59. Методы разделения липопротеидов на отдельные фракции. Электрофорез на бумаге, в пааг, ультрацентрифугирования

Метод ультрацентрифугирования позволяет разделить ЛП, используя их различие в плотности, которая зависит от соотношения количества липидов и белков в частице. Так как жир имеет меньшую, чем вода, плотность, то ХМ, содержащие более 85% жиров, располагаются на поверхности сыворотки крови, а ЛПВП, содержащие наибольшее количество белков, имеют самую большую плотность и при центрифугировании располагаются в нижней части центрифужной пробирки. Так как ЛП впервые были выделены из сыворотки крови методом ультрацентрифугирования, то в названии указывают плотность частиц. Однако метод ультрацентрифугирования непригоден для широкого использования, поэтому в клинических лабораториях обычно применяют метод электрофореза.

Скорость движения частиц при электрофорезе зависит от их заряда и размера. Заряд, в свою очередь, зависит от количества белков на поверхности ЛП. При электрофорезе в геле все типы ЛП движутся к положительному полюсу; ближе к старту располагаются ХМ, а ЛПВП, имеющие наибольшее количество белков и наименьший размер, удаляются от старта дальше других частиц.

Электрофорез на бумаге: образуются следующие фракции: α-фракция(повышенное содержание белка), β-фракция(среднее содержание белка), γ-фракция(малое содержание белка)

Электрофорез в ПААГ(полиакриламидный гель). Разделение ЛП сыворотки крови проводят в стеклянных трубках. В специальном штативе трубки заполняют гелем. Пробы предварительно окрашивают насыщенным раствором судана черного. Образуются следующие фракции: ХМ, преβЛП, β-ЛП, α-ЛП, комплекс: альбумины+ЖК.

60. Диагностическое значение определения содержания лп в сыворотке крови. Классификация липопротеинемий по Фридриксону.

Изменения в спектре отдельных фракций липопротеинов не всегда сопровождаются гиперлипидемией, поэтому наибольшее клинико‑диагностическое значение имеет выявление типов дислипопротеинемий, которое проводят по принципам, общим с типированием гиперлипопротеинемий по Фредриксону с соавт. (1965, 1971) с введением дополнительных типов гипер‑α‑ и гипо‑α‑липопротеинемий и гипоβ‑липопротеинемии:

Тип I: Гиперхиломикронемия

Обусловлена генетической недостаточностью липопротеинлипазы.

Лабораторные показатели: увеличение количества хиломикронов; нормальное или слегка повышенное содержание преβ‑липопротеинов; резкое увеличение уровня ТАГ. отношение ХС / ТАГ < 0,15

Клинически проявляется в раннем возрасте ксантоматозом и гепатоспленомегалией в результате отложения липидов в коже, печени и селезенке. Первичная гиперлипопротеинемия I типа встречается редко и проявляется в раннем возрасте, вторичная — сопровождает диабет, красную волчанку, нефроз, гипотиреоз, проявляется ожирением.

Тип II: Гипер‑β‑липопротеинемия

1. Подтип iIa:

Обусловлена замедлением распада ЛПНП и элиминацией холестерина, связанным с нарушением рецепторного эндоцитоза.

Лабораторные показатели: выcокое содержание β‑липопротеинов; нормальное содержание преβ‑липопротеинов; высокий уровень холестерина; нормальное содержание триацилглицеринов.