностики герпесвирусной инфекции является выделение вируса из различных клеточных культур. Для обнаружения вируса герпеса используют молекулярно-биологические методы: полимеразную цепную реакцию и реакцию молекулярной гибридизации, которые позволяют выявить наличие вирусной нуклеиновой кислоты в исследуемом материале. ПЦР может считаться самой чувствительной и быстрой реакцией. Чувствительность метода дает возможность определить одну молекулу искомой ДНК в образцах, содержащих 10 клеток.
Лечение герпетической инфекции до настоящего времени остается сложной задачей.
Хроническое течение процесса приводит к иммунной перестройке организма: развитию вторичной иммунной недостаточности, угнетению реакции клеточного иммунитета, снижению неспецифической защиты организма. Несмотря на разнообразие лекарственных препаратов,
использующихся для лечения герпетической инфекции, лекарственных средств, обеспечивающих полное излечение от герпеса, не существует. Герпес-вирусная инфекция относится к трудно контролируемым заболеваниям. Это связано, в первую очередь, с разнообразием клинических
11
поражений, развитием резистентности вируса к лекарственным средствам, наличием у герпесвирусов молекулярной мимикрии. Поэтому для успешного лечения герпетической инфекции необходимо правильно подобрать противовирусный препарат, его дозу и длительность лечения, использовать комбинацию различных лекарств. В схемы терапии для повышения эффективности лечения необходимо также включать иммунобиологические препараты,
способствующие коррекции иммунного статуса, а также патогенетические средства, облегчающие состояние пациента. В настоящее время все антигерпетические средства подразделяются на 3
основные группы антивирусных препаратов: химиопрепараты, препараты-иммуномодуляторы и препаратыиндукторы ИФН. Особое место среди средств антигерпесвирусной терапии занимает герпетическая вакцина для активации клеточного иммунитета, его иммунокоррекции в фазе ремиссии. Вакцинация преследует 2 цели: предупреждение первичной инфекции и возникновения состояния латентности, а также предупреждение или облегчение течения заболевания. Однако,
несмотря на наличие обширного списка антигерпетических препаратов, герпес остается до сих пор плохо контролируемой инфекцией. Это обусловлено и генотипическими особенностями возбудителя, и длительной персистенцией вируса в организме, и формированием штаммов,
устойчивых к антивирусным препаратам. Максимальный клинический эффект может быть получен только при рациональной комплексной терапии лекарственных средств с различным механизмом действия.
Герпесвирусные инфекции широко распространены в мире и имеют тенденцию к неуклонному росту. Особенностью герпесвирусной инфекции является возможность вовлечения в инфекционный процесс многих органов и систем, чем и обусловлено многообразие вызываемых герпесвирусами заболеваний, варьирующих от простых кожно-слизистых до угрожающих жизни генерализованных инфекций. Важное свойство герпесвирусов — это способность после первичного инфицирования в детском возрасте пожизненно персистировать в организме и реактивироваться под влиянием различных экзо- и эндогенных провоцирующих факторов.
Профилактика и лечение герпесинфекции являются сложной задачей и должны решаться комплексно специалистами разных профилей.
12
РЕГИОНАЛЬНАЯ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТЬ ЭШЕРИХИЙ
Г.М. Габитова Оренбургский государственный медицинский университет, г. Оренбург
Кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии Заведующий кафедрой – проф., д.б.н. Е.А. Михайлова Научный руководитель – доц., к.м.н. И.Э. Ляшенко
Лекарственная устойчивость энтеробактерий, изучению которой посвящено значительное число исследований, остается актуальной проблемой.
Целью настоящей работы явилось изучение антибиотикорезистентности кишечных палочек, выделенных из воды и организма здоровых детей в городе Оренбурге.
Были изучены штаммы кишечной палочки, выделенные от здоровых детей в возрасте до четырех лет – 33 штамма, из воды открытых водоемов реки Урал – 17 штаммов, из воды водопроводных источников города Оренбурга – 11 штаммов. Методом стандартных индикаторных дисков определена резистентность выделенных культур к 8 антибиотикам: канамицину,
ампициллину, полимиксину, тетрациклину, карбенициллину, левомицетину, стрептомицину.
Результаты исследования показали, что все штаммы, независимо от источника выделения,
обладали резистентностью к двум и более антибиотикам. Эшерихии, выделенные из кишечника здоровых детей, существенно не отличались по антибиотикорезистентности от культур,
выделенных из водопроводной воды. От 80% до 100% штаммов обеих групп были устойчивы к ампициллину, эритромицину и стрептомицину. Набор детерминант резистентности в этих группах также существенно не отличался. От 3% до 9% штаммов обладали устойчивостью к 6
антибиотикам, около 18% штаммов – к 5 антибиотикам, 42 – к 4% и 21% - к 3 антибиотикам. Что касается кишечных палочек, выделенных из воды открытых водоемов, то практически все исследуемые штаммы устойчивы только к двум антибиотикам – эритромицину и ампициллину.
Спектр детерминант резистентности в этой группе оказался минимальным и не превышал устойчивости к трѐм антибиотикам.
Для количественной характеристики антибиотикорезистентности штаммов, выделенных из различных экологических ниш, был определен ―маркер резистентности‖ (Бондаренко В.И., 1990).
Наиболее высоким этот показатель оказался у бактерий, выделенных от детей (3,8), а также из водопроводной воды (3,5). Вода открытых водоемов содержала меньше штаммов с множественной устойчивостью к антибиотикам (маркер резистентности – 2,5).
Таким образом, изучение антибиотикорезистентности эшерихий, выделенных из различных экологических ниш, выявило высокую резистентность штаммов независимо от источника выделения. Минимальное количество в воде открытых водоемов эшерихий, обладающих
13
множеством детерминант резистентности, наличие низкого по сравнению с другими группами «маркера резистентности» связано, по-видимому, с отсутствием селективного влияния антибиотиков в этой среде. Высокие маркеры резистентности и широкий спектр детерминант резистентности эшерихий, выделенных из организма детей и водопроводной воды могут, в известной степени, ориентировать на оценку и прогнозирование эпидемиологической ситуации в обследуемом регионе.
ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПО ТУБЕРКУЛЕЗУ В ОРЕНБУРГСКОЙ
ОБЛАСТИ
М.А. Исаева Оренбургский государственный медицинский университет, г. Оренбург
Кафедра микробиологии вирусологии и иммунологии Заведующий кафедрой – проф., д.б.н. Е.А. Михайлова Научные руководители – асс. Н. Ю. Кащук, асс. Д. Г. Укубаева
Туберкулез остается одной из самых актуальных медицинских и социальноэкономических проблем. По интенсивности данного заболевания можно, в определенной мере, судить о социально-экономической ситуации в стране или регионе. По литературным данным известно что, в современный период одна треть населения мира инфицирована возбудителем туберкулеза, из них 5-10% становятся больными.
Рост заболеваемости обусловлен большим резервуаром инфекции, несвоевременным выявлениям бациллярных больных, рассеивающих палочку Коха. Большое значение имеет эндогенная реактивация, особенно в группах риска. Позднее выявление запущенных форм, остро прогрессирующие процессы, особенно вызванные лекарственно-устойчивыми микобактериями, являются причиной высокой смертности.
Всемирная организация здравоохранения назвала туберкулез глобальной опасностью еще в 1993 году. В настоящее время Оренбургская область занимает одну из лидирующих позиций по данному заболеванию.
Цель нашего исследования: оценить статистические показатели по туберкулезу в Оренбургской области.
Для оценки эпидемиологической обстановки в Оренбургской области и определения основных тенденций развития эпидемического процесса в регионе был проведен анализ основных статистических данных, утвержденных постановлениями Госкомстата России (форма №33 и форма №8), характеризующих распространение туберкулеза.
14
Показатели заболеваемости туберкулезом в Оренбургской области в целом выше, чем по России: на период 2013 года общая заболеваемость по форме № 8 составляла 71,1%, тогда как по России – 53,4%.
Если рассматривать отдельные районы Оренбургской области, то на 2014 год наблюдался рост показателя заболеваемости в 17 территориях области. Значительно превышен областной показатель (66,9 на 100 тыс. населения – ф.33) в г. Медногорске (131,4 на 100 тыс.), г. Новотроицке (94,3 на 100 тыс.). Среди районов хуже всего обстоят дела в Новоорском (105 на 100 тыс.), Акбулакском (102,4 на 100 тыс.), Домбаровском (98,4 на 100 тыс.), Ясненском (94,2 на 100 тыс.), Соль-Илецком (88,2 на 100 тыс.) районах. Но, несмотря на высокие цифры заболеваемости, наблюдается ее ежегодное снижение на 2-5%.
В 2014 году по сравнению с 2010 – 2013 гг. в Оренбургской области улучшились следующие показатели:
-общая заболеваемость (по форме № 8) – снижение на 9,9% (с 96,1 до 80,2 на 100 тыс. населения);
-заболеваемость детей тоже снизилась на 4,9% (с 13,4 до 12,2 на 100 тыс. населения);
-заболеваемость подростков снизилась на 11, 6% (с 40,2 до 30,1 на 100 тыс. населения). Также отмечено снижение смертности от данного заболевания. Так, смертность от
туберкулеза по форме № 33 в 2014 г. снизилась на 27,8 % (с 10,3 до 8,1 на 100 тыс. населения).
По сравнению с 2013 г. в 2014 г. почти в 2 раза уменьшилось число ранних рецидивов (1,9 на 100 тыс.), положительная динамика за год составила 44%. Этот показатель характеризует одновременно как состояние эпидемической ситуации, так и, в первую очередь, качество оказания помощи больным туберкулезом.
В настоящее время основным методом выявления данного заболевания, среди населения начиная с 15-летниго возраста, является флюорографический метод.
С 2014 года утверждена периодичность прохождения профилактических флюорографических осмотров для населения области – не реже 1 раза в год и введена новая форма отчета по ежемесячному мониторингу выполнения планов флюороосмотров на туберкулез. Все эти меры должны поспособствовать более раннему выявлению заболевания и предотвращению его, что дает надежду на улучшение ситуации по заболеваемости туберкулезом и отразится на изучаемых статистических показателях в следующим году.
15
АНАЛИЗ ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИХ
СОЕДИНЕНИЙ
Л.И. Исламуратова, Н.С. Ахмадиев Башкирский государственный медицинский университет, г.Уфа
ФГБУН Институт нефтехимии и катализа РАН Кафедра фундаментальной и прикладной микробиологии Заведующий кафедрой – проф., д.м.н. А.Р. Мавзютов ФГБУН Уфимский Институт биологии РАН
Научный руководитель – доц., к.б.н. Н.Ф. Галимзянова
Онихомикоз – грибковая инфекция ногтевой пластинки, вызываемая различными видами патогенных грибов. Основные виды дерматофитов, выделяемые при онихомикозе:
Trichophytonrubrum, T. mentagrophytes, T.interdigitale, а также Epidermophyton floccosum, T. violaceum и T.tonsurans. В последние годы отмечается изменение таксономического состава возбудителей онихомикоза, в котором начали доминировать виды микромицетов, считавшиеся ранее факультативными патогенами. Основной прогресс в создании антимикотических средств связан с поиском новых соединений перспективных для применения в качестве лекарственных препаратов в медицине. Особенность разработки средств борьбы с грибами заключается в постепенном развитии у них устойчивости к применяемым веществам, поэтому существует постоянная необходимость в поиске новых или модификации существующих антимикотических соединений.
Целью настоящей работы было изучение фунгицидной активности двух новых соединений
(ANS-11-3-[(Фенилсульфанил)метил]пентан-2,4-дион и ANS-12-3 [(Трет-бутилсульфанил)
метил]пентан-2,4-дион). Тест – культурами служили: Bipolarissorokiniana, Fusariumoxysporum, Rhizoctoniasolani. Эти микромицеты являются возбудителями болезней сельскохозяйственных растений, контаминируют многие конструкционные материалы и способны вызывать микозы у человека и животных. В качестве представителя рода Trichophyton был использован вид –
Trichophytonterrestre Durie D.Frey [Саттон, 2001]. Анализ фунгицидной активности проводили,
используя метод диффузии в картофельно-глюкозный агар. Испытуемые вещества были использованы в концентрациях 0,1, 0,2 и 0,5%.
Оценка действия новых соединений на развитие микромицетов показала, что фунгицидную активность проявило гетероциклическое соединение ANS-11, в концентрации 0,5% подавлявшее развитие всех тест-объектов.
16
Другое соединение – ANS-12 не проявило способности к подавлению роста изученных тест-объектов, однако в концентрациях 0,2% и 0,5% это вещество угнетало развитие T. terrestre в
зоне своего действия.
Анализ результатов исследований показывает, что наиболее перспективным для разработки на его основе действующего вещества – антимикотика является гетероциклическое соединение 3-
[(Фенилсульфанил)метил]пентан-2,4-дион.
ПОЛУЧЕНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ БАКТЕРИЦИДНЫХ И ФУНГИЦИДНЫХ СВОЙСТВ
МОДИФИЦИРОВАННЫХ ПИЩЕВЫХ ПЛЕНОК С НАНОСЛОЯМИ СЕРЕБРА
А.Д. Клемина Ивановская государственная медицинская академия, г. Иваново
Кафедра микробиологии и вирусологии Заведующий кафедрой – проф., д.м.н. Е.В. Гарасько Научный руководитель – проф., д.м.н. Е.В. Гарасько
Известно, что продукты питания часто подвержены воздействию микроорганизмов,
которые могут изменять натуральные свойства сырья и продуктов, приводя к ухудшению их качества. Наиболее перспективным направлением повышения сроков хранения продовольственных товаров считают использование специальных упаковочных материалов,
способных защитить продукт от негативных факторов внешней среды, а также снизить скорость микробиологической порчи.
Данная работа является продолжением многолетних исследований биоцидных свойств различных материалов (таких как лен, хлопок, фуллерены, полипропиленовые нити и тд)
модифицированных наночастицами меди (совместно с Институтом Химии неводных растворов РАН, г. Иваново). Новизна данной работы состоит в исследовании композиционных материалов,
полученных при помощи наночастиц другого металла – серебра.
Объектом исследования стала модифицированная пищевая пленка с нанослоями серебра.
Наночастицы серебра были получены на базе Ивановского Государственного Химико-
Технологического Университета (ИГХТУ). Модифицированные пищевые пленки получали на установке магнитронного напыления УМН-180 также на базе ИГХТУ. Предположительно,
препараты на основе серебра, как и сам металл, обладают бактерицидным, противовирусным, ярко выраженным противогрибковым и антисептическим действием и служат эффективным обеззараживающим средством по отношению к патогенным микроорганизмам, вызывающим острые инфекции.
17
Цель – изучить бактерицидные и фунгицидные свойства модифицированных пищевых пленок с нанослоями серебра на плотных и жидких питательных средах.
Материалы и методы. Для получения модифицированных пищевых пленок с нанослоями серебра использовался метод магнетронного распыления. Изучение бактерицидных и фунгицидных свойств модифицированных пленок проводилось на плотных и жидких питательных средах по общепринятой методике с использованием в качестве тест-организмов клеток бактерий
S.аureus, E.coli и грибов рода Candida.
Результаты. Показано, что под образцами модифицированных пленок обнаружено полное отсутствие роста тест-организмов. При высеве из жидкой питательной среды также наблюдалось отсутствие роста тест-культур.
Заключение. Установлено, что модифицированные пищевые пленки с нанослоями серебра обладают бактерицидными и фунгицидными свойствами в отношении тест-организмов. Данный факт подтверждает эффективность работы наночастиц серебра в качестве антисептика.
Полученные результаты могут служить основой для возможного применения этих пленок в пищевой промышленности.модифицированные пленки по необходимым для применения свойствам не уступают оригинальному материалу.
МИКРОФЛОРА КОНЪЮКТИВАЛЬНОЙ ПОЛОСТИ В НОРМЕ И ПРИ ПАТОЛОГИИ
Коннова С.М.
Оренбургский государственный медицинский университет, г. Оренбург Кафедра микробиологии вирусологии и иммунологии Заведующий кафедрой – проф., д.б.н. Е.А. Михайлова
Научные руководители – доц., к.м.н. Л.М. Азнабаева, доц., к.б.н. С.Б. Киргизова
Заселение микроорганизмами открытых полостей организма представляет один из видов взаимодействия живых существ в природе, осуществляемый в процессе фило- и онтогенеза хозяина. Состав микрофлоры конъюнктивальной полости и размножение ее представителей контролируется, прежде всего, самим организмом с помощью механических (десквамация эпителия, смывание слезой, мигание) и бактерицидных факторов: рН секрета, протеолитические ферменты слезы, компоненты естественной резистентности, содержащиеся в слезной жидкости секреторные иммуноглобулины. Баланс внутримикробных ассоциаций поддерживается самими микроорганизмами благодаря сложным симбиотическим отношениям.
В связи с этим представляется актуальным изучить особенности взаимодействия микроорганизмов, выделенных из конъюнктивальной полости здоровых и больных, по экспрессии факторов патогенности, что и явилось целью исследований.
18
Был изучен качественный и количественный состав микрофлоры конъюнктивальной полости 10 здоровых людей и 5 больных хроническим конъюнктивитом. В работе использовался классический бактериологический метод, методы определения гемолитической,
лецитовителлазной и плазмокоагулазной активностей (Биргер М.О., 1990), лизоцимной и антилизоцимной активностей (Бухарин О.В. и соавт., 1984). Изменения экспрессии факторов патогенности в условиях межмикробных взаимодействий изучались с использованием методов перекрестного посева (Бухарин О.В. и соавт., 2000).
В результате проведенных исследований установлено, что от здоровых людей из конъюнктивы чаще высевалось 4-5 видов микроорганизмов, тогда как микрофлора больных хроническим конъюнктивитом была представлена 1-2 видами. Было изучено 40 штаммов микроорганизмов. Микрофлору конъюнктивальной полости здоровых людей составляли штаммы
S.epidermidis (26,6±6,3%),S.lugdunensis (10,0±4,1%),S.hominis (16,6±5,2%), S.xylosus (10,0±4,1%),
S.simulans (6,7±3,4%), Str.mutans (6,7±3,4%), Str.equinus (10,0±4,1%), Str.agalactis (6,7±3,4%),
Str.pneumoniae (6,7±3,4%). Среди микроорганизмов, выделенных от больных хроническим конъюнктивитом, встречались штаммы S.warneri (5,0±3,4%), S.haemolyticus (2,5±2,4%), S.capitis
(2,5±2,4%), S.aureus (5,0±3,4%), Klebsiellaspp. (2,5±2,4%) и Proteusvulgaris (2,5±2,4%), которые в норме не выявлялись.
На следующем этапе изучалась экспрессия факторов патогенности у выделенных микроорганизмов. Установлено, что гемолитической активностью (ГА) обладали 16,7±6,8%
штаммов от здоровых и 50,0±15,8% штаммов от больных. Лецитовителлазная активность (ЛецА)
была присуща 6,7±4,5% штаммов-представителей нормальной микрофлоры и 50,0±15,8%
представителей патоценоза. Одним из факторов колонизации – лизоцимной активностью (ЛА)
обладали 57,0±9,0% представителей нормоценоза и 20,0±12,6% штаммов выделенных из патоценоза. Антилизоцимной активностью (АЛА) обладали в 27,0±8,1% случаев штаммы,
выделенные от здоровых и 80,0±12,6% штаммов от больных хроническим конъюнктивитом.
Вусловиях межмикробных взаимодействий были выявлены синергидные,
антагонистические и индифферентные влияния штаммов на экспрессию факторов патогенности.
Установлено, что микрофлора конъюнктивы здоровых лиц в 67,1-81,3% характеризовалась индифферентными взаимовлияниями штаммов по экспрессии гемолитической и лецитовителлазной активностям. Тогда как в условиях болезни проявлялась большая активность симбионтов по модификации факторов вирулентности и персистенции (ГА, ЛецА и АЛА): 27,5- 56,3%.
Таким образом, было установлено, что микрофлора конъюнктивы в норме характеризуется большим разнообразием видов, чем при хроническом конъюнктивите. Выделенные от больных штаммы в большем проценте случаев обладали факторами вирулентности и персистенции (АЛА),
19
тогда как для представителей нормофлоры чаще характерно наличие фактора колонизации (ЛА).
На слизистой конъюнктивы больных преобладали синергидные взаимодействия по экспрессии факторов патогенности. В дальнейшем планируется изучить модификацию факторов патогенности в парах «патоген-индиген» и «индиген-индиген» среди представителей микрофлоры конъюнктивальной полости в норме и при патологии.
ОЦЕНКА БИОТОКСИЧНОСТИ ДИ- И ПОЛИКАРБОНИЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
И.В. Коробова Оренбургский государственный университет, г. Оренбург
Кафедра биохимии и микробиологии Заведующий кафедрой – доц., д.м.н. Е.С. Барышева Научный руководитель – доц., к.б.н. А.Н. Сизенцов
Актуальность: Формирование устойчивости микроорганизмов к химическим соединениям остается одной из самых актуальных проблем современной микробиологии. Приобретенная устойчивость связана со способностью отдельных штаммов микроорганизмов сохранять жизнеспособность при высоких концентрациях химических соединений. Одним из перспективных путей преодоления устойчивости микроорганизмов является поиск и внедрение в практику новых соединений. В связи с этим, поиск веществ с антибактериальной активностью среди новых ди- и
поликарбонильных и гетероциклических соединений разных классов и изучение их антибактериального действия на различные микроорганизмы является актуальным и имеет прикладное значение.
Цель исследования: Оценить биологическую эффективность ди- и поликарбонильных соединений, их гетерофункциональные и гетероциклические производные на микроорганизмы.
Задача исследования: Определить минимальную подавляющую концентрацию (МПК)
изученных веществ на микроорганизмы.
Структура соединений (O, N-гетеро) 1,3-диеновые звенья входят в состав многих полифункциональных структур, например, производных 1,3-дикетонов I, ацилпируватов II и 1,3,4,6-тетракарбонильных систем III, перспективных в синтезе биологически активных веществ.
Системы I и II характеризуются широким спектром биологической активности.
С целью получения и скрининга новых биологически активных 1,3,4,6-тетракарбонильных соединений III, их производных и продуктов химических превращений был синтезирован диметиловый эфир 3,4-диоксо-1,6-гександиовой (кетипиновой) кислоты, а также изучены продукты реакции. Изучено антимикробное действие данных соединений.
20