Наследственные аномалии лейкоцитов

1. Пельгеровская аномалия (пельгеровский семейный вариант лейкоцитов) - это изменение крови, наследуемое по доминантному типу, при котором нарушается процесс сегментации ядер нейтрофилов: форма лейкоцитов остается иной, похожей на метамиелоцит, а ядро уже “старое”, созревшее. Структура ядер Пельгеровских лейкоцитов грубоглыбчатая, пикнотическая. Большинство пельгеровских нейтрофилов имеет однодолевое, несегментированное ядро, по форме сходное с палочкоядерными клетками.

Пельгеровские особенности - короткие перемычки и комковатое строение ядра. Встречаются 2-х сегментированные ядра.

По способности к фагоцитозу, содержанию ферментов, длительности жизни пельгеровские нейтрофилы не отличаются от нормальных зрелых нейтрофилов.

Изменения нейтрофилов, сходные с пельгеровской аномалией, могут возникнуть и как вторичное явление (псевдопельгеровская аномалия) при некоторых заболеваниях - острые кишечные инфекции, агранулоцитоз, лейкозы. Такие изменения носят временный преходящий характер. После выздоровления больного псевдопельгеровские лейкоциты исчезают. Для уточнения диагноза пельгеровской аномалии необходимо исследовать кровь родителей пациента, что позволяет избежать гипердиагностики сдвига лейкоцитарной формулы влево.

2. Асегментация ядер гранулоцитов, вариант Штодмейстера

В отличие от типично пельгеровских круглоядерных нейтрофилов с грубоглыбчатой, фрагментированной структурой и четкими контурами ядер, ядра клеток Штодмейстера характеризуются менее выраженной конденсацией хроматина и своеобразной бахромчатостью, состоящей из хроматиновых нитей, как бы выступающих из основного ядерного массива в цитоплазму. Клетки Штодмейстера - зрелые клетки нейтрофильного ряда.

3. Врожденная гиперсегментация ядер нейтрофилов

В этом случае преобладают нейтрофилы с 4 и более сегментами ядер. Морфологическая картина напоминает гиперсегментацию нейтрофилов при миелобластных анемиях.

4. Врожденная гиперсегментация ядер эозинофилов

Отмечается увеличение числа эозинофилов с 3-мя ядерными сегментами. Иногда выявляется и сегментация ядер моноцитов.

Лейкоконцентрат

При целом ряде заболеваний у больных часто имеет место выраженная лейкопения, когда исследование лейкоцитарной формулы и обнаружение патологических элементов затруднено, целесообразно приготовление лейкоконцентрата. Все существующие методики приготовления лейкоконцентрата основаны на:

• - гемолизе эритроцитов

• - центрифугировании

• - седиментации

Наиболее физиологичными являются методики, основанные на седиментации форменных элементов крови.

Методика лейкоконцентрации с гепарином

Рекомендуется при необходимости удаления тромбоцитов.

Принцип: при центрифугировании плазмы, разведенной холодным 0,85 % раствором хлорида натрия, тромбоциты оседают, а лейкоциты остаются во взвешенном состоянии.

Реактивы:

1. Гепарин 500 ед/мл

2. 0,85% NaCl

3. Краска Романовского (или азур - эозин)

4. Метанол для фиксации мазков

Ход исследования:

В пробирку с 1мл гепарина вносят 4 мл венозной крови, перемешивают переворачианием пробирки. Отстаивают 40-45 минут. Пипеткой отбирают плазму и переносят в центрифужную пробирку, стараясь не захватить эритроциты. Центрифугируют 10 мин. при 1500 об/мин.. Удаляют надосадочную жидкость, к осадку добавляют 5 мл холодного физиологического раствора. Центрифугируют 15 мин при 500-800 об/мин. Из осадка готовят мазки, фиксируют и окрашивают их по общепринятым гематологическим методикам.

Методика концентрации лейкоцитов с использованием трилона Б

Принцип: В результате ускорения оседания эритроцитов при добавлении в кровь трилона Б получается плазма, содержащая лейкоциты.

Реактивы:

1. Раствор трилона Б (этилендиаминтетраацетат натрия, ЭДТА)

2. Краска Романовкого (или азур-эозин)

3. Метанол для фиксации мазков

Ход исследования:

В пробирку с 1 мл 3% раствора трилона Б вносят 4 мл венозной крови, перемешивают, ставят в термостат при 37С на 30-45 мин. Образующийся над эритроцитами слой плазмы отсасывают пипеткой и вносят в центрифужную пробирку. Центрифугируют при 1000 об/мин 10 мин..

Удаляют надосадочную жидкость, на предметное стекло пастеровской пипеткой наносят каплю осадка, готовят из нее мазок, фиксируют и окрашивают по общепринятым гематологическим методикам.

Клиническое значение.

Преимущество исследования окрашенного мазка лейкоконцентрата перед исследованием мазков периферической крови имеет при острых лейкозах, особенно в алейкемической стадии, при лимфогрануломатозе, миеломной болезни и др. Оно позволяет выявить бластные клетки, оценить полноту ремиссии при остром лейкозе.

Лейкоконцентрат используют для проведения цитохимических исследований, имеющих важное диагностическое значение при острых лейкозах.

При миелопролиферативных заболеваниях в мазках концентрата обнаруживаются ядра мегакариоцитов. При лимфогрануломатозе, миеломной болезни выявляется повышенное содержание плазматических клеток. При лимфогрануломатозе могут быть найдены предстадии клеток Бередовского - Штернберга. Важным является исследование лейкоконцентратапри системной красной волчанке для выявления LE-клеток.

Лейкоцитарная формула при патологии