- •Медицинский колледж № 1
- •"Определение гемоглобина"
- •I. Организационно-методический блок.
- •Структурно-логические межпредметные связи.
- •Хронометраж занятия.
- •II. Блок материалов для обучения. Основные свойства гемоглобина.
- •Основные виды гемоглобина.
- •Формы гемоглобина.
- •Диагностическое значение определения гемоглобина.
- •Методы определения гемоглобина.
- •Возможные ошибки при определении гемоглобина.
- •III. Блок контролирующих материалов. Самоподготовка к занятию (домашнее задание).
- •Перечислите и дайте определение функциям крови:
- •Перечислите и укажите функции форменных элементов крови:
- •Перечислите реактивы, необходимые для определения гемоглобина гемоглобинцианидным методом:
- •Перечислите возможные ошибки при определении гемоглобина:
- •Запишите алгоритм обработки капилляров и скарификаторов. Тема может считаться хорошо усвоенной, если студент может:
- •Тестовые задания для самоконтроля по теме: "Определение гемоглобина в крови".
- •Определение гемоглобина имеет диагностическое значение при:
- •У взрослого здорового человека гемоглобин встречается в форме:
- •Гемоглобинопатии вызывают анемию:
- •Установите соответствие:
- •При работе с кровью и сывороткой для исключения заражения спиДом объект загрязнения обрабатывается:
- •Определите правильную последовательность физиологического превращения гемоглобина:
- •Раскройте физиологические механизмы регуляции всасывания
- •Для предотвращения заражения спиДом при работе в клинико-диагностической лаборатории необходимо неукоснительно соблюдать следующие правила:
- •Эталоны ответов. Самоподготовка к занятию (домашнее задание)
- •Ответы на вопросы самоконтроля.
- •Ответы на тестовые задания.
- •Инструкция по определению гемоглобина крови гемоглобинцианидным методом.
- •Нормальные показатели клинического анализа крови.
- •Новые методы определения гемоглобина. Определение гемоглобина в крови гемохромным методом "Гемоглобин-Ново".
- •Методическая литература по теме занятия.
Основные виды гемоглобина.
А1 – основной гемоглобин человека, гемы которого связаны с двумя α- и двумя β-цепями; имеет белковую формулу – α2β2, на его долю приходится 96-98 % от общего количества гемоглобина;
А2 – составляет 2-3,5 %;
HbF – фетальный гемоглобин, имеет белковую формулу α2γ2; у взрослых составляет 0,2-2 %. У новорожденного HbF составляет 60-80 % всего гемоглобина, через 6-8 месяцев его количество уменьшается до уровня взрослого человека.
Кроме указанных, у человека могут присутствовать так называемые минорные гемоглобины, отличающиеся аминокислотным составом белковых цепей. Аномалия гемоглобина, связанная с изменением в белковых цепях, называется гемоглобинопатией или гемоглобинозом. Изменения в полипептидных цепях приводят к изменению растворимости Hb, сродства гемоглобина к кислороду и др. Гемоглобинопатия может быть связана с заменой одного аминокислотного остатка на другой (например, серповидноклеточная анемия) или с нарушением синтеза цепей гемоглобина (например, группа талассемий).
Талассемии относятся к количественным гемоглобинопатиям. Вид и, соответственно, название заболевания определяется той полипептидной цепью, синтез которой нарушен: при α-талассемии нарушен синтез α-цепей, при β-талассемии – β-цепей и т.д. При всех видах талассемий повышается содержание малых фракций Hb, нарушается формирование эритроидных клеток и насыщение эритроцитов гемоглобином, а при всех гемоглобинопатиях снижается транспорт гемоглобином кислорода.
Различные виды гемоглобина разделяют с помощью электрофореза.
Гемоглобин, как и другие белки, неферментативно образует с глюкозой гликозидные связи и превращается в гликозилированный гемоглобин, уровень которого зависит от среднего уровня глюкозы в крови. У здорового человека гликозилированный гемоглобин составляет 2-5 %, а у больного сахарным диабетом – до 20 %. Гликозилированный гемоглобин, как и другие аналогичные белки, функционально неполноценен.
Все виды гемоглобина, присоединяя те или иные молекулы или ионы, образуют несколько форм, которые присутствуют или могут присутствовать в крови.
Формы гемоглобина.
HbOz (Fe2+) – окисленный гемоглобин – основная форма гемоглобина в артериальной крови (96-98 %);
HbH (Fe2+) – восстановленный гемоглобин – содержится преимущественно в венозной крови;
HbСО (Fe2+) – карбоксигемоглобин – у здорового человека содержится 0,25-2 %. HbСО образуется путем присоединения к гему окиси углерода (СО – угарного газа), небольшое количество которого постоянно присутствует в клетке. Уровень HbСО зависит от экологических факторов, вредных привычек, характера работы. Так, у курильщиков он повышается до 6,6 %, а у таксистов – до 20 %. Карбоксигемоглобин не способен к транспорту кислорода.
Met Hb (Hi, Fe3+) – метгемоглобин или гемиглобин – у здорового человека содержится 0,2-2 %. Наличие фермента НАДФН-метгемоглобин-редуктазы (диафоразы) в присутствии аскорбиновой кислоты обеспечивает восстановление железа в метгемоглобине. В ряде случаев наблюдается повышение содержания метгемоглобина. Концентрация Met Hb 10-20 г/л вызывает появление цианоза. Повышение содержания Met Hb в крови называется метгемоглобинемией. Различают первичные (врожденные) и вторичные (приобретенные) метгемоглобинемии:
Первичные метгемоглобинемии связаны с недостаточностью диафоразы, наличием аномальных гемоглобинов;
Вторичные метгемоглобинемии развиваются при сердечно-сосу-дистых заболеваниях, апластической и гемолитической анемиях, отравлениях фенолами, нитросоединениями, анилином, нитратами, нитритами, фенацетином, сульфонамидами, бромидами и др.
Met HbNO2 – нитрометгемоглобин –образуется при взаимодействии с нитритами и не восстанавливается до Hb в физиологических условиях; срок жизни его молекулы определяется сроком жизни эритроцита – 90-120 дней. Особую опасность нитритсодержащая вода представляет для новорожденных.
Свободный гемоглобин – образуется в результате естественного гемолиза эритроцитов, сопровождающегося разрушением молекулы гемоглобина: отщеплением белка, связыванием железа, раскрытием порфиринового кольца с последующим образованием желчных пигментов; часть гемоглобина, не подвергшаяся этим изменениям поступает в кровь – свободный гемоглобин. Его концентрация колеблется в пределах 10-40 мг/л; в плазме крови транспортируется в соединении с присутствующим в крови специальным белком – гаптоглобином, что способствует сохранению железа в организме.