НОУ ВПО САМАРСКИЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ «РЕАВИЗ»

Кафедра медико-биологических дисциплин

МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА К ЛАБОРАТОРНОМУ ПРАКТИКУМУ ДЛЯ СТУДЕНТА

БИОХИМИЯ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ

Дисциплина: Биологическая химия

Исполнитель: д.б.н., профессор О.Н. Макурина

Разработка утверждена на

методическом совещании кафедры.

Протокол от “____”_____________ 2011 г.

Зав. кафедрой

д.м.н., проф. _______________Е.Г. Зарубина.

Самара 2011 г.

МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА ДЛЯ СТУДЕНТОВ

Тема № 12: Биохимия смешанной слюны

Жидкая среда полости рта образована сложной смесью секретов всех слюнных желез и десневой жидкостью, детритом полости рта, микрофлорой, содержимым десневых карманов, продуктами жизнедеятельности микрофлоры мягкого зубного налета, биологически активными веществами, продуцируемые лейкоцитами, продуктами их распада, остатками пищи и т.п.

Изменения качественного и количественного состава ротовой жидкости имеют важное значение для возникновения и развития кариеса зубов. Главными факторами физико-химической стабильности зуба являются рН ротовой жидкости и концентрация в ней кальция, фосфатов и фтористых соединений. Поэтому изучение качественного и количественного состава ротовой жидкости для выяснения возможных механизмов развития локальных патологических изменений в полости рта представляется очень важным для врача-стоматолога

В последние годы проводятся целенаправленные исследования по возможности использования смешанной слюны как биологической жидкости, получаемой неинвазивным методом для характеристики некоторых биохимических показателей, традиционно определяемых в плазме и сыворотке крови, т.е. с применением инвазивного подхода.

Цель занятия.

В результате лабораторного занятия будет достигнут пороговый уровень компетенций: ОК-1, ПК-47, ПК-48.

Студент должен знать:

• правила техники безопасности и работы в биохимических лабораториях

• характеристику ротовой жидкости

• физико-химические свойства смешанной слюны

• неорганические компоненты смешанной слюны

• белки и ферменты смешанной слюны

• специфические слюнные белки

• органические вещества небелковой природы

• защитные системы полости рта

• буферные системы слюны

• пищеварительную и минерализующую функции слюны

• роль биохимического исследования слюны в клинической практике

Студент должен уметь:

• пользоваться учебной, научной, научно-популярной литературой, сетью Интернет для подготовки к занятию

• пользоваться лабораторным оборудованием

• обнаруживать в смешанной слюне ионы кальция, фосфаты, хлориды, тиоцианаты

• пользоваться диагностическими полосками для определения рН, глюкозы в слюне и других биологических жидкостях

• выделять из слюны муцины и обнаруживать в их составе углеводный компонент

• открывать каталазу в слюне и другие органические вещества

• определять активность амилазы слюны

Студент должен владеть:

• базовыми технологиями биохимических исследований, преобразования информации различной сложности

• медико-биологическим понятийным аппаратом, современной биохимической терминологией

• основными навыками обращения с лабораторным оборудованием.

Интеграция темы.

Тема дисциплины и внутридисциплинарные связи

№ п/п	Внутридисциплинарные связи	Наименование темы
		Биохимия смешанной слюны
1	Строение, свойства и функции белков	+
2	Ферменты	+
3	Биосинтез нуклеиновых кислот. Основы молекулярной генетики	+
4	Биологические мембраны	+
5	Энергетический обмен	+
6	Обмен углеводов	+
7	Обмен аминокислот	+
8	Обмен нуклеотидов	+
9	Обмен и функции липидов	+
10	Гормональная регуляция обмен веществ и функций организма	+
11	Биохимия соединительной ткани	+
12	Биохимия смешанной слюны
13	Инактивация чужеродных соединений	+
14	Метаболизм гема и обмен железа	+
15	Биохимия крови	+

Тема дисциплины и междисциплинарные связи

№ п/п	Междисциплинарные связи	Наименование темы
		Биохимия смешанной слюны
1	Нормальная физиология	+
2	Патологическая физиология	+
3	Патологическая анатомия	+
4	Фармакология	+
5	Микробиология и вирусология	+
6	Иммунология	+
7	Клинические дисциплины: внутренние болезни	+
8	Профессиональные дисциплины: кариесология, имплантология, санология, профилактика стоматологичсеских заболеваний.	+

Время занятия: 135 мин (3 ч)

Оснащение. Диагностические полоски для определения рН или универсальная индикаторная бумага; уксусная кислота,3%-ный раствор; азотная кислота, 30%-ный раствор; нитрат серебра,1%-ный раствор; молибденовый реактив; оксалат аммония,4%-ный раствор; сульфат меди(II),2%-ный раствор; гидроксид натрия,10%-ный раствор; сульфосалициловая кислота, 20%-ный раствор; Реактив Феллинга; глюкотесты; фенол,10%-ный раствор; хлорид железа (III),1%-ный и 0,01%-ный растворы; уксусная кислота, концентрированная; α-нафтол,1%-ный спиртовой раствор; серная кислота, концентрированная; сульфат аммония, насыщенный раствор; пероксид водорода,1%-ный раствор; кислота хлористоводородная,2%-ный раствор; фенол,1%-ный раствор; молочная кислота, 0,1%-ный раствор; крахмал, 0,1%-ный раствор, свежеприготовленный; раствор Люголя: (в 100 мл дистиллированной воды растворяют 20 г йодида калия и 10 г йода; перед употреблением раствор разводят в 5 раз); 1%-ный раствор пероксида водорода.

Оборудование: стаканчики на 50 мл; бюретки на 10 и 20 мл, пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл; капельницы; фильтры; воронки; стеклянные палочки, водяная баня с термостатом; штатив с пробирками; вытяжной шкаф.

Материал. Слюна и слюна, разведенная в 10 раз.

Место пpоведения – биохимическая лаборатория.

Задание на дом.

Вопpосы для самоподготовки	Источники инфоpмации	Вопpосы самоконтpоля
Ротовая жидкость как многокомпонентная система	Лекции; Тумаков С.А. Биохимия в стоматологии. Учебное пособие. Самара: СМИ «РЕАВИЗ», 2007 (далее «Биохимия в стоматологии»).	1.Перечислите основные компоненты, составляющие ротовую жидкость. 2.Какие факторы влияют на качественный и количественный состав ротовой жидкости?
Слюна, как основной компонент ротовой жидкости.	Лекции; «Биохимия в стоматологии», стр.68	1.Какие три типа слюнных желез выделяют? 2.Какие железы относятся к серозным и какой секрет они вырабатывают? 3.Где расположены слизистые железы и какую слюну они вырабатывают? 4.Что такое смешанная слюна? 5.Какие железы продуцируют смешанную слюну 6.Факторы, влияющие на процесс саливации (слюноотделения). 7.К чему приводит уменьшение слюноотделения?
Основные физико-химические характеристики слюны	Лекции; «Биохимия в стоматологии», стр.69.	1.Опишите физические свойства смешанной слюны как биологической жидкости. 2.Выпишите численные значения в норме и при кариесе следующих показателей слюны: плотности, вязкости, рН
Химический состав смешанной слюны	Лекции, «Биохимия в стоматологии», стр.52,69-76.	1.Какие компоненты входят в состав слюны и в каких соотношениях? 2.Какова роль минеральных веществ в слюне? 3.В каком виде присутствуют неорганические компоненты в слюне? Что такое ионная сила слюны? Сравните ее с ионной силой плазмы крови, что характеризует этот показатель? 4.Какие неорганические компоненты имеют наиважнейшее значение в поддержании динамического равновесия между ротовой жидкостью и эмалью зуба? 5.Какую роль играет присутствие в ротовой жидкости ионов фтора? 6.Какие органические компоненты присутствуют в слюне? 7.Как делятся белковые компоненты слюны по функциональным свойствам? 8.Назовите слизеподобные белки, какова их химическая природа и какие функции они выполняют? 9.Ферменты слюны, участвующие в пищеварении. 10.Какие ферменты слюны выполняют защитные функции? 11.Какую функцию выполняют кислая и щелочная фосфатазы слюны? 12.Перечислите специфические и неспецифические иммунные факторы и внеклеточные регуляторы обмена веществ, обнаруженные в слюне.
Биологические функции слюны	Лекции; Тумаков С.А. Биохимия в стоматологии. Учебное пособие. Самара: СМИ: «РЕАВИЗ», 2007 (далее - «Биохимия в стоматологии»), стр.76-94.	1.Пищеварительная функция слюны. Какие белки и ферменты участвуют в переваривании пищи? Какова их химическая природа? Какое значение имеет определение активности амилазы слюны в клинической и судебно-медицинской практике? 2.Защитная функция слюны. Неспецифические защитные системы полости рта (лизоцим, лактоферрин, лакто- и миелопероксидазы, иммуноглобулины) и специфические защитные системы слюны (муцины и протеогликаны, статхерины и гистатины, белки, богатые пролином). Их вклад в защите ротовой полости. 3.Буферные системы слюны и их роль в поддержании кислотно-основного баланса в ротовой полости. 4.Минерализующя функция слюны. Почему в слюне, пересыщенной ионами кальция и фосфатов, не образуется трудно растворимые соли? Слюна как структурированная система.
Саливадиагностика	Лекции, Биохимия в стоматологии, стр.99-100	1.Преимущества неинвазивных методов исследования по сравнению с исследованием плазмы крови. 2.Почему для врача-стоматолога важное значение имеет исследование качественного и количественного состава слюны. 3. Какие компоненты слюны могут служить маркерами различных патологическтих состояний организма?
Подготовка протокола лабораторной работы.	Методические разработки кафедры.	Пользуясь описанием лабораторных работ, выполняемых на занятии, подготовьте протокол лабораторной работы, в котором необходимо отразить принцип метода и ход работы.