Биохимия нервной системы

Дата: _______________

Занятие № 36 работа № 1: определение глюкозы в спинномозговой жидкости

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ: нормальное содержание глюкозы в спинномозговой жидкости относительно велико (2,5 – 3,9 ммоль/л), но на 25-40% ниже, чем в крови. Концентрация глюкозы в СМЖ может повышаться или понижаться в зависимости от содержания глюкозы в крови. Исследование этого показателя имеет важное диагностическое значение в неврологической и нейрохирургической практике.

ХИМИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ МЕТОДА:

ПЕРОКСИДАЗА

ХОД РАБОТЫ: взять три пробирки: опыт, стандарт и контроль.

П РОБА отмерить	ОПЫТ	СТАНДАРТ	КОНТРОЛЬ
Сыворотка крови Стандартный раствор глюкозы (5,55 ммоль/л) Н2О Рабочий реактив	0,02 мл - - 2,0 мл	- 0,02 мл - 2,0 мл	- - 0,02 мл 2,0 мл
	Перемешать, инкубация в термостате 20 минут при 37º С.
	ФЭК,  = 500 нм, колориметрия опыта и стандарта против контрольной пробы, кювета - 5 мм.

РЕЗУЛЬТАТ: Е ст = ; Е оп = ; Сст = 5,55 ммоль/л

К

_·

онечный результат получают по формуле:

Ест

Сст

Соп =

= ммоль/л.

Еоп

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

Нормальное содержание глюкозы в спинномозговой жидкости взрослых людей: 2,50 – 3,9 ммоль/л, у детей: 3,33 - 4,44 ммоль/л.

Повышенное содержание глюкозы в спинномозговой жидкости (гипергликорахия) отмечается при: менингоэнцефалитах, сахарном диабете, эпилепсиях, травматических повреждениях мозга, ишемических нарушениях мозгового кровоснабжения.

Снижение содержания глюкозы в спинномозговой жидкости (гипогликорахия) отмечается при: бактериальном и гнойном менингитах (причины – усиление гликолиза, нарушения ГЭБ, повышенное использование глюкозы клетками ликвора), саркоидозе, трихинеллезе, первичных и метастатических опухолях ЦНС.

ВЫВОД:

Дата: ______________

Занятие № 37 работа № 1: определение общего белка в спинномозговой жидкости биуретовым методом

ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ: содержание белка в спинномозговой жидкости, в отличие от сыворотки крови, незначительно. Определение общего белка в спинномозговой жидкости имеет важное значение для диагностики опухолей мозга и воспалительных заболеваний центральной нервной системы.

ХИМИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ МЕТОДА: раствор белка в щелочной среде в присутствии сульфата меди (NaOH/CuSO₄) окрашивается в сине-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации белка в сыворотке крови и определяется фотометрически.

ХОД РАБОТЫ: взять опытную и контрольную пробирки.

ОТМЕРИТЬ	ОПЫТ	КОНТРОЛЬ
РЕАКТИВ ГОРНАЛА СПИННОМОЗГОВАЯ ЖИДКОСТЬ NaCl 0,9%	4,0 мл 0,1 мл -	4,0 мл - 0,1 мл
Перемешать, фотометрия через 20 минут. Кювета 1 см, λ=540 нм (зеленый светофильтр)

РЕЗУЛЬТАТ:

Е оп =

С общего белка =

КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

Нормальное содержание общего белка в спинномозговой жидкости – 0,22-0,33 г/л.

Гиперпротеинрахия – увеличение уровня белка в СМЖ наблююдается при: менингитах (серозный и гнойный), опухолях головного мозга, полиомиелите, арахноидите, кровоизлияниях в мозг, абсцессах мозга, рассеянном склерозе.

Гипопротеинрахия – снижение уровня белка в СМЖ отмечается при: гидроцефалии, гиперсекреции ликвора, доброкачественной внутричерепной гипертензии.

ВЫВОД:

Дата: _______________