робота 3

МІНІСТЕРСТВО ОСВІТИ І НАУКИ УКРАЇНИ

НАЦІОНАЛЬНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ХАРЧОВИХ ТЕХНОЛОГІЙ

Кафедра біотехнології

і мікробіології

ПРАКТИЧНА РОБОТА № 3

з дисципліни

«Технологія мікробного синтезу лікарських засобів»

КИЇВ НУХТ 2017

1. Хімічна будова хлортетрацикліну.

Належить до антибіотиків тетрациклінового ряду

4S, 4aS, 5aS, 6S, 12aS)-7-хлор-4-диметиламіно-1,4,4а,5,5а,6, 11,12а-октагідро-3,6,10,12,12а-пентагідрокси-6-метил-1,11-діоксонафтацен-2-карбоксамід. [1]

2. На чому ґрунтується біологічна дія хлортетрацикліну? Механізм антибактеріальної дії тетрациклінів пов'язаний з придушенням білкового синтезу (блокада функції рибосом). [2]

3. Сфери використання антибіотика хлортетрацикліна.

Харчова промисловість:  єдиним антибіотиком, який отримав дозвіл органів охорони здоров'я на застосування його з метою консервування харчових продуктів, але тільки за особливих умов. [3]

Ветеринарія: призначають великій і дрібній рогатій худобі при актиномікозе, вібріозі, емфізематозному карбункулу, анаеробної дизентерії ягнят, інфекційної агалактії овець і кіз, плевропневмонії овець і кіз, копитної гнилі овець; свиням - при пиці, деяких формах дизентерії, набрякової хвороби, інфекційному атрофічному риніті; коням - при Миті, петехиальній гарячці, ; птиці - при пуллорозі, тифі, інфекційному ларинготрахеїту, респіраторному мікоплазмозе, орнітозі; хутровим звірам - при інфекційному стоматиті і риніті, чумі (для профілактики ускладнень).[2]

Медицина: У хірургії використовується для профілактики і лікування інфекційних ускладнень, при операціях на органах черевної порожнини, при хірургічному сепсисі, абсцесах легенів.

В офтальмології - для лікування кон'юнктивітів, блефаритів, кератитів, виразок рогівки та інших захворювань очей, викликаних чутливими до хлортетрациклину збудниками.

Місцево хлортетрациклина гідрохлорид використовується для лікування гнійних вогнищ (флегмон, абсцесів), опіків, маститів, гнійничкових захворювань шкіри. [4]

4.  Дайте характеристику технології одержання біоміцину кормового.

Кормові антибіотики отримують по спрощенній технологій з дешевої сировини.

В якості посівного матеріалу використовують спори, які при температурі 2-6 ° С можна зберігати до 3 місяців. Для розмноження культури в колбах використовують просте середовище (3% борошна, 3% кукурудзяного екстракту). Процес йде при рН 6,7-6,8, температурі 28-30 ° С протягом 24-30 год.

Далі посівний матеріал розмножують в посівних ферментерах до кількості, рівній 11-12% робочого об'єму головного ферментера. Для цього також використовують поживне середовище, що складається з борошна і кукурудзяного екстракту. Процес ферментації йде в аеробних умовах при 27-28 ° С, рН 6,6-6,7 протягом 30 годин Головну ферментацію ведуть в апаратах з мішалками або аерліфтними повітрярозподільними системами, що забезпечуює постачання культури киснем і перемішує середовище. [5]

5. Охарактеризуйте динаміку споживання компонентів поживного середовища

Серед джерел вуглецю найкращим вважается глюкоза, яка майже повністю споживається м/о через 40-45 годин розвитку.

Як джерела вуглецю S. aureofaciens використовує також жири, деякі органічні кислоти (наприклад, молочну), додавання яких до середовища з кукурудзяним екстрактом сприяє підвищенню утворенню хлортетрациклину, а також крохмаль і гліцерин.

Як джерела азоту, що сприятливо діють на розвиток мікроорганізму і біосинтез антибіотика, можуть застосовуватися амонійні солі, деякі амінокислоти, а також різні азотовмісні речовини рослинного і тваринного

походження (кукурудзяний екстракт, м'ясний екстракт, соєве борошно та ін.).

При культивуванні S. aurofaciens в середовищі з соєвим борошном, кукурудзяним екстрактом і вуглеводами стимулюючий вплив на вихід хлортетрацикліну надають окремі амінокислоти. Найбільше стимулюючу дію на біосинтез антибіотика надають валін, оксипролін і тирозин.

У процесі розвитку продуцента антибіотика в середовищі змінюється

вміст амінокислот: приблизно до 15-ї години явно зменшується маса основних амінокислот, а концентрація глутаміноової кислоти знижується незначно; до 20-ї години смотрпадіння кількості аспарагінової кислоти. Інтенсивний біосинтез антибіотика відбувається після помітного падіння вмісту в середовищі основних амінокислот. [5]

6. Які методи технологічного контролю застосовуються в одержанні біоміцину?

Технологічний контроль – це визначення параметрів середовища – рН, температура, розчинений кисень.

Отже, для синтезу ХТЦ необхідно середовище для культивування, що має рН 6,6 -7,2; температура – 27-28. Необхідною умовою є посилена аерація. [6]

7. Які принципи лежать в основі методів визначення активності ХТЦ?

Біологічними методами визначення активності антибіотиків є дифузійний та турбідометричний методи.

Дифузійний метод :

+ простий у виконанні

+дозволяє визначати чутливість до кількох ЛЗ одночасно

- Менш точний ( аніж метод серійних розведень, наприклад) [3]

Турбідометричний метод:

+ має високу чутливість

-  його застосування обмежене у зв’язку з тим, що на світлорозсіювання дуже впливає розмір часток, тому при порівнянні стандартів і проби необхідне суворе дотримання ідентичності умов. [7]

СПИСОК ВИКОРИСТАНОЇ ЛІТЕРАТУРИ:

1. ХЛОРТЕТРАЦИКЛІН Електронний ресурс] // Режим доступу: https://ru.wikipedia.org/wiki/%D0%A5%D0%BB%D0%BE%D1%80%D1%82%D0%B5%D1%82%D1%80%D0%B0%D1%86%D0%B8%D0%BA%D0%BB%D0%B8%D0%BD

2. Антибіотики у ветинарії Електронний ресурс] // Режим доступу: http://vetvrach.info/antibiotiki4.html

3. http://buklib.net/books/36167/

4. Хлортетрацикліну гідрохлорид Електронний ресурс] // Режим доступу: http://etolen.com/index.php?option=com_content&view=article&id=2711

5. Н.С. Егоров Основы учения об антибиотиках: Учебник. 6-е изд., перераб. и доп. - М.: Изд-во МГУ; Наука, 2004. - 528 с.

6. Технології мікробного синтезу лікарських засобів: Лабор. практикум для студ.  напряму 6.051401 "Біотехнологія" ден. та заоч. форм навчання /Уклад.: Л.М. Буценко, В.О.Красінько. – К.: НУХТ, 2011. – 82 с.

7. Турбідометрія [Електронний ресурс] // Режим доступу: http://www.pharmencyclopedia.com.ua/article/2296/turbidimetriya