7. Качественное и количественное определение глюкозы в моче. Качественные реакции на глюкозу (Фелинга, Ниландера)

Проба Фелинга и Ниландера основаны на восстановительных свойствах глюкозы, которая в щелочной среде при нагревании, окисляясь, восстанавливает металл (в пробе Фелинга до Сu₂О - красный цвет, в пробе Ниландера до свободного Bi - черный цвет).

ПРОБА ФЕЛИНГА.

К 1 мл исследуемого раствора (мочи) приливают 0,5 мл реактива Фелинга, нагревают пробирку до кипячения и кипятят 1 мин. В случае положительной реакции на глюкозу наблюдается красное окрашивание вследствие образования оксида меди (Сu₂O).

ПРОБА НИЛАНДЕРА

К 1 мл исследуемого раствора (мочи) приливают 0,5 мл реактива Ниландера, нагревают пробирку до кипения и кипятят 1 минуту. В случае положительной реакции на глюкозу наблюдается выпадение черного осадка, вследствие образования свободного Bi.

8.Изучение углеводного обмена методом сахарной нагрузки:

а) нормальная сахарная кривая. Биохимические механизмы, определяющие изменения концентрации глюкозы после сахарной нагрузки.

б) изменения сахарной кривой, характерные для заболевания печени, щитовидной и поджелудочной желез.

Понятие «сахар крови» зависит от метода определения. Если в основе метода лежат редуцирующие св-ва глюкозы, то под «сахаром крови» понимают всю сумму редуцирующих вещ-в в крови и выражается в г/л (0,8-1,2). Если в основе метода лежит определение глюкозы по цветной реакции, то под «сахаром крови» понимается кол-во глюкозы в ней и выражается в моль/л (3,5-5,0). Сахар крови определяется натощак. Иногда сахар крови ниже нормы- гипогликемия, если выше нормы- гипергликемия. Если сахар крови превышает почечный порог (8-10ммоль/л.)- глюкозурия. Кол-во сахара в крови в норме, а в моче в избытке- почечный диабет. Исследования обмена углеводов методом сахарной нагрузки: 1 стакан сахара + 200мл. теплой воды, и втечение 3-х минут эта смесь должна быть съедена. Каждые 30 мин. У больного берут кровь и определяют кол-во сахара в течение 2-3 ч., строят сахарные кривые (рис. сахарной кривой). ВО показывает возрастание сахара в крови и называется гипергликемический отрезок. НО называется гипогликемическим отрезком. Если печень здорова, то максимум сахара будет через час, если больна, то раньше. Это зависит от кол-ва инсулина. Коэффициент Бодуэна- отношение сахара максимального к исходному. Коэффициент Рафальского- постгликемический коэффициент- отношение крови через два часа к исходному уровню.

Изучение углеводного обмена методом однократной сахарной нагрузки:

Принцип метода: однократная нагрузки глюкозой заключается в пероральном приёме раствора, содержащего 75 г глюкозы, растворённой в 200 мл тёплой кипячёной воды или некрепкого чая, выпивают в течение не более 5 минут. Кровь из пальца берут до нагрузки, а также через 30 минут в течение 2х часов.

Механизмы, обусловливающие динамику изменения концентрации глюкозы: первый подъём уровня глюкозы (30-я минута) отражает силу рефлекторного раздражения окончаний симпатических нервов при попадании глюкозы в пищеварительный тракт. Дальнейшее увеличение глюкозы (30-я минута – 1 час) связано с особенностями (быстротой) всасывания углеводов. Наступающее затем снижение содержания глюкозы (1-2 ч) – гипогликемическая фаза – отражает продукцию инсулина, а также функциональную активность парасимпатического отдела вегетативной нервной системы, состояние печени и других жизненно важных органов.

Для интегральной оценки гликемических кривых предлжено вычислять коэффициенты:

а). Гипергликемический коэффициент (коэффициент Бодуэна) – отношение максимальной концентрации глюкозы крови к исходной, т.е. натощак:

К Бодуэна= С глюкозы мах / С глюкозы исходн. В норме 1,3-1,5

б) Постгликемический коэффициент (коэффициент Рафальского) – показатель концентрации глюкозы через 2 ч после нагрузки разделённое на её исходное значение,, т.е. натощак

К Рафальского= С глюкозы 120 минут / С глюкозы исходн. В норме 0,9 -1,04