Prezentaciya-1
.pdfКлассификация ретикулоцитов (Гейльмейера).
•III группа – ретикулоциты с обрывками ретикулофиламентозной сети в разных участках цитоплазмы.
•IV группа – ретикулоциты с единичными нитями или гранулами ретикулофиламентозной сети в отдельных участках цитоплазмы.
Варианты ретикулоцитов
Ретикулоцит II группы
Тельца Жолли
Ретикулоцит I группы
Ретикулоцит III группы
Ретикулоцит – 2 точки IV группы
Окраска новым метиленовым синим
В норме в периферической крови содержится:
1.61% ретикулоцитов IV группы;
2.32% - III группы,
3.7% - II группы;
4.около 0,1% I группы.
•Левый сдвиг (в сторону II,I,0 групп) на фоне ретикулоцитоза наблюдается при активации эритропоэза.
Технология с использованием флуоресцентного красителя в гематологических анализаторах
Схематическое устройство каналов флуоресцентной проточной цитометрии
Полупроводниковй
Флуоресцентный сигнал
лазер
боковое
светорассеяние лазерного луча
Поток
клеток
прямое (малоугловое) светорассеяние
Флуоресцентная проточная цитометрия
•Флуоресцентный краситель связывается с нуклеиновыми кислотами, которые содержатся в клетках крови.
•Прибор анализирует несколько сигналов:
1.Прямое светорассеяние (размер клетки);
2.Боковое светорассеяние (внутреннее содержимое);
3.Флуоресцентный сигнал (содержание ДНК/РНК)
Флуоресцентная технология и ретикулоциты
•Флуоресцентный краситель связывается с ДНК/РНК, следовательно окрашивает содержимое ретикулоцитов.
Прямое светорассеяние (размер)
Флуоресцентный сигнал
Недостатки автоматизированного метода
Результаты подсчета будут зависеть от
1.выбранного флуорохрома;
2.времени экспозиции флуорохрома;
3.От температуры, при которой смесь находится после
смешивания с реагентом;
4.Выбора нижней пороговой величины, уровень,
позволяющей отсечь фоновую автофлуоресценцию;
выбора верхней пороговой величины, позволяющий
флуоресценцию ядерных клеток.
•Сходные проблемы есть при использовании
нефлуоресцирующих методик.
Ретикулоцитарные параметры
• Классические параметры ретикулоцитов:
RET% - относительное количество ретикулоцитов в % или
‰;
RET# - абсолютное количество ретикулоцитов х109/л.
• Дополнительные параметры:
Средний объем ретикулоцитов; Среднее содержание гемоглобина в ретикулоците; Фракция незрелых ретикулоцитов.
Ретикулоцитарные параметры
• Диагностические параметры ретикулоцитов:
RET #,%
LFR #,%
MFR #,%
HFR #,%
IRF #,%
RET-He
• Исследовательские параметры:
RBC-O;
FRC#,%
RBC-He; Delta-He RET-TNC.